| 研究課題/領域番号 |
20K18379
|
|---|
| 研究種目 |
若手研究
|
| 配分区分 | 基金 |
|---|
| 審査区分 |
小区分56060:眼科学関連
|
|---|
| 研究機関 | 大阪大学 |
|---|
研究代表者 |
河嶋 瑠美 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (00843616)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
|
| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
|
| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2022年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2020年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
|
|---|
| キーワード | 網膜内層シナプス / シナプスリモデリング / 高眼圧モデルマウス / 緑内障 |
|---|
| 研究開始時の研究の概要 |
まず発現プロファイルを網羅解析するためNecl-1-EGFPマウスを作成して網膜を単細胞まで分離しフローサイトメーターで濃縮した後にSingle cell analysis により発現プロファイルを作成し、すでに先行研究で報告されているデータベースを基に発現細胞種を網羅的に取得する。同定できた細胞種の特異抗体を用いてタンパク発現レベルでの確認を行う。さらにWT, KOマウス各々において高眼圧負荷モデルを作成し高解像度顕微鏡や広域電子顕微鏡によるシナプス形態変化、網膜電図や二光子顕微鏡による機能変化の比較解析を行う。これによりIPLにおけるシナプス異常とリモデリングを検出する。
|
| 研究実績の概要 |
マウス網膜においてシグナル伝達に重要な役割を果たしていることがわかった接着分子Nectin-like1にCreERTをCrisper-Cas9法にてノックインしたマウスの作成に成功した。このマウスとBrainbowマウスと掛け合わせ、タモキシフェン投与を行うことでNectin-like1細胞の可視化を試みた。繁殖には成功したが、発現効率が悪く死亡例も多くみられた。そのため現在タモキシフェン投与時期および投与量の検討段階であり、成功には至っていない。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
Nectin-like1にCreERTをCrisper-Cas9法にてノックインしたマウスの繁殖がスムーズに行うことができず、時間を要しているため。
|
| 今後の研究の推進方策 |
Nectin-like1 Cre-ERTマウスの繁殖に重きをおく。さらにBrainbowマウスと掛け合わせたマウスにおけるタモキシフェン投与量及び時期を検討しNectin-like1マウス発現細胞の同定を行う。現在作成中の論文の投稿を行う。
|
