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卵巣予備能が牛における原始卵胞の活性化と初期卵胞発育に及ぼす影響

研究課題

研究課題/領域番号 20K15672
研究種目

若手研究

配分区分基金
審査区分 小区分42020:獣医学関連
研究機関岐阜大学 (2023-2024)
北海道大学 (2020)

研究代表者

坂口 謙一郎  岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (40867545)

研究期間 (年度) 2022-12-19 – 2025-03-31
研究課題ステータス 完了 (2024年度)
配分額 *注記
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2020年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
キーワード卵巣予備能 / 原始卵胞活性化 / 二次卵胞 / 体外発育培養 / 牛 / In vitro growth (IVG) / 卵胞 / 暑熱ストレス
研究開始時の研究の概要

卵巣内に存在する原始卵胞数は、卵子の受精能や性ステロイドホルモン分泌に関わる卵巣の潜在的能力 (卵巣予備能) と相関し、ヒトや牛の繁殖能力の指標となることが知られている。しかし、卵巣予備能が原始卵胞の卵胞発育への動員 (原始卵胞活性化) や、卵胞腔形成前の初期卵胞の発育にどのような影響を及ぼすかは不明である。本研究は、牛卵胞の体外発育培養 (IVG) 技術を用いて、卵巣予備能が原始卵胞活性化と初期卵胞の発育や、ホルモンおよび成長因子の分泌、卵胞の分化に重要な転写因子の発現に及ぼす影響を明らかにすると共に、得られた結果を元に、発生能の高い卵子を生産可能なIVG系を開発する。

研究成果の概要

卵巣予備能が低い場合、体外での原始卵胞活性化が高率に起こり、テストステロン産生量は低下することが明らかとなった。また、体外原始卵胞活性化および二次卵胞発育に最適な基礎培地を見出し、改善した培養系由来の体外発育二次卵胞を体外成熟培養に供したところ、減数分裂の再開および第一減数分裂中期への到達を確認した。さらに、卵巣予備能を低下させる一因である暑熱ストレスは、初期胞状卵胞由来卵子の抗酸化能を低下させ、卵子発生能を低下させることを明らかにした。得られた知見に基づき、培養温度を通常よりも低い37.5℃としたところ、従来の初期胞状卵胞由来卵子における報告の中で最も高い61.9%の胚盤胞発生率が得られた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究では、二次卵胞における体外培養特有の代謝異常を補正し、また初期胞状卵胞由来卵子において培養温度を生体内に近づけることで、各培養系の改善を達成した。これにより、初期卵胞の発育において、生体内での卵胞発育に関する知見が培養系の最適化に重要であることが示された。一方で、体外培養下では卵巣組織および二次卵胞に代謝異常が生じることも明らかとなった。今後、代謝を含む多角的な視点から、体内と体外における卵胞発育の違いを明らかにし、原始卵胞からの胚生産を可能にする新たな培養技術を開発することが期待される。この技術は、家畜生産にとどまらず、ヒトの生殖医療や希少野生動物の保全にも貢献する可能性がある。

報告書

(4件)
  • 2024 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2023 実施状況報告書
  • 2020 実績報告書
  • 研究成果

    (27件)

すべて 2025 2024 2023 2021 2020 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (7件) (うち国際共著 1件、 査読あり 7件、 オープンアクセス 4件) 学会発表 (18件) (うち国際学会 7件、 招待講演 7件) 備考 (1件)

  • [国際共同研究] エジンバラ大学/リーズ大学(英国)

    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [雑誌論文] Effects of heat stress on gene expression associated with antioxidant capacity of bovine early antral follicles2025

    • 著者名/発表者名
      KAWANO Kohei、SAKAGUCHI Kenichiro、FURUKAWA Eri、NINPETCH Nattapong、YANAGAWA Yojiro、KATAGIRI Seiji
    • 雑誌名

      The Journal of Veterinary Medical Science

      巻: 87 号: 6 ページ: 680-684

    • DOI

      10.1292/jvms.25-0055

    • ISSN
      0916-7250, 1347-7439
    • 関連する報告書
      2024 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] In vivo ovarian temperature promotes the in vitro growth and developmental competence of oocytes derived from bovine early antral follicles2025

    • 著者名/発表者名
      Kawano Kohei、Sakaguchi Kenichiro、Yanagawa Yojiro、Katagiri Seiji
    • 雑誌名

      Theriogenology

      巻: 238 ページ: 117371-117371

    • DOI

      10.1016/j.theriogenology.2025.117371

    • 関連する報告書
      2024 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Optimization of ovum pick-up-<i>in vitro</i> fertilization and <i>in vitro</i> growth of immature oocytes in ruminants2025

    • 著者名/発表者名
      SAKAGUCHI Kenichiro
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 71 号: 1 ページ: 1-9

    • DOI

      10.1262/jrd.2024-091

    • ISSN
      0916-8818, 1348-4400
    • 関連する報告書
      2024 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Physiological high temperatures alter the amino acid metabolism of bovine early antral follicles2024

    • 著者名/発表者名
      KAWANO Kohei、SAKAGUCHI Kenichiro、NINPETCH Nattapong、YANAGAWA Yojiro、KATAGIRI Seiji
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 70 号: 3 ページ: 184-191

    • DOI

      10.1262/jrd.2023-096

    • ISSN
      0916-8818, 1348-4400
    • 関連する報告書
      2024 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Relationship between Amino Acid Metabolism and Bovine In Vitro Follicle Activation and Growth2023

    • 著者名/発表者名
      Sakaguchi Kenichiro、Kawano Kohei、Otani Yuki、Yanagawa Yojiro、Katagiri Seiji、Telfer Evelyn E.
    • 雑誌名

      Animals

      巻: 13 号: 7 ページ: 1141-1141

    • DOI

      10.3390/ani13071141

    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Effect of increased oxygen availability and astaxanthin supplementation on the growth, maturation and developmental competence of bovine oocytes derived from early antral follicles2020

    • 著者名/発表者名
      Chelenga Madalitso、Sakaguchi Kenichiro、Abdel-Ghani Mohammed A.、Yanagawa Yojiro、Katagiri Seiji、Nagano Masashi
    • 雑誌名

      Theriogenology

      巻: 157 ページ: 341-349

    • DOI

      10.1016/j.theriogenology.2020.07.023

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Follicle priming by FSH and pre-maturation culture to improve oocyte quality in vivo and in vitro2020

    • 著者名/発表者名
      Sakaguchi Kenichiro、Nagano Masashi
    • 雑誌名

      Theriogenology

      巻: 印刷中 ページ: 122-129

    • DOI

      10.1016/j.theriogenology.2020.01.023

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 全ての肉牛を乳牛が産む未来を切り拓く―牛卵子・卵胞の体外発育培養の最適化―2024

    • 著者名/発表者名
      坂口謙一郎
    • 学会等名
      令和6年度東海畜産学会大会シンポジウム「新しいウシの繁殖技術」
    • 関連する報告書
      2024 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 胚生産のこれまでとこれから―4ヶ国・4動物種における研究経験を踏まえて―2024

    • 著者名/発表者名
      坂口謙一郎
    • 学会等名
      令和6年度岐阜県獣医師会西濃支部研修会
    • 関連する報告書
      2024 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 牛卵子の体外発育培養~卵巣内の小さな卵子をフル活用する~2024

    • 著者名/発表者名
      坂口謙一郎
    • 学会等名
      名大発アカデミックフラッシュ
    • 関連する報告書
      2024 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 牛の体外・体内発育卵胞による卵胞機能障害の病態生理学的研究2024

    • 著者名/発表者名
      坂口謙一郎
    • 学会等名
      第167回日本獣医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2024 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Hypoxanthine improves oocyte growth and energy metabolism during in vitro growth of bovine secondary follicles2024

    • 著者名/発表者名
      Sakaguchi K, Ball L, Srsen V, Grosbois J, Picton HM, Telfer EE
    • 学会等名
      Fertility 2024
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Optimising media to support In vitro activation/IVA and In vitro growth/IVG of bovine primordial/preantral follicles2023

    • 著者名/発表者名
      Kenichiro Sakaguchi, Evelyn E Telfer
    • 学会等名
      Kenichiro Sakaguchi, Evelyn E Telfer
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Effects of high temperature within physiological range on the amino acid metabolism of in vitro growing oocyte-granulosa cell complexes derived from bovine early antral follicles2023

    • 著者名/発表者名
      Kawano K, Sakaguchi K, Ninpetch N, Yanagawa Y, Katagiri S
    • 学会等名
      The 49th Annual Conference of the International Embryo Technology Society
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 卵巣予備能って何? -生殖医療と獣医療の観点から-2023

    • 著者名/発表者名
      坂口謙一郎
    • 学会等名
      持続可能な発展のための国際基礎科学年 SRD一般公開シンポジウム「卵巣と精巣のかたち・はたらきと未来像」
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] OPUっていつやればいいの?-FSHを投与する時・しない時-2023

    • 著者名/発表者名
      坂口謙一郎
    • 学会等名
      北海道牛受精卵移植研究会第40回研究発表会
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 牛の体内における卵巣内温度に基づいた培養温度が初期胞状卵胞に由来する卵子の体外発育および 発生能に及ぼす影響2023

    • 著者名/発表者名
      河野光平, 坂口謙一郎, 栁川洋二郎, 片桐成二
    • 学会等名
      第166回日本獣医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [学会発表] The base media used for the in vitro activation and growth of bovine immature follicles impacts on follicle energy metabolism2023

    • 著者名/発表者名
      Kenichiro SAKAGUCHI, Laura BALL, Vlastimil SRSEN, Johanne GROSBOIS, Helen M PICTON, Evelyn E TELFER
    • 学会等名
      第116回 日本繁殖生物学会大会
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [学会発表] In vitro embryo production in ruminants2023

    • 著者名/発表者名
      Kenichiro Sakaguchi
    • 学会等名
      7th International Livestock Biotechnology Symposium, 60th the Philippine Society of Animal Science Scientific Meeting
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Effects of culture condition based on in vivo ovarian tissue temperature on the in vitro growth and developmental competence of oocytes derived from bovine early antral follicles2023

    • 著者名/発表者名
      Kawano K, Sakaguchi K, Yanagawa Y, Katagiri S
    • 学会等名
      International Symposium on Animal Bioscience 2023
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Plasma sex steroid hormone profiles after a single dose of epidural administration of follicle-stimulating hormone via caudal vertebrae in cattle2021

    • 著者名/発表者名
      1)Sakaguchi K, Yanagawa Y, Ninpetch N, Kawano K, Suda T, Yoshioka K, Katagiri S, Nagano M
    • 学会等名
      Fertility 2021
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] The effects of heat exposure on the growth and developmental competence of oocytes derived from early antral follicles in dairy cows2021

    • 著者名/発表者名
      Kawano K, Sakaguchi K, Furukawa E, Chelenga M, Yanagawa Y, Katagiri S
    • 学会等名
      The 47th Annual Conference of the International Embryo Technology Society
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 牛卵巣内の主席卵胞と黄体の存在が初期胞状卵胞由来卵子の核成熟能と顆粒層細胞の性ステロイドホルモン産生能に及ぼす影響2020

    • 著者名/発表者名
      坂口 謙一郎, 河野 光平, 栁川 洋二郎, 片桐 成二, 永野 昌志
    • 学会等名
      第163回日本獣医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 暑熱が乳牛の初期胞状卵胞に由来する卵子の発育, 成熟および顆粒層細胞の性ステロイドホルモン産生能に及ぼす影響2020

    • 著者名/発表者名
      河野 光平, 坂口 謙一郎, 古川 瑛理, Madalitso Chelenga, 栁川 洋二郎, 片桐 成二
    • 学会等名
      第163回日本獣医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] Astaxanthin supplementation during 8-days of IVG culture under different oxygen tensions promotes developmental competence of bovine oocytes derived from early antral follicles2020

    • 著者名/発表者名
      Madalitso Chelenga, 坂口 謙一郎, 古川 瑛理, 栁川 洋二郎, 片桐 成二, 永野 昌志
    • 学会等名
      第163回日本獣医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [備考] 岐阜大学応用生物科学部共同獣医学科 獣医臨床繁殖学研究室 研究内容

    • URL

      https://www.abios.gifu-u.ac.jp/education-member/rinpan/study.html

    • 関連する報告書
      2024 実績報告書

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公開日: 2020-04-28   更新日: 2026-01-16  

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