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真菌のクオラムセンシング分子によるECC発症メカニズムの解明

研究課題

研究課題/領域番号 20K18837
研究種目

若手研究

配分区分基金
審査区分 小区分57080:社会系歯学関連
研究機関鶴見大学

研究代表者

宮之原 真由  鶴見大学, 歯学部, 学部助手 (70460186)

研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2025-03-31
研究課題ステータス 交付 (2023年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2022年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2021年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2020年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
キーワードクオラムセンシング分子 / Farnesol / Candida albicans / リアルタイム細胞ア ナライザー / Streptococcus mutans / リアルタイム細胞アナライザー / Early Childhood Caries / 乳幼児齲蝕 / バイオフィルム
研究開始時の研究の概要

「Early Childhood CariesとCandida albicans口腔感染との関連」が従来のStreptococcus mutansを中心とする齲蝕病因論の中で、真菌であるC. albicansは齲蝕発症に関する因子を持たないため齲蝕誘発メカニズムを説明することは、現在までの知見では不可能である。そこで、C. albicansのクオラムセンシング分子(Farnesol)が、S. mutansの齲蝕病原性に直接関与する「ショ糖依存性バイオフィルム形成能」を促進するかどうかを評価する。

研究実績の概要

システマティックレビューによる「Early Childhood CariesとCandida albicans口腔感染との関連」が複数の研究グループから報告された。しかし、従来のStreptococcus mutansを中心とする齲蝕病因論の中で、真菌であるC. albicansは齲蝕発症に関する因子を持たないため齲蝕誘発メカニズムを説明することは、現在までの知見では不可能である。そこで、「C. albicansの細胞外分泌情報伝達物質が、間接的にS. mutansの齲蝕病原性を亢進させる」という仮説を立てた。C. albicans特異的情報伝達物質としてC. albicansのクオラムセンシング分子(Farnesol)に焦点を当て、S. mutansの齲蝕病原性に直接関与する「ショ糖依存性バイオフィルム形成能」への影響を評価する。研究の目的は「S. mutansの齲蝕病原性を亢進させるC. albicansのクオラムセンシング分子の解明」である。本研究の具体的なS. mutansの齲蝕病原性とは、ショ糖依存性菌体外不溶性グルカンの産生であり、C. albicansのクオラムセンシング分子とはFarnesolを指す。研究の成果は、疫学研究で得られた「EarlyChildhood CariesとCandida albicans口腔感染との関連」に生物学的妥当性を与える。
2023年度は、Candida albicans(標準株、臨床株)に様々な濃度のクオラムセンシング分子(Farnesol)を用いて、リアルタイム細胞アナライザーにて、C. albicans S. mutansのショ糖依存性不溶性グルカン産生促進効果を増殖曲線から明らかにし、Farnesolの濃度別にショ糖依存性不溶性グルカン産生量、産生時間を調べた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

コロナ禍の余波により、今まで使用していた海外からの試薬の入荷のめどが立たず、新たに試薬を選出し、2023年度は本研究をほぼ最初からやり直した。
新たな培養条件を確立し、最初から実験を再度行い、リアルタイム細胞アナライザーにて、Candida albicans、Streptococcus mutansにおけるクオラムセンシング分子(Farnesol)を用いてショ糖依存性不溶性グルカン産生促進効果を調べていたために遅れを生じている。

今後の研究の推進方策

2023年度はC. albicans特異的クオラムセンシング分子であるFarnesol、および分泌Farnesolを含むC. albicansの培養上清による、S. mutansのショ糖依存性不
溶性グルカン産生促進効果を明らかにし、リアルタイム細胞アナライザー用いて、C. albicansの培養上清を獲得した。非水溶性グルカン産生酵素コード遺伝子
(gtfB、gtfC)発現評価を行い、2024年度は研究成果をまとめて論文とし、国際誌へ投稿準備を進めている。そのための追加実験を行う予定である。

報告書

(4件)
  • 2023 実施状況報告書
  • 2022 実施状況報告書
  • 2021 実施状況報告書
  • 2020 実施状況報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて 2024 2022 2021

すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (1件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Rapid multiplex real-time PCR assay using a portable device for the detection of oral pathogens2024

    • 著者名/発表者名
      Wint Wit Yee、Miyanohara Mayu、Yamada Hidenori、Nakatsuka Takako、Okamoto Masaaki、Ryo Koufuchi、Tanaka Tomoko、Hanada Nobuhiro、Murata Takatoshi
    • 雑誌名

      Diagnostic Microbiology and Infectious Disease

      巻: 109 号: 1 ページ: 116214-116214

    • DOI

      10.1016/j.diagmicrobio.2024.116214

    • 関連する報告書
      2023 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Inhibitory effect of black cumin (Nigella sativa) seed essential oil on Fusobacterium nucleatum L-methionine-γ-lyase (L-methioninase) activity2021

    • 著者名/発表者名
      Ishikawa Masao、Murata Takatoshi、Okamoto Masaaki、Miyanohara Mayu、Yamashita Mamiko、Hanada Nobuhiro、Senpuku Hidenobu、Shibuya Koji
    • 雑誌名

      FEMS Microbiology Letters

      巻: 368 号: 7 ページ: 1-5

    • DOI

      10.1093/femsle/fnab041

    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] 舌清掃およびTHP 3DS pasteⅡを併用したカンジダの除菌効果2022

    • 著者名/発表者名
      宮之原真由、村田貴俊、山田秀則、中塚貴子、影島宏紀、花田信弘
    • 学会等名
      第70回日本口腔衛生学会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [図書] [臨床編] 3DSセラピーができる本2021

    • 著者名/発表者名
      花田信弘、宮之原真由、武内博明、浦口昌秀、高橋史典、平識善大、河内亮、椎木健次、西平守昭、三浦正洋、田所久永、長井哲弥、藤井佳人、波多江正樹、仲若三男、長谷川了
    • 総ページ数
      144
    • 出版者
      第一歯科出版
    • ISBN
      9784924858770
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書

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公開日: 2020-04-28   更新日: 2024-12-25  

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