研究課題/領域番号 |
20K12229
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分64020:環境負荷低減技術および保全修復技術関連
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研究機関 | 愛知工業大学 |
研究代表者 |
西村 聡子 愛知工業大学, 工学部, 准教授 (90609322)
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研究分担者 |
飯島 信司 愛知工業大学, 工学部, 教授 (00168056)
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研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2020年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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キーワード | アンモニア酸化細菌 / 環状ジヌクレオチド / バイオフィルム / 生物学的窒素処理 / 生物的硝化・脱窒 / 脱窒菌 / 環状ジグアニル酸 / 廃水処理 / 生物学的硝化・脱窒 |
研究開始時の研究の概要 |
生活・工業廃水中に含まれる種々の窒素化合物は河川や湖沼、内海の富栄養化を引き起こすため、大きな環境問題となっている。これらの窒素化合物を処理する方法として、アンモニア酸化細菌や硝化菌などを用いた生物学的硝化・脱窒法が広く利用されている。 一般に細菌はバイオフィルムと呼ばれる立体的な膜構造を形成することで、環境の変化に強くなることが知られている。そのため、生物学的硝化・脱窒に関わる細菌のバイオフィルム形成制御は、廃水処理において重要な意味を持つ。 本研究は、アンモニア酸化細菌や硝化菌のバイオフィルム形成の制御機構を解析することで、生物学的硝化・脱窒過程の高効率化をめざすものである。
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研究実績の概要 |
廃水中の窒素化合物処理法として、微生物を用いた生物学的硝化・脱窒法が広く利用されている。このうち硝化・脱窒の過程では、それぞれアンモニア酸化細菌および脱窒菌が重要な役割を果たす。これらの細菌はバイオフィルムを形成して存在すると考えられるため、そのバイオフィルム形成制御機構を解明することで廃水処理の効率化を図ることを目的とした。そのためバイオフィルム制御に関与する環状ジグアニル酸(c-di-GMP)に着目し、c-di-GMP合成・分解酵素遺伝子の探索およびその機能解析を行った。 1)脱窒菌P. denitrificansにおけるc-di-GMP代謝関連酵素の遺伝子解析を行い、2つの合成酵素および2つの分解酵素を同定し、これらの遺伝子のクローニングを進めた。バイオフィルム形成条件についても検討し、好気性・嫌気性条件下でのバイオフィルム形成を確認した。またc-di-GMPのバイオフィルム形成に対する効果を検討した。 2)アンモニア酸化細菌N. europaeaは難培養性であるため、まず安定した培養方法および増殖のモニタリング方法を確立した。また色素染色や共焦点顕微鏡観察により、バイオフィルム形成を確認した。遺伝子導入方法についても検討を進め、コロニーの単離方法を確立した。c-di-GMP代謝酵素遺伝子の探索の結果、(i)合成酵素ドメインをもつ遺伝子3つ、(ii)分解酵素ドメインをもつ遺伝子7つおよび(iii)両方のドメインをもつ遺伝子5つを同定した。今年度は機能不明である(iii)の遺伝子発現について検討した他、さらにクローニングを進め、得られた分解・合成酵素の酵素活性を比較検討した。 この結果より得られたN. europaeaおよびP. denitrificansのc-di-GMP合成・分解酵素遺伝子およびその生理機能に関する知見は、これらのバイオフィルム制御に役立つと考えられる。
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