| 研究課題/領域番号 |
20K07041
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 基金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 審査区分 |
小区分47030:薬系衛生および生物化学関連
|
|---|
| 研究機関 | 神戸学院大学 (2021-2022)
大阪大谷大学 (2020) |
|---|
研究代表者 |
竹橋 正則 神戸学院大学, 栄養学部, 教授 (10378862)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
|
| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
|
| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2021年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2020年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
|
|---|
| キーワード | ポリ(ADP-リボシル)化 / PARP / 多能性幹細胞 / PARP阻害剤 |
|---|
| 研究開始時の研究の概要 |
PARPはDNA一本鎖切断が生じると活性化され、標的タンパク質をポリ(ADP-リボシル)化（PAR化）することで、DNA修復に関わることが知られている。PAR化を抑制するPARP阻害剤が、最近、抗がん剤として承認され注目されている。我々はこれまで、通常の培養下で体細胞に比べPAR化が亢進状態である組織幹細胞では、PAR化の抑制によって増殖抑制や細胞死が起こることを見出した。本研究の目的は、同様にPAR化が亢進しているマウス多能性幹細胞において、そのPAR化の役割を明らかにすることである。これによって幹細胞間での共通性を明らかにし、幹細胞におけるPAR化の役割を深く理解することができる。
|
| 研究実績の概要 |
PARPはDNA一本鎖切断が生じると活性化され、標的タンパク質をポリ(ADP-リボシル)化（PAR化）することで、DNA修復に関わることが知られている。現在、PAR化を抑制するPARP阻害剤が、抗がん剤として用いられている。我々は、通常培養下の組織幹細胞で、体細胞に比べPAR化が亢進状態であることを見出した。そのPAR化をPJ34（一般的に実験で用いられるPARP阻害剤）で抑制することによって増殖抑制や細胞死が起こることを明らかにした。本研究の目的は、同様にPAR化が亢進していることを明らかにしたマウス多能性幹細胞において、そのPARP阻害剤によるPAR化抑制の影響を調べることである。組織幹細胞および多能性幹細胞におけるPARP阻害剤の共通の影響をもとに、幹細胞におけるPAR化の役割を明らかにしようとしている。また、実際臨床で用いられているPARP阻害剤の幹細胞への影響も調べることで、幹細胞に対する副作用について、有用な知見を得ることができる。
当初の２年間で、PARP阻害剤（PJ34）がマウスES細胞の増殖を抑制し、細胞死を誘導することを明らかにした。この研究に用いたPARP阻害剤はPARP1およびPARP2に対して阻害効果があるため、この影響がどちらのPARPに対する阻害（もしくは両方）によるものかをを確かめるため、shRNA発現レンチウイルスベクターを使ってPARP1およびPARP2の発現を抑制したES細胞を作成した。その解析の結果、PARP1の発現抑制が増殖抑制や細胞死誘導に強く関わっていると考えられた。
本年度は、実際臨床で用いられている２種類のPARP阻害剤を用いて、これまでの一連の解析を実施し、PJ34と同様の影響があることを確かた。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初の研究期間である３年間で得られた結果をまとめ、論文発表するところまで至っていないため順調とは言えない。
|
| 今後の研究の推進方策 |
臨床使用されているものも含めたPARP阻害剤、PARP1、PARP2およびPARGノックダウンの多能性幹細胞への影響を詳細に比較し、多能性幹細胞におけるポリ(ADP-リボース)代謝の役割についてその知見をまとめ、論文発表する準備を進める。
|
