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2光子顕微鏡を用いた大脳皮質運動野の嚥下機能Top-down修飾機構と病態解明

研究課題

研究課題/領域番号 20K18262
研究種目

若手研究

配分区分基金
審査区分 小区分56050:耳鼻咽喉科学関連
研究機関獨協医科大学

研究代表者

穴澤 卯太郎  獨協医科大学, 医学部, 助教 (70622299)

研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2025-03-31
研究課題ステータス 中途終了 (2023年度)
配分額 *注記
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円)
2022年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2021年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2020年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
キーワード2光子レーザー顕微鏡 / リッキング / 赤外線カメラ / 大脳皮質運動野 / 嚥下機能 / 大脳皮質嚥下領野 / 内因性シグナル / 末梢神経 / 大脳皮質嚥下運動野 / 嚥下障害 / 神経回路 / Top-down修飾
研究開始時の研究の概要

嚥下関連領野(大脳)から嚥下中枢(脳幹)への神経路が障害されると、嚥下の開始が遅延する。その結果、誤嚥性肺炎をきたすことが実地臨床で知られている。本研究では、嚥下運動を直接制御していると考えられている大脳皮質運動野に着目し、『2光子顕微鏡を用いた大脳皮質運動野の嚥下機能Top-down修飾機構と病態解明』を推進する。本研究により嚥下機構に対する新たな知見や成果、また、嚥下障害に対する新規リハビリテーション、Brain machine interface技術の活用、創薬などが期待される。

研究実績の概要

前年の赤外線カメラを用いたマウスリッキングシステムによる嚥下運動の行動学的評価法を用いて、飲水時の舌の運動評価を行った。赤外線カメラを顕微鏡ステージ上に固定し、舌の動きを各フレームで舌の先端に手動で印をつけることでトラッキングを行った。その結果、楕円を描くような動きで舌の先端は動いていることが明らかになった。さらに、赤外線センサーをリッキングスパウトの先端とマウスの口元の間に装備し、マウスが舌をリッキングスパウトに伸ばそうとするとセンサを横切り記録されるように配置した。その結果、舌運動は高速の単振動を示唆する運動となることが明らかになった。
同システムを2光子顕微鏡装置と組み合わせた。具体的には、ランダムなシグナルを出力し分岐させ一つは顕微鏡へ入力、もう一つはマウスリッキングシステムに入力させる。顕微鏡はシグナルが入力されると20秒間の撮像を行うようなトリガーインシステムで撮像を行う。また、複数のチャンネルで、イメージング、5秒後の水の排出、赤外線センサをモニターする。一方で、舌のマウスリッキングシステムにはシグナルが入力されると5秒後に水が排出されるものとする。この一連の行動を1trialとし計20trial行う。2光子顕微鏡で大脳皮質嚥下運動野を観察し、マウスがリッキングする直前の5秒、リッキング時、リッキング後の長い潜時で活動する神経細胞を観察する系を構築した。現在、同実験系で興奮性神経細胞の活動を解析している。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

2光子レーザー顕微鏡とリッキングシステムの同期について、最も拡張機能を有する方法の模索に時間を要した。外部からのランダムな刺激を用い、各装置はそれを入力する側として構築することで、さらに同期するべき装置が増えた際にも対応できるような実験系とした。

今後の研究の推進方策

今年度は、2光子レーザー顕微鏡とリッキングシステムを用いた、嚥下行動時の大脳皮質運動野におけるリアルタイムイメージングを行う系が構築できた。次年度は、同実験系を用いて、大脳皮質運動野の1層、2/3層、5層、6層などの各層の活動の役割や細胞種別の活動解析(興奮性神経細胞および抑制性神経細胞)を行う。

報告書

(4件)
  • 2023 実施状況報告書
  • 2022 実施状況報告書
  • 2021 実施状況報告書
  • 2020 実施状況報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて 2023 2022

すべて 学会発表 (4件)

  • [学会発表] 嚥下運動における大脳皮質嚥下領野の機能的な神経活動パターンの解析2023

    • 著者名/発表者名
      穴澤卯太郎, 穐吉亮平, 栃木康祐,  西嶌嘉容,  坂本光, 田中康広
    • 学会等名
      第124回日本耳鼻咽喉科学会学術講演会
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [学会発表] マウス大脳皮質嚥下領野における神経回路網の構造的代償機構2023

    • 著者名/発表者名
      西嶌嘉容, 穐吉亮平, 栃木康祐, 穴澤卯太郎,  坂本光, 田中康広
    • 学会等名
      第124回日本耳鼻咽喉科学会学術講演会
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [学会発表] マウスを用いた嚥下中枢(CPG)における機能的な神経回路様式の解明2023

    • 著者名/発表者名
      坂本光, 穐吉亮平, 栃木康祐, 穴澤卯太郎, 西嶌嘉容, 田中康広
    • 学会等名
      第124回日本耳鼻咽喉科学会学術講演会
    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
  • [学会発表] マウス大脳皮質嚥下運動野における神経細胞腫特異的な活動動態.2022

    • 著者名/発表者名
      西嶌嘉容, 穐吉亮平, 栃木康佑, 穴澤卯太郎, 坂本光, 田中康広
    • 学会等名
      第123回 日本耳鼻咽喉科学会総会・学術講演会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書

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公開日: 2020-04-28   更新日: 2024-12-25  

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