研究課題/領域番号 |
20K17473
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研究種目 |
若手研究
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配分区分 | 基金 |
審査区分 |
小区分54030:感染症内科学関連
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研究機関 | 藤田医科大学 |
研究代表者 |
稲葉 正人 藤田医科大学, 医学部, 客員講師 (10836050)
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研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 130千円 (直接経費: 100千円、間接経費: 30千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
2020年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
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キーワード | ノルアドレナリン / カルバペネム耐性腸内細菌科細菌 / アミノグリコシド / 宿主ストレスホルモン / 細菌の増殖速度 / バイオフィルム産生量 / ノルアドレナリンによる薬剤耐性化機構 |
研究開始時の研究の概要 |
宿主由来のストレス関連ホルモンであるノルアドレナリン(以下NA)が細菌に作用し、病原因子の産生を促進させるとの報告がある。しかし細菌の薬剤感受性に対するNAの作用については、一部の細菌に対して特定の抗菌薬の感受性を低下させるとの報告があるものの、多くの細菌については不明であり、そのメカニズムについても明らかにされていない。 本研究では、NAによる抗菌活性低下作用が特に問題になることが予想されるカルバペネム耐性腸内細菌を研究対象菌株とし、NAにより活性が低下する抗菌薬の同定、およびRNAシーケンスによるNA存在下・非存在下での遺伝子発現の定量解析により、NAによる薬剤耐性化機構の解明を目指す。
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研究実績の概要 |
各抗菌薬のカルバペネム耐性腸内細菌目細菌に対する抗菌活性が、ストレスホルモンのノルアドレナリン(NA)によってどのように変化するかこれまでに以下の検討を行った。 sequence type (ST)78とST133のEnterobacter cloacae complex(Enterobacter hormaechei) およびATCC株(Enterobacter hormaechei ATCC49162)を用いて、10 μMのNAが含有する液体培地と含有しない液体培地でアミノグリコシド系抗菌薬(アミカシン、ゲンタマイシン)の最小発育阻止濃度(MIC)と最小殺菌濃度(MBC)を測定した。いずれの検討もそれぞれ独立して3回解析を行なった。その結果、NA存在下では、いずれのSTのEnterobacter cloacae complexもアミノグリコシド系抗菌薬のMICが1~2管上昇した。またチゲサイクリン、コリスチンについても同様に抗菌活性を検討したが、これら2つの抗菌薬の活性はNA存在下で変化しなかった。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
2022年度の研究計画では、1) RNA シーケンスによるNA存在下・非存在下での遺伝子発現の定量解析、2) リアルタイムPCRによる標的遺伝子のmRNA定量解析を行う予定であったが、新型コロナウイルス感染症の流行の影響を受け、試薬や機材の搬入が大幅に遅れ、計画通りには施行することができなかった
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今後の研究の推進方策 |
これまでに行なった研究結果を再度検討し、ノルアドレナリンによりアミノグリコシド系抗菌薬の活性低下に関与する遺伝子を同定するため、本年度は網羅的な遺伝子発現解析を行う予定である。すでに試薬等は準備できているため、昨年度よ りも計画通りの検討が行える準備は揃っている。
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