| 研究課題/領域番号 |
20K08224
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分52050:胎児医学および小児成育学関連
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| 研究機関 | 愛知県医療療育総合センター発達障害研究所 |
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研究代表者 |
中山 敦雄 愛知県医療療育総合センター発達障害研究所, 細胞病態研究部, 部長 (50227964)
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| 研究分担者 |
松木 亨 愛知県医療療育総合センター発達障害研究所, 細胞病態研究部, 主任研究員 (90332329)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | Mecp2 / レット症候群 / 遺伝子治療 / オリゴデンドロサイト / AAVベクター / モデルマウス / Rett症候群 / マウスモデル / miRNA |
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| 研究開始時の研究の概要 |
Rett症候群は原因遺伝子が判明している発達症・知的障害の中では比較的頻度が高く、国内にも多くの患女児が存在する。近年他の遺伝子疾患で成果を上げている遺伝子補充療法による症状の改善や進行の抑制が期待されているが、原因遺伝子産物（その遺伝子を元に作られるタンパク質）の機能が非常に多岐におよび、また複雑でもあるために、単純な補充療法で予測通りの効果が得られるか、また予想できない副作用が起きないかといった懸念が残っている。本研究ではこの原因遺伝子産物の機能の中でRett症候群の症状に特に関連が大きいと考えられる部分に焦点を絞り、遺伝子治療の新しい標的を動物実験で探る。
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| 研究実績の概要 |
レット症候群遺伝子治療の実現に向けて、miRNA補充によりモデル動物であるMecp2ノックアウト（KO）マウスを用いた動物実験を計画した。予備実験としてまずMecp2KOマウス（Mecp2-/y）にMecp2プロモーターで駆動されるMecp2発現ベクターの導入を行なったが、治療効果は見られず生後８週程度で全てのマウスが死に絶える状態であった。
このため当初の計画を修正し、Mecp2KOマウスの寿命を伸ばすためにMecp2発現を制御する適切なプロモーターを検討することとした。我々はこのモデルマウスが神経所見を示さずに生後８週程度で死亡することと、これまでのオリゴデンドロサイトでのMecp2の重要性を示した論文（Nguyen et al, J Neurosci 2013、Sharma et al, J Mol Neurosci 2015）に着目し、オリゴデンドロサイトを標的とした遺伝子治療ベクターを構築し、その有用性を検討した。
令和４年度は引き続き、この遺伝子治療によるKOマウスの寿命延長効果の検討を進めた。CNPプロモーターによりMecp2をオリゴデンドロサイト特異的に発現させるアデノ随伴ウイルスベクターを眼窩静脈から全身性に投与し、生後１５週まで寿命を延長させることができた。このベクターは大量に投与してもこれまで副反応は認めていない。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
これまで文献で報告されている以上にMecpKOマウスの寿命が短く、また繁殖も困難であること。さらにこれに起因して当初の実験計画を修正したため。
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| 今後の研究の推進方策 |
研究期間を１年延長し、実験対象マウス例の蓄積を進める。Mecp2KOマウスは継代により脆弱性が増してくることがあるため、必要に応じてジャクソンラボから新しい精子ストックの購入を検討する。
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