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細菌識別機能を有するボロン酸型蛍光プローブ複合体の開発

研究課題

研究課題/領域番号 20J20891
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
審査区分 小区分34020:分析化学関連
研究機関上智大学

研究代表者

三ヶ木 彩芽  上智大学, 理工学研究科, 特別研究員(DC1)

研究期間 (年度) 2020-04-24 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
2022年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2021年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2020年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
キーワード細菌認識 / 糖認識 / ボロン酸 / デンドリマー / 分光分析
研究開始時の研究の概要

近年、抗生物質の濫用と多剤耐性菌の出現が世界的な課題となっており、簡便かつ迅速な病原体の識別法が求められている。
本研究では目視による短時間での病原体識別を目指すことで、この課題の解決に取り組む。即ち、細菌を選択的に認識して凝集・色相変化させる、新たな蛍光分子複合体を開発する。具体的には、細菌表面の糖鎖をターゲットとした複合体を設計・合成した後に、優れた分子については菌溶液を用いて認識機能を評価することで、臨床応用が可能な実践的手法の確立を試みる。

研究実績の概要

本研究では、蛍光と凝集作用を持つ分子プローブを設計・新規合成することで、高感度かつ選択的な細菌識別を目指す。細菌認識部位には、細菌表面の糖鎖と結合するボロン酸を採用している。令和3年度までには、樹状高分子であるデンドリマーの表面にボロン酸とその他置換基を修飾した分子プローブを合成し、高感度な細菌認識や、広範なpH条件での細菌認識に成功した。
令和4年度は、1)細菌表面上に存在する認識ターゲットの特定、2)ボロン酸2種を用いた細菌認識力の評価に取り組んだ。
1)について、グラム陽性菌選択性を示すボロン酸プローブが、グラム陽性菌表面のリポタイコ酸を認識していることを初めて明らかにした。また、プローブの表面電荷を調節すると細菌選択性が変化し、グラム陰性菌である大腸菌の特定の株に選択性を持つようになることも示された。
2)の評価に関しては、従来用いてきたフェニルボロン酸と、新たに選定したベンゾキサボロールの2種を比較した。ベンゾキサボロールを修飾したプローブは、フェニルボロン酸修飾プローブよりも顕著なグラム陽性菌選択性を示した。また、これまでフェニルボロン酸単体では不可能だった酸性条件下でも細菌認識に成功した。さらに、凝集体の大きさの差異を利用してグラム陽性菌のみを濾別し捕集することにも成功した。
これら1)、2)の結果から、ボロン酸修飾デンドリマーは表面電荷に応じて細菌選択性を調節出来ることが示された。また、グラム陽性菌選択性を与える場合にはプローブはリポタイコ酸を認識しており、ボロン酸の酸性度を変えることで認識力を強化出来ることも明らかとなった。以上の成果より、本研究課題のボロン酸修飾デンドリマーは高機能かつ多様な細菌を認識できる新たな手法として大きく期待出来る他、凝集体形成に基づく新たな細菌捕集法としても応用を見込めることが示された。

現在までの達成度 (段落)

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(3件)
  • 2022 実績報告書
  • 2021 実績報告書
  • 2020 実績報告書
  • 研究成果

    (17件)

すべて 2023 2022 2021

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 4件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 3件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Aggregation-Based Bacterial Separation with Gram-Positive Selectivity by Using a Benzoxaborole-Modified Dendrimer2023

    • 著者名/発表者名
      Mikagi Ayame、Takahashi Yotaro、Kanzawa Nobuyuki、Suzuki Yota、Tsuchido Yuji、Hashimoto Takeshi、Hayashita Takashi
    • 雑誌名

      Molecules

      巻: 28 号: 4 ページ: 1704-1704

    • DOI

      10.3390/molecules28041704

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Boronic Acid-Based Dendrimers with Various Surface Properties for Bacterial Recognition with Adjustable Selectivity2022

    • 著者名/発表者名
      Mikagi Ayame、Manita Koichi、Tsuchido Yuji、Kanzawa Nobuyuki、Hashimoto Takeshi、Hayashita Takashi
    • 雑誌名

      ACS Applied Bio Materials

      巻: 5 号: 11 ページ: 5255-5263

    • DOI

      10.1021/acsabm.2c00680

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Rapid Bacterial Recognition over a Wide pH Range by Boronic Acid-Based Ditopic Dendrimer Probes for Gram-Positive Bacteria2021

    • 著者名/発表者名
      Mikagi Ayame、Manita Koichi、Yoyasu Asuka、Tsuchido Yuji、Kanzawa Nobuyuki、Hashimoto Takeshi、Hayashita Takashi
    • 雑誌名

      Molecules

      巻: 27 号: 1 ページ: 256-256

    • DOI

      10.3390/molecules27010256

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Fast and Sensitive Bacteria Detection by Boronic Acid Modified Fluorescent Dendrimer2021

    • 著者名/発表者名
      Mikagi Ayame、Tsurufusa Riho、Tsuchido Yuji、Hashimoto Takeshi、Hayashita Takashi
    • 雑誌名

      Sensors

      巻: 21 号: 9 ページ: 3115-3115

    • DOI

      10.3390/s21093115

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 超分子ナノ構造体の設計と細菌識別技術2021

    • 著者名/発表者名
      Mikagi Ayame、Hayashita Takashi
    • 雑誌名

      化学工業

      巻: 72 ページ: 109-116

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] ボロン酸修飾デンドリマーによる細菌識別とメカニズムの評価2022

    • 著者名/発表者名
      三ヶ木 彩芽・眞仁田 晃一・与安 明日香・土戸 優志・橋本 剛・神澤 信行・早下 隆士
    • 学会等名
      日本分析化学会第71年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] ベンゾオキサボロール修飾デンドリマーの設計と細菌識別機能評価2022

    • 著者名/発表者名
      高橋 洋太郎・三ヶ木 彩芽・鈴木 陽太・橋本 剛・早下 隆士
    • 学会等名
      第82回分析化学討論会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] ジトピック型ボロン酸デンドリマーによる細菌認識法の開発2022

    • 著者名/発表者名
      三ヶ木 彩芽・眞仁田 晃一・与安 明日香・土戸 優志・橋本 剛・神澤 信行・早下 隆士
    • 学会等名
      第19回ホスト-ゲスト・超分子化学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Bacteria Recognition by Boronic Acid-Based Ditopic Dendrimers for Gram-Positive Bacteria2022

    • 著者名/発表者名
      Ayame Mikagi, Koichi Manita, Asuka Yoyasu, Yuji Tsuchido, Nobuyuki Kanzawa, Takeshi Hashimoto, Takashi Hayashita
    • 学会等名
      The 8th International Conference on Ion Exchange (ICIE 2022)
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Design of PAMAM Dendrimer Modified with Benzoxaborole for Bacteria Discrimination2022

    • 著者名/発表者名
      Yotaro Takahashi, Yota Suzuki, Ayame Mikagi, Takeshi Hashimoto, Takashi Hayashita
    • 学会等名
      The 8th International Conference on Ion Exchange (ICIE 2022)
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ボロン酸修飾PAMAMデンドリマーを用いた細菌認識法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      三ヶ木 彩芽・鶴房 莉帆・土戸 優志・橋本 剛・早下 隆士
    • 学会等名
      第35回日本イオン交換研究発表会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] ダンシル修飾フェニルボロン酸デンドリマーを用いた高感度細菌検出法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      三ヶ木 彩芽・鶴房 莉帆・土戸 優志・橋本 剛・早下 隆士
    • 学会等名
      日本分析化学会第70年会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] ボロン酸修飾デンドリマーを用いた蛍光測定による高感度細菌認識法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      三ヶ木 彩芽・鶴房 莉帆・土戸 優志・橋本 剛・早下 隆士
    • 学会等名
      第17回ホスト-ゲスト・超分子化学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] A novel convenient and sensitive detection for bacteria by fluorescent labelled dendrimers with boronic acid2021

    • 著者名/発表者名
      Ayame Mikagi, Riho Tsurufusa, Yuji Tsuchido, Takeshi Hashimoto and Takashi Hayashita
    • 学会等名
      The International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2021 (Pacifichem 2021)
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ダンシル蛍光団を有するフェニルボロン酸デンドリマーを用いた高感度細菌認識法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      三ヶ木 彩芽・鶴房 莉帆・土戸 優志・橋本 剛・早下 隆士
    • 学会等名
      日本化学会第101春季年会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] ボロン酸修飾デンドリマーを用いた蛍光測定による高感度細菌認識法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      三ヶ木 彩芽・鶴房 莉帆・土戸 優志・橋本 剛・早下 隆士
    • 学会等名
      第17回ホスト-ゲスト・超分子化学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [図書] Design of Boronic Acid-Based Nanoprobes for Sensitive and Selective Bacterial Recognition2023

    • 著者名/発表者名
      Ayame Mikagi
    • 総ページ数
      203
    • 出版者
      Sophia University
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書

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公開日: 2020-07-07   更新日: 2024-03-26  

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