抗ストレス薬は糖尿病患者の創傷治癒を促進するか？

• 研究課題/領域番号: 20K09860
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分56070:形成外科学関連
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 宮田 昌幸 新潟大学, 医歯学系, 講師 (30261928)
• 研究分担者: 長谷川 剛 新潟大学, 医歯学総合病院, 特任教授 (90251800) ; 岩倉 百合子 新潟大学, 脳研究所, 助教 (40452081)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2025-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2023年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2022年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2020年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: 抗ストレス薬 / 創傷治癒 / 糖尿病 / 脳由来神経栄養因子 / 上皮成長因子 / 抗ストレス / 脳由来神経栄養因子（BDNF） / 上皮細胞増殖因子（EGF)

研究開始時の研究の概要

「抗ストレス薬は糖尿病患者の創傷治癒を促進させ得る」との仮説を立て、基礎的実験を行う。難治性の創傷を有する患者の多くは抑うつ状態にある（糖尿病では約30％）が、抗ストレス薬は抑うつ状態のみならず創傷をも改善させ得る可能性について、動物モデルにて検証する。糖尿病とその予備軍は約2,000万人と推計されており、60歳以上の足病変有病者数は700万人を越えている。長期治療からストレス下にある糖尿病患者の慢性創傷の効率的治療法の確立は大きな課題となっているが、抗ストレス薬投与が手術や血管内治療、再生医療など高額な医療の導入前もしくは併用すべき有効な手段となりうるか、臨床応用への可能性を探る。

研究実績の概要

創傷治癒効果の評価に用いる因子として血液中の脳由来神経栄養因子(brain-derived neurotrophic factor: 以下BDNF)の他に上皮化成長因子（epidermal growth factor：以下EGF)を追加することを決定し必要な試薬を購入した。測定の意義と実現可能性について研究分担者（岩倉百合子　脳研究所助教）とは緊密に検討を加えてきた。さらにBDNFとEGFを酵素化学免疫吸着法で測定する系を脳研究所に立ち上げ直ちに測定できる体制を整え実験動物を導入する段階となった。また、組織標本を作製し上皮および真皮の欠損長、肉芽面積をHE染色、Masson Trichrome染色標本にて求める際の標本の採取法および新生細胞、新生血管、神経の関与、炎症所見ついて、CD31(PECAM-1) 、CD45抗体などマウスに用いる試薬を研究分担者（長谷川 剛特任教授）と協議して決定した。 マウスの創傷は肉様層の収縮により人体では生じない過度の創収縮が起こるため、この作用を打ち消すため一般にはディスクを逢着する。しかし、糖尿病マウスではこの操作で褥瘡を形成する危惧があるためより低侵襲で皮膚愛護的なハイドロコロイド材を用い創傷治癒過程を観察することとした。
以下については進捗した。
①治癒と関連する血液学的な因子を測定する系の立ち上げ（研究分担者、技官、大学院生との分担と協力体制の実際）。②各実験段階において必要最小の動物個体数を各4に設定し直した。③皮膚欠損創の作成法と部位および過度の創収縮を抑制する材料の決定。
大きな変更点として抗ストレス薬を柴胡加竜骨牡蛎湯からより高い抗ストレス作用が期待できる抑肝散に変更することとした。薬剤の提供含め、セロトニン神経系およびグルタミン酸神経系への作用メカニズムの先行研究を踏まえた実験系へ該当製薬会社学術担当と検討を進めている。

現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

下記の検討と決定に時間を要し研究の進行が遅延した。
①本研究では採血データが重要で検体採取は失敗できない（採取後安楽死）ため具体的な採血法と測定方を再度慎重に協議した。②限られた予算内で各実験段階において有意差が確認できる必要最小の動物個体数の確定。③抗ストレス薬として柴胡加竜骨牡蛎湯より高い抗ストレス作用が見込める抑肝散に変更したが、その裏付けの打ち合せ。また、購入できるマウス個体数の制限からジアゼパム、パロキセチンの両方の群は作成できないため選択打ち合せ。
研究者分担者との協議および第66回日本形成外科学会総会・学術集会、第32回日本形成外科学会基礎学術集会などへの参加を通じて以上の点に専門的知識を有する研究者と意見交換を繰り返した。
上記を概ね進めたが、COVID-19感染の未収束と海外での紛争拡大、円安の影響で糖尿病マウス、飼料などの高騰が重なったことも実験進行の遅延につながった。

今後の研究の推進方策

実験に用いる糖尿病マウスの必要個体数と投与薬剤（飼料混和）を調達し、速やかに動物実験を開始する。
特に以下の点について速やかに着手したい。
ストレス負荷と抗ストレス薬投与による抗ストレス薬の創傷治癒促進効果の判定。
この結果により抗ストレス薬の効果が認められた場合は、次の段階としてストレス負荷無しのマウスモデルで抗ストレス薬が創傷治癒を促進するかに関して実験とそのデータ解析を進める。