研究課題
特別研究員奨励費
本研究は腸管に存在する末梢由来制御性T細胞(pTreg)の特性および 発生・分化・維持機構の解明を目的として以下の解析を行う。1. pTregが胸腺由来Tregと同質か，安定な細胞系譜であるかを解明する。2. 生体内でどのように発生・分化するのか，pTreg前駆細胞の存在はあるのかを明らかにする。3. 各種遺伝子改変マウスを用いて，pTreg発生および維持への関与が想定される各種免疫担当細胞・微小環境・分子機構を明らかにする。pTregは腸管粘膜や付属リンパ器官において経口免疫寛容の維持に関与すると考えられるため，本研究の成果は食物アレルギーなどの治療法の確立に寄与すると考える。
令和4年度は，既に樹立しているpTreg発生の実験系(遺伝子改変マウスと改変給餌; DO11.10/Rag2KO/Foxp3-eGFPマウスおよび卵白粉末添加飼料)を発展させ，生理学的条件に近いpTregの発生および機能の解析を目的とした。本実験系に用いているマウスは遺伝子変異により胸腺由来TregおよびB細胞を欠くため，(1)胸腺欠損マウスであるヌードマウスと本遺伝子改変マウス由来のナイーブT細胞を使用した実験系と(2)遺伝子改変マウスに野生型nTregを移入した実験系を用いて，より解決課題に直線的なアプローチを選択することとした。(1)ナイーブT細胞移入後4週間後にマウスを解析したところ，抗原非存在下すなわち通常給餌条件下ではpTreg発生は見られない一方で，抗原刺激存在下では末梢組織においてpTregの存在が認められた。このことから，pTreg発生は胸腺非依存的に生じる現象であることを示した。(2)野生型nTregを移入したマウスでは，抗原刺激存在下においてpTreg発生を抑制することが明らかになった。このことから，野生型nTregはpTreg発生も含むT細胞の活性化を広範囲に抑制することが明らかとなり，昨年度実施した骨髄キメラマウスの結果を支持するデータを得た。pTregの機能解析を目的として，Tape-stripping + papain + OVAを用いてマウス耳介におけるdelayed-type hypersensitivityを評価した。その結果，餌を介した抗原刺激によってpTregを発生させた群では炎症状態は誘導されず，炎症性サイトカイン産生T細胞の分化が抑制されていることが明らかになった。これは，pTregが経口免疫寛容の成立に寄与していることを支持する結果である。
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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