研究課題/領域番号 |
20K07472
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分49040:寄生虫学関連
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研究機関 | 国立感染症研究所 |
研究代表者 |
永宗 喜三郎 国立感染症研究所, 寄生動物部, 室長 (90314418)
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研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2020年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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キーワード | トキソプラズマ / 細胞内寄生 / ミトコンドリア / 細胞内規制 / 小胞体 / 輸送 / オルガネラ |
研究開始時の研究の概要 |
本研究ではまず、新たなリクルート因子候補、PDIRおよびRON3が実際にリクルートに関与していることを、リバースジェネティクス的手法を用いて明らかにする。また、それぞれのリクルート因子遺伝子にビオチンリガーゼを融合させて、それぞれの因子と相互作用しているタンパク質を同定する。
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研究実績の概要 |
本研究ではまず、新たなリクルート因子候補として同定済みの2つの遺伝子産物が実際にリクルートに関与していることを、リバースジェネティクス的手法を用いて明らかにする。これらの遺伝子は原虫の増殖に必須であることが示唆されているので、CRISPR/CAS9系(mBio (2014), PLoS ONE (2014))を用いたノックアウト原虫の作製が不可能である可能性が高いものと思われた。実際にCRISPR/CAS9系および古典的な相同組み換えの系の2つの方法を用いてノックアウトを試みたが、いずれの方法でもノックアウト株は確立できなかった。現在、Auxin inducible degron (AID)を用いたコンディショナルノックアウトの系を用いて機能解析を継続中である。
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