| 研究課題/領域番号 |
20K08622
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分53040:腎臓内科学関連
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| 研究機関 | 藤田医科大学 |
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研究代表者 |
三浦 惠二 藤田医科大学, 保健衛生学部, 講師 (20199946)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2022年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2021年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2020年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
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| キーワード | 抗血管内皮細胞抗体 / 自己抗体 / 自己抗原 / 細胞表面抗原 / 血管炎 / 抗血管内細胞抗体 / COVID-19 / AECA / 全身性エリテマトーデス / 自己免疫性腎炎 / 腎炎 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
慢性腎臓病につながる自己免疫性腎炎を対象にした研究です。自己免疫性腎炎の患者血清中には血管内皮細胞の表面に結合する抗体（AECA）が存在することが知られていますが、何に結合しているかは不明です。
私たちは、AECAの抗体価を測定のための新たな方法としてCSP-ELISA法を独自に開発（2018年特許成立）し、その後、ループス腎炎の活動性との関連を検討してきました。しかし、AECAが結合する自己抗原複合体の全体像は不明のままです。本研究では、この複合体の全容を解明し、病態の把握、慢性腎臓病の早期発見や治療効果の判定を可能にする新たな検査法の確立を目的としています。
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| 研究成果の概要 |
当初の計画では、自己免疫性腎炎患者のリンパ球から、EBウイルスを用いたリンパ芽球細胞株を株化すること、さらに自己抗体産生細胞のクローニングを外注予定だった。しかしサービスが中止となったため研究方法を変更した。
古典的な免疫沈降法を採用した。患者血清からIgGを精製し、血管内皮細胞（HUVEC）の膜画分に反応させた。IgGに結合したタンパク質を回収し、プロテオミクス解析を行った。患者血清だけで検出されるタンパク質が73種類判明した。さらにProteome discoverer 解析により、局在が細胞膜と想定される７つのタンパク質を特定した。これらが新たな自己抗原かどうかの確認実験を進めている。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
多様な自己免疫疾患には、それぞれ特徴的な自己抗原が同定され、各疾患の診断基準となる検査に使われている抗原も多い。しかしそれら自己抗原の多くが細胞内に局在するタンパク質であるのに対し、患者血清中には細胞表面に結合する自己抗体、例えば抗血管内皮細胞抗体（AECA）が検出されることも多く、その矛盾は長年の疑問である。
本研究では、自己免疫性腎炎患者血清中に存在する自己抗体の中に、血管内皮細胞表面に局在する膜タンパクに結合する抗体がある、という観点から、その膜タンパクを同定し、新規自己抗原として検査や病態解明に利用することを目的とした。現在までに、７つの候補タンパクが同定され、確認実験を実施中である。
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