| 研究課題/領域番号 |
20K16744
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分52040:放射線科学関連
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| 研究機関 | 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構 |
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研究代表者 |
小林 亜利紗 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構, 量子医科学研究所 物理工学部, 主任研究員 (30773931)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 放射線誘発バイスタンダー効果 / 放射線抵抗性 / 線質依存性 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
放射線がん治療では様々な線質の放射線が用いられているが、近年、照射領域外の非照射細胞に対して照射細胞と類似した生物学的効果が現れる「放射線誘発バイスタンダー効果」による影響を加味する必要があることが明らかになっている。バイスタンダー効果は照射細胞の周囲にいた非照射細胞に対し、死や損傷を与えるのみならず、適応応答やDNA修復促進等の放射線抵抗性をもたらすことも報告されている。非照射がん細胞の放射線抵抗性獲得は、繰り返し照射を基本とする現在の放射線がん治療において、治療効果低減を招くことが懸念される。そこで本研究ではバイスタンダー効果による放射線抵抗性獲得における機序を評価する。
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| 研究実績の概要 |
本研究はバイスタンダー効果によるがん細胞の放射線抵抗性獲得の線質依存性および機序を明らかにすることを目的とした。
現在までに重粒子線（炭素イオン、鉄イオン）および硬エックス線をヒト肺がんA549細胞に照射し、照射細胞が同一生存率を示す条件間におけるバイスタンダーがん細胞の応答を、抵抗性獲得に関与する分子：Cyclooxygenase-2(COX-2)の発現を指標に比較評価した。その結果、エックス線と炭素イオン照射条件のバイスタンダーがん細胞では非照射コントロール条件と比較して有意にCOX-2発現が増加する一方、鉄イオン照射条件においては非照射コントロール条件との差は見られなかった。さらに炭素イオン照射バイスタンダー細胞においては、COX-2の転写因子であるNF-κBが活性化していたが、鉄イオンではNF-κB活性が見られなかった。このことから、バイスタンダー応答によるCOX-2発現とその経路に線質依存性が存在し、鉄イオンによる照射はバイスタンダー細胞の放射線抵抗性獲得を抑制する可能性を示した。研究再開後は、①鉄イオンによって照射されたバイスタンダーがん細胞において、実際に放射線抵抗性獲得が抑制されるのか、②バイスタンダーがん細胞における放射線抵抗性獲得がCOX-2活性によっておきる現象なのか確認する。
具体的には、①については、重粒子線（炭素イオン、鉄イオン）もしくは硬エックス線および陽子線マイクロビームをヒト肺がんA549細胞に照射したのち、照射細胞と共培養したバイスタンダー細胞に対して放射線照射を行い、下記の実験を行う。
（１） 細胞生存率をコロニー形成法により取得する。（２） アポトーシス誘発頻度をAnnexin VのFCM解析により評価する。
（３） DSB修復経路の活性をヒストンタンパク質のリン酸化によって評価する。
②については、COX-2ノックアウト細胞を用い、上記（１）-（３）の実験を行うことによって評価する
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
令和3年11月～令和4年3月まで産前産後の休暇および育児休業を取得し、当該期間の研究を中断したため。
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| 今後の研究の推進方策 |
研究再開後は、①鉄イオンによって照射されたバイスタンダーがん細胞において、実際に放射線抵抗性獲得が抑制されるのか、②バイスタンダーがん細胞における放射線抵抗性獲得がCOX-2活性によっておきる現象なのか確認する。
具体的には、①については、重粒子線（炭素イオン、鉄イオン）もしくは硬エックス線および陽子線マイクロビームをヒト肺がんA549細胞に照射したのち、照射細胞と共培養したバイスタンダー細胞に対して放射線照射を行い、下記の実験を行う。
（１） 細胞生存率をコロニー形成法により取得する。（２） アポトーシス誘発頻度をAnnexin VのFCM解析により評価する。
（３） DSB修復経路の活性をヒストンタンパク質のリン酸化によって評価する。
②については、COX-2ノックアウト細胞を用い、上記（１）-（３）の実験を行うことによって評価する。
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