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エビ類の株化細胞樹立に挑戦する

研究課題

研究課題/領域番号 20K20299
補助金の研究課題番号 17H06249 (2017-2019)
研究種目

挑戦的研究(開拓)

配分区分基金 (2020)
補助金 (2017-2019)
研究分野 森林圏科学、水圏応用科学およびその関連分野
研究機関宮崎大学

研究代表者

酒井 正博  宮崎大学, 農学部, 教授 (20178536)

研究分担者 引間 順一  宮崎大学, 農学部, 教授 (70708130)
稲田 真理  国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産技術研究所(南勢), 研究員 (50723558)
研究期間 (年度) 2017-06-30 – 2022-03-31
研究課題ステータス 完了 (2021年度)
配分額 *注記
25,870千円 (直接経費: 19,900千円、間接経費: 5,970千円)
2021年度: 2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
2020年度: 3,510千円 (直接経費: 2,700千円、間接経費: 810千円)
2019年度: 2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
2018年度: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2017年度: 12,480千円 (直接経費: 9,600千円、間接経費: 2,880千円)
キーワードエビ類 / 細胞培養 / 細胞増殖因子 / ウイルス疾病 / トランスクリプトーム解析 / リンパ様器官 / クルマエビ / 培養細胞株
研究開始時の研究の概要

細胞の機能解析やウイルスの研究を行うにあたり株化細胞の存在は必須である。1980 年代中頃からエビ類においても長期培養可能な細胞株の樹立が試みられてきたが、未だ実現していない。本研究は、これまで試みが行われなかったエビ類の細胞の長期培養に最適なサプリメントの作製から、ヒトの株化細胞(ES 細胞やiPS 細胞)作製過程で使用されている最新技術(フィーダー細胞や遺伝子導入)を取り入れてクルマエビの細胞を株化させるまでを体系立てて行い、長期間培養可能または無限増殖能を持つエビ類の株化細胞を樹立する。

研究成果の概要

本研究では、クルマエビのリンパ様器官由来の株化細胞樹立を目的として、初代培養において生細胞と死細胞の割合が大きく変化する培養開始3から6日目の細胞に着目し、これらのタイミングに何か特別な遺伝子の発現パターンの変化があると考えた。そこで、これらの細胞についてRNA-Seq解析を実施したところ、リンパ様器官組織細胞の培養4日目にVEGFシグナル経路やリボソーム関連タンパク質遺伝子群の発現が顕著に減少していたことから、これらの遺伝子群が細胞の増殖や分裂に関与していると推察した。将来、これらをサプリメントとして細胞培養系に添加することで長期培養を可能にする手がかりとする。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究課題では、細胞の機能解析やウイルス研究を行うにあたり株化細胞は必須なツールであるエビ類の長期培養可能な細胞株の樹立が試みた。また、クルマエビ細胞の長期培養に最適なサプリメント分子の特定ができたことは、長期間培養可能なクルマエビ株化細胞を樹立するために今後大いに役立つと考えられる。

報告書

(6件)
  • 2021 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2020 実施状況報告書
  • 2019 実績報告書
  • 2018 実績報告書
  • 2017 実績報告書
  • 研究成果

    (28件)

すべて 2021 2020 2019 2018 2017

すべて 雑誌論文 (15件) (うち国際共著 6件、 査読あり 13件、 オープンアクセス 7件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (12件) (うち国際学会 2件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Interleukin-22 Deficiency Contributes to Dextran Sulfate Sodium-Induced Inflammation in Japanese Medaka, Oryzias latipes2021

    • 著者名/発表者名
      Takahashi Yoshie、Okamura Yo、Harada Nanaki、Watanabe Mika、Miyanishi Hiroshi、Kono Tomoya、Sakai Masahiro、Hikima Jun-ichi
    • 雑誌名

      Frontiers in Immunology

      巻: 12 ページ: 688036-688036

    • DOI

      10.3389/fimmu.2021.688036

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Comparative Analysis of Plasmid DNAs from Two Strains of <i>Photobacterium damselae</i> subsp. <i>piscicida</i> Isolated from Japan and the United States2020

    • 著者名/発表者名
      Tsuchiya Akito、Nishihara Aki、Saeki Ayumi、Teru Yuki、Aoki Takashi、Kono Tomoya、Sakai Masahiro、Hikima Jun-ichi
    • 雑誌名

      魚病研究

      巻: 55 号: 1 ページ: 18-21

    • DOI

      10.3147/jsfp.55.18

    • NAID

      130007827169

    • ISSN
      0388-788X, 1881-7335
    • 年月日
      2020-03-15
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Fish cytokines: current research and applications2020

    • 著者名/発表者名
      Sakai Masahiro、Hikima Jun-ichi、Kono Tomoya
    • 雑誌名

      Fisheries Science

      巻: 87 号: 1 ページ: 1-9

    • DOI

      10.1007/s12562-020-01476-4

    • NAID

      40022461712

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Cytosolic Sensors for Pathogenic Viral and Bacterial Nucleic Acids in Fish2020

    • 著者名/発表者名
      Mojzesz Miriam、Rakus Krzysztof、Chadzinska Magdalena、Nakagami Kentaro、Biswas Gouranga、Sakai Masahiro、Hikima Jun-ichi
    • 雑誌名

      International Journal of Molecular Sciences

      巻: 21 号: 19 ページ: 7289-7289

    • DOI

      10.3390/ijms21197289

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Interleukin-17A/F1 from Japanese pufferfish (Takifugu rubripes) stimulates the immune response in head kidney and intestinal cells2020

    • 著者名/発表者名
      Takahashi Yoshie、Okamura Yo、Morimoto Natsuki、Mihara Koshin、Maekawa Shun、Wang Han-Ching、Aoki Takashi、Kono Tomoya、Sakai Masahiro、Hikima Jun-ichi
    • 雑誌名

      Fish & Shellfish Immunology

      巻: 103 ページ: 143-149

    • DOI

      10.1016/j.fsi.2020.05.016

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Interleukin-17A/F1 Deficiency Reduces Antimicrobial Gene Expression and Contributes to Microbiome Alterations in Intestines of Japanese medaka (Oryzias latipes)2020

    • 著者名/発表者名
      Okamura Yo、Morimoto Natsuki、Ikeda Daisuke、Mizusawa Nanami、Watabe Shugo、Miyanishi Hiroshi、Saeki Yuichi、Takeyama Haruko、Aoki Takashi、Kinoshita Masato、Kono Tomoya、Sakai Masahiro、Hikima Jun-ichi
    • 雑誌名

      Frontiers in Immunology

      巻: 11 ページ: 425-425

    • DOI

      10.3389/fimmu.2020.00425

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Molecular characterization and expression of two interleukin-17 receptor A genes on different chromosomes in Japanese medaka, Oryzias latipes2020

    • 著者名/発表者名
      Okamura Yo、Morimoto Natsuki、Sawada Shuzo、Kono Tomoya、Hikima Jun-ichi、Sakai Masahiro
    • 雑誌名

      Comparative Biochemistry and Physiology Part B: Biochemistry and Molecular Biology

      巻: 240 ページ: 110386-110386

    • DOI

      10.1016/j.cbpb.2019.110386

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Molecular characterization and expression of the teleost cytosolic DNA sensor genes cGAS, LSm14A, DHX9, and DHX36 in Japanese medaka, Oryzias latipes2019

    • 著者名/発表者名
      Murakami Shiori、Morimoto Natsuki、Kono Tomoya、Sakai Masahiro、Hikima Jun-ichi
    • 雑誌名

      Developmental & Comparative Immunology

      巻: 99 ページ: 103402-103402

    • DOI

      10.1016/j.dci.2019.103402

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Nonconservation of TLR5 activation site in Edwardsiella tarda flagellin decreases expression of interleukin-1β and NF-κB genes in Japanese flounder, Paralichthys olivaceus2019

    • 著者名/発表者名
      Morimoto Natsuki、Kondo Masakazu、Kono Tomoya、Sakai Masahiro、Hikima Jun-ichi
    • 雑誌名

      Fish & Shellfish Immunology

      巻: 87 ページ: 765-771

    • DOI

      10.1016/j.fsi.2019.02.024

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Circadian oscilattion of TNF-alpha gene expression regulated by clock gene, BMAL1 and CLOCK1 in the Japanese medaka (Oryzias latipes)2019

    • 著者名/発表者名
      Teika Onoue, Goshi Nishi, Jun-ichi Hikima, Masahiro Sakai and Tomoya Kono
    • 雑誌名

      International Immunopharmacology

      巻: 70 ページ: 362-371

    • DOI

      10.1016/j.intimp.2019.02.004

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] 2018年版よくわかる!魚病対策と水産用医薬品2018

    • 著者名/発表者名
      佐藤 純、米加田 徹、稲田真理
    • 雑誌名

      月刊養殖ビジネス

      巻: 臨時増刊号 ページ: 68-72

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [雑誌論文] Molecular Characterization and Expression Analysis of Tumor Necrosis Factor Alpha-induced Protein 3 (TNFAIP3/A20) Gene from Japanese Pufferfish <i>Takifugu rubripes</i>2017

    • 著者名/発表者名
      Hikima J, Morita M, Kinoshita S, Basu M, Biswas G, Kono T, Sakai M
    • 雑誌名

      魚病研究

      巻: 52 号: 1 ページ: 15-22

    • DOI

      10.3147/jsfp.52.15

    • NAID

      130005548817

    • ISSN
      0388-788X, 1881-7335
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] SPFクルマエビの種苗作製法マニュアル.養殖技術講座ークルマエビ種苗2017

    • 著者名/発表者名
      浜野かおる,佐藤 純,奥村卓二,岡村 洋,引間順一
    • 雑誌名

      月刊養殖ビジネス

      巻: 54 ページ: 50-54

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [雑誌論文] Whole Genome Sequence of Photobacterium damselae subsp. piscicida strain 91-197 isolated from hybrid striped bass (Morone sp.) in the USA2017

    • 著者名/発表者名
      Teru Y, Hikima J, Kono T, Sakai M, Takano T, Hawke JP, Takeyama H, Aoki T
    • 雑誌名

      Genome Announcements

      巻: 5 号: 29

    • DOI

      10.1128/genomea.00600-17

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] クルマエビのホワイトスポット病2017

    • 著者名/発表者名
      Inada, M., Mekata, T., Itami, T.
    • 雑誌名

      魚病研究

      巻: 52 号: 3 ページ: 115-120

    • DOI

      10.3147/jsfp.52.115

    • NAID

      130006179597

    • ISSN
      0388-788X, 1881-7335
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 炎症を誘導したIL-22遺伝子KOメダカの腸管における機能的変化2021

    • 著者名/発表者名
      高橋良枝、岡村 洋、原田七輝、渡邉美香、宮西 弘、河野智哉、酒井正博、引間順一
    • 学会等名
      令和3年度日本水産学会秋季大会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] クルマエビのリンパ様器官由来細胞を用いた培養細胞株樹立のための基礎的研究2019

    • 著者名/発表者名
      土谷晃史、岡村 洋、高橋良枝、河野智哉、引間順一、酒井正博
    • 学会等名
      令和元年日本水産学会秋季大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] クルマエビ細胞周期チェックポイント関連遺伝子群の過酸化水素曝露時の発現動態2018

    • 著者名/発表者名
      土谷晃史、岡村 洋、高橋良枝、伊丹利明、引間順一、酒井正博
    • 学会等名
      平成30年度マリンバイオテクノロジー学会宮崎大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] クルマエビ(Marsupenaeus japonicus)のHIF経路関連遺伝子群の同定および低酸素暴露による同経路活性化機構の解明2018

    • 著者名/発表者名
      岡村 洋、米加田徹、Narantsog Choijookhuu、菱川善隆、引間順一、酒井正博、伊丹利明
    • 学会等名
      平成30年度マリンバイオテクノロジー学会宮崎大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] Analysis of immune-related genes expression response to Vibrio harveyi infection in Orange-spotted grouper (Epinephelus coioides).2018

    • 著者名/発表者名
      Shun Maekawa, Omkar Byadgia, Byadgia Chen, Pei-Chyi Wang, Takashi Aoki, Haruko Takeyama, Jun-ichi Hikima, Masahiro Sakai, Shih-Chu Chen
    • 学会等名
      8th International Symposium of Aquatic Animal Health
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Photobacterium damselae subsp. piscicidaギリシャ分離株ゲノムの特徴および比較ゲノム解析2018

    • 著者名/発表者名
      引間順一、輝 祐希、河野智哉、酒井正博、高野倫一、Una McCarthy、竹山春子、青木 宙
    • 学会等名
      平成30年度日本魚病学会春季大会(東京海洋大学、品川、東京)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Photobacterium damselae subsp. piscicida 日本分離株および米国分離株のゲノム比較解析2017

    • 著者名/発表者名
      輝 祐希、引間順一、河野智哉、酒井正博、高野倫一、John P. Hawke、竹山春子、青木 宙
    • 学会等名
      平成29年度日本魚病学会秋季大会(ホテルメリージュ宮崎、宮崎)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] タイ国におけるティラピア腸内細菌叢のメタゲノム解析2017

    • 著者名/発表者名
      青木 宙、渡邉 麗、竹山春子、須田 亙、服部正平、引間順一、酒井正博、Sasimanas Unajak、Mavichak Rapeepat
    • 学会等名
      第19回マリンバイオテクノロジー学会大会(東北大学、宮城・仙台)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Whole genome sequences of Photobacterium damselae subsp. piscicida isolated in Japan and the USA2017

    • 著者名/発表者名
      Yuki Teru, Tomoya Kono, Masahiro Sakai, Tomokazu Takano, John P. Hawke, Yutaka Fukuda, Haruko Takeyama, Takashi Aoki, Jun-ichi Hikima
    • 学会等名
      The JSFS 85th Anniversary-Commemorative International Symposium (Tokyo University of Marine Science and Technology, Shinagawa, Tokyo)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] アワビ筋萎縮症の病原体の推定2017

    • 著者名/発表者名
      松山知正・高野倫一・西木一生・藤原篤志・桐生郁也・稲田真理・坂井貴光・寺島祥子・. 安池元重・中村洋路・磯和 潔・. 砂子剛・川上秀昌・栗田 潤
    • 学会等名
      平成29年度日本魚病学会秋季大会(ホテルメリージュ宮崎、宮崎)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] A Spirochete AS PUTATIVE PATHOGEN OF AKOYA OYSTER DISEASE2017

    • 著者名/発表者名
      Tomomasa Matsuyama, Tomokazu Takano, Mari Inada, Chihaya Nakayasu, Motoshige Yasuike, Atushi Fujiwara, Yoji Nakamura, Sachiko Terashima, Takamitsu Sakai, Tetsuji Masaoka
    • 学会等名
      10th Symposium on Diseases in Asian Aquaculture (DAA10), Bali, Indonesia
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] クルマエビにおけるキサンチンデヒドロゲナーゼとアルデヒドオキシターゼ遺伝子の同定及び微生物感染時における遺伝子の発現動態2017

    • 著者名/発表者名
      岡村 洋、稲田真理、伊丹利明
    • 学会等名
      平成29年度日本魚病学会秋季大会(ホテルメリージュ宮崎、宮崎)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [図書] Immune system in teleosts. Edwin L. Cooper (Ed.) Advances in Comparative Immunology2018

    • 著者名/発表者名
      Teruyuki Nakanishi, Jun-ichi Hikima, Takashi Yada
    • 総ページ数
      1107
    • 出版者
      Springer International Publishing
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書

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公開日: 2017-07-21   更新日: 2024-03-26  

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