| 研究課題/領域番号 |
20K16530
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分52010:内科学一般関連
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| 研究機関 | 山陽小野田市立山口東京理科大学 |
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研究代表者 |
高田 誠 山陽小野田市立山口東京理科大学, 薬学部, 助教 (60551348)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 260千円 (直接経費: 200千円、間接経費: 60千円)
2022年度: 390千円 (直接経費: 300千円、間接経費: 90千円)
2021年度: 260千円 (直接経費: 200千円、間接経費: 60千円)
2020年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
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| キーワード | トシリズマブ / HPLC / 選択的沈殿法 / COVID-19 / サイトカイン放出症候群 / 抗体医薬品 / インフリキシマブ / 自然蛍光検出 / 蛍光検出 / FRET / 薬物相互作用解明 / サイトカインストーム |
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| 研究開始時の研究の概要 |
市販の蛍光試薬を用いて、トシリズマブ（TCZ）由来の自然蛍光と蛍光共鳴エネルギー移動（FRET）を起こす蛍光試薬をスクリーニングするとともに、各濃度並びに条件の最適化を行う。続いて、TCZとサブクラスであるIgG1の前処理を行い、HPLCによる分離条件の検討を行う。その後、最適化した条件を用いて市販のヒト血清へと適用し、本法の実用性を評価する。最後に、病院との共同研究により、実際の関節リウマチ治療患者の血液を対象としてTCZ濃度の定量を行う。また、メトトレキサートやNSAIDs併用時における各医薬品の血中濃度の推移と奏功率や有害事象について取りまとめを行う。
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| 研究成果の概要 |
本研究により、塩基性試薬であるオクチルアミンを含むアセトニトリル溶液とトリフルオロ酢酸水溶液を組み合わせることでIgG1を除去しトシリズマブ（TCZ）を選択的に回収できる画期的な選択的沈殿法を見出した。さらに、ヒト血清中のTCZを選択的沈殿法による前処理後にHPLCを用いてTCZの自然蛍光を検出することで極めて迅速かつ簡便に定量する分析法を開発した。選択的沈殿法は物理化学的な前処理法であることから、ELISA のように抗体医薬品ごとに前処理を変更する必要性がなく、汎用性の面でも優れた手法であると考える。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
TCZは関節リウマチなどの慢性疾患の治療のみならず、近年ではCOVID-19などによるサイトカイン放出症候群（CRS）の治療にも適用が拡大され、急性期治療時の効果確認の必要性が増加している。本研究は、慢性疾患の治療効果を確認するための感度としては不十分であったものの、これまで報告されているいずれの分析法と比較しても迅速性の面で極めて優れていることから、緊急性の高い場面における治療効果確認においては有用な手法となる。また、開発した選択的沈殿法は、抗原－抗体反応を用いない物理化学的手法あることから、マウス由来のアミノ酸比率の異なるキメラ型抗体やヒト型抗体に対しても有用であることが期待される。
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