| 研究課題/領域番号 |
20K18379
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分56060:眼科学関連
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
河嶋 瑠美 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (00843616)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2022年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2020年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
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| キーワード | 網膜内層シナプス / シナプスリモデリング / 緑内障 / 網膜シグナル伝達 / 短波長 / 接着分子 / 高眼圧モデルマウス |
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| 研究開始時の研究の概要 |
まず発現プロファイルを網羅解析するためNecl-1-EGFPマウスを作成して網膜を単細胞まで分離しフローサイトメーターで濃縮した後にSingle cell analysis により発現プロファイルを作成し、すでに先行研究で報告されているデータベースを基に発現細胞種を網羅的に取得する。同定できた細胞種の特異抗体を用いてタンパク発現レベルでの確認を行う。さらにWT, KOマウス各々において高眼圧負荷モデルを作成し高解像度顕微鏡や広域電子顕微鏡によるシナプス形態変化、網膜電図や二光子顕微鏡による機能変化の比較解析を行う。これによりIPLにおけるシナプス異常とリモデリングを検出する。
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| 研究成果の概要 |
本研究ではマウス網膜に多く存在する接着分子Necl-1が短波長光誘導シグナル経路の中でも錐体OFF経路のシナプス形成及び伝達に重要であること、さらにマウスの眼球運動の制御に関与していることを報告した。また既報で報告されているsingle cell 解析のサブ解析を行いNecl-1の発現細胞を把握し、形態学的にNecl-1発現細胞の網膜内での分布を3次元で解析する方法を確立することができた。緑内障モデルマウスとして一過性高眼圧マウスの作製に成功したが、モデルマウスにおける網膜内層シナプス解析までは至らなかった。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
慢性視神経変性疾患である緑内障は眼圧という圧負荷によって網膜内層が障害され視神経が障害される疾患であり日本の途中失明原因の1位である。網膜に存在する接着分子であるNecl-1はシグナル伝達におけるOFF経路に重要な役割を持つ。さらに近年緑内障モデル動物において網膜神経節細胞死が起こる前に網膜内層の１つである内網状層 (IPL)のOFF層が先行して障害されOFF型網膜神経節細胞が眼圧依存性にシナプス可塑性を持つことが報告された。本研究ではNecl-1を用いて高眼圧負荷時における修復再生に関わる分子基盤を解明することで初期緑内障におけるシナプスリモデリングの病態解明に挑んだ。
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