| 研究課題/領域番号 |
20K18726
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分57060:外科系歯学関連
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
櫻井 繁 広島大学, 医系科学研究科(歯), 専門研究員 (70781681)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2020年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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| キーワード | integrin / RAC1 / インテグリン / FAK / 免疫組織学的検索 / 口腔扁平上皮癌 / 浸潤転移 / 核酸医薬 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
インテグリンβ8に対する数種類のsiRNAを設計・作成し，口腔扁平上皮癌細胞に導入し，β8の遺伝子及び蛋白発現の変化を検討し，より強くβ8発現を抑制するsiRNAを選択する．選択したsiRNAを扁平上皮癌細胞に導入し，扁平上皮癌細胞の増殖能と浸潤能の変化を検索する．さらに，扁平上皮癌細胞をヌードマウスに移植し形成された腫瘍組織内に，カチオン性リポソームあるいはアテロコラーゲンを担体としてsiRNAを直接導入し，より効果的にin vivoでのβ8発現を抑制するデリバリー担体を解析する．さらに，β8に対するsiRNAが，in vivoでの腫瘍の増殖，浸潤や転移に与える作用について検索する．
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| 研究実績の概要 |
旧基準のままであったTNM分類を新基準で改めて分類しなおした。
口腔扁平上皮癌(SCC)細胞の挙動をI型コラーゲンゲルを用いた3次元培養で調べたところ、インテグリンαvβ8発現レベルの高いSCC細胞は、タイプI型コラーゲン上での遊走能が高く、I型コラーゲンゲルへの浸潤が亢進していた。また、インテグリンαvβ8発現レベルの高いSCC細胞では,Ras関連C3ボツリヌス毒素基質1(RAC1)の活性化が誘導された。RAC1阻害剤を投与すると、I型コラーゲンによるSCC細胞の運動性が低下した。インテグリンαvβ8とI型コラーゲンとの相互作用は、RAC1の活性化を介して細胞の運動性と浸潤を促進する。したがって、インテグリンαvβ8とRAC1は、口腔SCC患者の転移と浸潤を抑制する新たな標的である可能性があると考えた。
口腔SCC細胞株、Ca9-22、KO、SCCKN、ZAをRAC1阻害剤下で培養し、阻害下での口腔SCC細胞の動きを調べた。ウェスタンブロッティングの結果、Ca9-22およびKO細胞はインテグリンαvおよびβ8タンパク質を高発現していた。Ca9-22およびKO細胞と比較して、SCCKNおよびZA細胞はインテグリンαvとβ8タンパク質を低レベルで発現した。インテグリンαvβ8の発現レベルが高いCa9-22細胞とKO細胞は、タンパク質上で遊走能の亢進を示した。また、RAC1の活性化が認められた。
上記研究結果をまとめ、論文投稿した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
コロナ禍、異動で研究時間の確保が困難であった
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| 今後の研究の推進方策 |
インテグリンβ8に対するsiRNAの腫瘍内直接投与による遺伝子発現抑制効率と腫瘍増殖抑制効果の検討を行っていく
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