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有用単糖の生産を目的とした多糖類資化細菌NT5株の酵素群の解析

研究課題

研究課題/領域番号 20K05835
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分38030:応用生物化学関連
研究機関信州大学

研究代表者

野村 隆臣  信州大学, 学術研究院繊維学系, 准教授 (90362110)

研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2020年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
キーワード多糖類分解 / アルギン酸 / ペクチン酸 / リアーゼ / 加水分解 / バイオエタノール / 単糖生産 / 多糖類分解細菌 / 酵素 / ペクチン質
研究開始時の研究の概要

申請者が単離した新規細菌NT5株は、アルギン酸やペクチン質等の天然多糖類を分解・資化する酵素群の推定遺伝子を保有しており、下記課題を遂行することで「原料多糖類から有用単糖への高効率変換」の新規技術の基盤構築を図る。
【課題Ⅰ】個体レベルの解析:NT5株が分解・資化可能な多糖類を把握する。
【課題Ⅱ】遺伝子工学的アプローチによる解析:NT5株の多糖類分解・資化に寄与する推定遺伝子の機能同定と遺伝子工学的改良(アルギン酸とペクチン質を最優先)。
【課題Ⅲ】in vitro 単糖生産システムの最適化:課題Ⅱで得たリコンビナント酵素(改良型を含む)を用いて原料多糖類から単糖生産の反応組成や各種条件を最適化。

研究成果の概要

天然多糖類を原料とするバイオエタノールの実用的生産系の基盤構築を目指すにあたり、我々が独自に単離した新規細菌NT5株の多糖類分解特性、および保有する推定の多糖類分解酵素の機能同定を行った。NT5株はアルギン酸資化能を指標に単離された新規細菌であるが、アルギン酸以外にもペクチンを含む複数の天然多糖類に対して強い資化性を有すること、アルギン酸とペクチン酸の推定の分解酵素の遺伝子について、8種中6種を機能同定することに成功した。アルギン酸分解酵素では、エンド型とエキソ型の両触媒様式を有するユニークな酵素を見出し、今後の発展的応用化に期待が持てる成果が得られた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

天然多糖類からの有用単糖の生産において、NT5株が保有する酵素群が高い潜在性を持つことが示された。本研究におけるこの成果は、単糖生産の高効率化に直結することから、バイオエタノールの実用的な生産系の基盤となり得るものであり、化石燃料への依存度の低下・クリーンエネルギーの割合増加の実現に向けた重要な位置づけにあると言える。また、NT5株が保有するユニークなアルギン酸分解酵素の発見は学術的に極めて興味深いものであり、エンド型/エキソ型の触媒様式をもたらす分子機構の解明につながると考えられる。

報告書

(4件)
  • 2022 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2021 実施状況報告書
  • 2020 実施状況報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて 2022 2021 2020

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (10件)

  • [雑誌論文] The natural bicyclic hexapeptide RA-VII is a novel inhibitor of the eukaryotic translocase eEF2.2022

    • 著者名/発表者名
      Miyoshi T, Nomura T, Takeya K, Uchiumi T.
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun

      巻: 615 ページ: 88-93

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2022.05.035

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 裾花川の石油湧出地点より単離したバクテリア (Acinetobacter beijerinckii susohanaR) の石油分解能2020

    • 著者名/発表者名
      森脇 洋, 藤井 朱瑞, 伊藤 隆, 野村 隆臣
    • 雑誌名

      信州大学環境科学論文集

      巻: 42 ページ: 92-109

    • NAID

      120007099503

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 簡便かつ安価な大腸菌無細胞タンパク質合成系の構築を目指して2022

    • 著者名/発表者名
      Choong Chi Yan, 野村 隆臣
    • 学会等名
      第86回 日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Long Type PL6 アルギン酸リアーゼに見られるユニークな特徴2022

    • 著者名/発表者名
      堀越 妃乃, 野村 隆臣
    • 学会等名
      第86回 日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] カチオン化セルロースナノウィスカー/ポリビニルアルコール(PVA)複合フィルムの力学物性および抗菌性2022

    • 著者名/発表者名
      山崎 拓真, 野村 隆臣, 荒木 潤
    • 学会等名
      2022年繊維学会年次大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 大腸菌無細胞タンパク質合成系の低コスト化2022

    • 著者名/発表者名
      Choong Chi Yan, 野村 隆臣
    • 学会等名
      第45回 日本分子生物学会年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] エンド型とエキソ型の触媒様式を示す PL6 アルギン酸リアーゼの生化学的特徴2022

    • 著者名/発表者名
      堀越 妃乃, 野村 隆臣
    • 学会等名
      第45回 日本分子生物学会年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 銀ナノ粒子担持セルロースナノウィスカーをフィラーに用いた複合材料の力学物性および抗菌性2021

    • 著者名/発表者名
      小坂 十理之, 野村 隆臣, 荒木 潤
    • 学会等名
      第71回日本木材学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] 銀ナノ粒子吸着ホヤセルロースナノウィスカー/ポリビニルアルコールナノコンポジットフィルムの力学物性2021

    • 著者名/発表者名
      上田 哲平, 野村 隆臣, 荒木 潤
    • 学会等名
      第71回日本木材学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] 裾花川の石油湧出地点から単離したバクテリアによる油分解 (Oil degradation by a bacterial strain isolated from the oil-leaching site at Susohana River)2021

    • 著者名/発表者名
      森脇 洋, 藤井 朱瑞, 伊藤 隆, 野村 隆臣
    • 学会等名
      第29回環境化学討論会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] PL6アルギン酸リアーゼAly85NTに見られるユニークな酵素特性2021

    • 著者名/発表者名
      堀越 妃乃, 野村 隆臣
    • 学会等名
      第73回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] 銀ナノ粒子担持セルロース/PVA複合材料の力学物性及び抗菌性能2020

    • 著者名/発表者名
      小坂 十理之, 野村 隆臣, 荒木 潤
    • 学会等名
      第70回日本木材学会大会 (鳥取大会)
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書

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公開日: 2020-04-28   更新日: 2024-01-30  

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