| 研究課題/領域番号 |
20K07732
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分51030:病態神経科学関連
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| 研究機関 | 弘前大学 (2022)
筑波大学 (2020-2021) |
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研究代表者 |
丹羽 康貴 弘前大学, 医学研究科, 准教授 (40590071)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2020年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | 前脳基底部 / Ntrk1 / 破傷風毒 / 脳波筋電図測定 / 睡眠覚醒 / アセチルコリン |
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| 研究開始時の研究の概要 |
私たちの行動は外界からの情報や以前の経験によって常に左右される。ものを避けるといった瞬発的な行動から、寝不足や長時間の集中による頭の疲れなど、さまざまな時間幅での制御機構が予想されるが、特にゆっくりとした情報処理・応答が神経回路の中でどのように実装されているかの研究は遅れている。本研究では、睡眠負債という言葉が示すように、ゆっくりとした情報処理・応答が特に重要である睡眠覚醒行動に注目し、その覚醒制御に重要な前脳基底部アセチルコリン神経においてどのような分子シグナルが覚醒制御におけるゆっくりとした情報処理・応答を担っているのかを明らかにする。
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| 研究実績の概要 |
私たちの行動は外界からの情報や以前の経験によって常に左右される。ものを避けるといった瞬発的な行動から、寝不足や長時間の集中による頭の疲れなど、さ まざまな時間幅での覚醒制御機構が予想される。そこで本研究では覚醒制御における時間~日レベルのゆっくりとした情報処理・応答が、覚醒を支える神経回路においてどのように実装されているのかを明らかにすることを目的とする。特に、覚醒制御に重要であることが知られている前脳基底部アセチルコリン神経に注目し、その細胞内分子シグナルを遺伝学的に操作することによって、睡眠覚醒行動に影響を与える分子シグナルを明らかにする。前年度は脳定位固定装置を用いたキャピラリーインジェクションによるアデノ随伴ウイルス(AAV)導入の実験系の立ち上げを行い、導入した遺伝子の発現を免疫組織化学で確認することができた。今年度はCre依存的に破傷風毒の発現が誘導されるAAVを作製し、 Ntrk1-IRES-Creマウスの前脳基底部領域および前脳基底部アセチルコリン神経の主な投射先の一つである海馬領域にキャピラリーインジェクションによるAAV導入を行い、それと同時に脳波・筋電図測定用の電極留置手術を行なった。2週間ほどの回復期間をおき、脳波・筋電図測定および睡眠行動解析を行なった。行動解析後に脳を固定し免疫組織化学を行なったところ海馬領域における導入遺伝子発現がよく確認できたため、そのサンプルサイズを増やしていくことを計画した。その途中に研究代表者の異動が決まり、計画は一時的に中断することになった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
前脳基底部アセチルコリン神経におけるNtrk1シグナル関連分子の過剰発現マウスを作製し検証するための予備実験として、破傷風毒を発現するアデノ随伴ウイルス(AAV)の作成、キャピラリーインジェクションによるウイルス導入、そしてインジェクションしたマウスの脳波・筋電図測定および免疫組織化学による導入遺伝子発現の確認までの一連の実験を行うことができた。しかし、サンプルサイズを増やすことを計画している段階で研究代表者の異動が決まったため、一旦計画を中断することを余儀なくされた。
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| 今後の研究の推進方策 |
まずは異動後の環境において、これまでに行なった実験系を再び立ち上げていく。その上で、海馬領域におけるウイルス導入および脳波・筋電図測定したマウスのサンプルサイズを増やしていく。
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