| 研究課題/領域番号 |
20K09050
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分55020:消化器外科学関連
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| 研究機関 | 千葉県がんセンター(研究所) (2021-2023)
千葉大学 (2020) |
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研究代表者 |
賀川 真吾 千葉県がんセンター(研究所), 肝胆膵外科, 部長 (90507302)
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| 研究分担者 |
高野 重紹 千葉大学, 医学部附属病院, 講師 (20436380)
大塚 将之 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (90334185)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円)
2021年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2020年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | Myl9 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
Myl9は血小板から放出され、Myl9 netsと呼ばれる網目状構造を形成する。また近年好中球細胞外トラップは、癌の進展機構において注目されており、膵癌微小環境における、これら網目状の構造物が、どのように癌の進展、特に転移に関わるかにつき、外科切除術後の膵癌サンプル中における局在や、他のEMT-METマーカーとの相関につき明らかにするとともに、臨床病理学的因子との関連を詳細に解析する。膵癌発生マウスモデルを用い、癌細胞が遠隔転移巣を形成するまでの過程において、Myl9などのタンパクが癌微小環境内において果たす役割につき可視化することで、新規治療標的としての可能性を検討する。
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| 研究実績の概要 |
膵癌患者血漿中Myl9の発現が高値は、膵癌切除検体においてリンパ管 侵 襲、静脈侵襲、神経浸潤と相関し、膵癌の転移メカニズムに関与していることが示唆された。 そこで、膵癌切除検体を免疫染色することにより、膵癌細胞の細胞質内で Myl9が高発現している症例では早期の血行性転移再発をきたし、結果として予後不良であった。 そこで、膵癌の血行性転移メカニズムにつき、膵癌細胞株においても検討することとした。Myl9の発現は、概して、膵癌原発巣由来の膵癌細胞株に比べ、転移巣由来の細胞株で高値 と なっており、臨床データにおける血行性転移例での発現を支持する結果となっていた。 原発巣由来膵癌細胞株Panc-1 と転移巣由来膵癌細胞株 CFPAC-1 につきsiRNAを用いMyl9をノックダウンし、コントロールと比較した。 Myl9をノックダウンす ることにより、proliferationには影響を及ぼさないものの、migration assay、invasion assayにおいて、それぞれ細胞の運動能、浸潤能が低下した。 Myl9の発現はin vitroの実験系においてもがん細胞のmotility, invasivenessに関与していることが示された。一方当初Myl９は血小板由来の分子と考えていたため、病理組織標本における、癌細胞周囲の間質に発現するMyl9につき再評価した。癌細胞及び、癌周囲間質にもMyl9が高く発現している症例で特に予後不良で あった。 Myl9は上記血小板由来のものの他、ミオシンを構成する成分であることから筋収縮の調整や細胞質ゾル中のストレスファイバーに多く存在することも知られており、臓器ごとのRNAseqの結果からは食道や膀胱など線維芽細胞の多い組織に発現が多い傾向が見られ、正常膵組織には少ない。したがって、癌細胞での発現は 遊走転移の能力を獲得する過程で発現してきたものと考えられ、Myl9が高発現している膵癌症例で血行性転移が多いこと、脈管侵襲や神経叢浸潤の傾向が強いことを裏付けるデータであったと考える。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初血液中の血小板由来Myl9発現について注目していたが、膵癌細胞自体にもMyl9 の発現が認められた。 研究を進めていくと、当初の血小板由来のMyl9の腫瘍免疫的な役割よりも、ミオシンの構成成分であるMyl9が膵の癌化の過程で発現し、遊走能、浸潤能を獲得していることがin vitroの実験系で確認されたが、血液中のMyl9と組織中のMyl9の関連性につき考察中である。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初の仮説である好中球再妨害トラップ(Neutrophils extracellular trap; NETs)とMyl9 の関係については、同定が困難であったため、ミオシン構成成分とし てのMyl9に注目して、メインテーマの膵癌の転移機構について検討中である。主に癌細胞における遊走能、浸潤能を獲得していることがin vitroの実験系で確認された。実験データを論文化し投稿を検討している。
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