新規な濾胞樹状細胞株を用いる抗体の親和性成熟機構の解明とその応用

• 研究課題/領域番号: 21360405
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 大森 齊 岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 教授 (70116440)
• 連携研究者: 曲 正樹 岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 助教
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 17,420千円 (直接経費: 13,400千円、間接経費: 4,020千円); 2011年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2010年度: 5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円); 2009年度: 7,020千円 (直接経費: 5,400千円、間接経費: 1,620千円)
• キーワード: モノクローナル抗体 / リンパ球 / 突然変異 / アポトーシス / 生体防御 / 胚中心 / 抗体医薬 / 濾胞樹状細胞 / 抗体 / 体細胞高頻度突然変異 / 親和性成熟 / IL-21 / AID / B細胞株

研究概要

新規に樹立したマウスの濾胞樹状細胞の細胞株FL-Yを用いて、抗体の親和性成熟過程を胚中心におけるB細胞の選択機構に焦点を当てて解析した。FL-Y細胞は、ヘルパーT細胞由来のサイトカインIL-21存在下で、B細胞死を誘導した。この細胞死には、FL-Yの産生するPGE2が関与することを明らかにした。IL-21とPGE2によるB細胞死は胚中心におけるB細胞の新規な負の選択機構を示唆するものである。

研究成果

• [雑誌論文] Activa-tion-induced cytidine deaminase(AID)-dependent somatic hypermutation requires a splice isoform of the serine/arginine-rich(SR) protein SRSF1 (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanehiro, Y., Ohmori, H. Kanayama, N., et al.(10名中9番目)
  • 雑誌名: Proceeding of the National Academy of Sciences, USA. 巻: 109 ページ: 1216-1271
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation-induced cytidine deaminase (AID)-dependent somatic hypermutation requires a splice isoform of the serine/arginine-rich (SR) protein SRSF1 (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanehiro, Y., Ohmori, H.Kanayama, N., at al
  • 雑誌名: Proceeding of the National Academy of Sciences, USA 巻: 109 号: 4 ページ: 1216-1271
  • DOI: 10.1073/pnas.1120368109
  • 査読あり
• [雑誌論文] IL-21-dependent B cell death driven by prostaglandin E2, a product secreted from follicular dendritic cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Magari, M. Ohmori, H., et al.(7名中7番目)
  • 雑誌名: Journal of Immunology 巻: 187 ページ: 4210-4218
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of mesen-chyme-specific gene signatures by follicular dendritic cells : insights from the meta-analysis of microarray data frommultiple mouse cell popu-lations (2011)
  • 著者名/発表者名: Mabbott, N., Ohmori, H., et al.(8名中6番目)
  • 雑誌名: Immunology 巻: 133 ページ: 482-498
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of mesenchyme-specific gene signatures by follicular dendritic cells : insights from the meta-analysis of microarray data from multiple mouse cell populations (2011)
  • 著者名/発表者名: Mabbott, N., Ohmori, H., et al
  • 雑誌名: Immunology 巻: 133 号: 4 ページ: 482-498
  • DOI: 10.1111/j.1365-2567.2011.03461.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] IL-21-dependent B cell death driven by prostaglandin E2, a product secre ted from follicular dendritic cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Magari, M.Ohmori, H., et al
  • 雑誌名: Journal of Immunology 巻: 187 号: 8 ページ: 4210-4218
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1100934
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhance-ment of hypermutation frequency in the chicken B cell line DT40 for Efficient diversification of antibody repertoire. (2010)
  • 著者名/発表者名: Magari, M., Kanehiro, Y., Ohmori, H., et al.(6名中6番目)
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 巻: 396 ページ: 353-358
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient affinity maturation of antibodies in an engineered chicken B cell line DT40-SW by increasing point mutation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kajita, M., Kanayama, N. Ohmori, H., et al.(7名中7番目)
  • 雑誌名: J. Biosci. Bioeng. 巻: 351 ページ: 351-358
  • NAID: 110007730029
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhancement of hypermutation frequency in the chicken B cell line DT40 for efficient diversification of antibody repertoire. (2010)
  • 著者名/発表者名: Magari, M., Kanehiro, Y., Todo, K., Ikeda, M., Kanayama, N., Ohmori, H.
  • 雑誌名: Biochem.Biphys.Res.Commmun. 巻: 396 ページ: 353-358
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient affinity maturation of antibodies in an engineered chicken B cell line DT40-SW by increasing point mutation (2010)
  • 著者名/発表者名: Kajita, M., Okazawa, T., Ikeda, M., Todo, K., Magari, M., Kanayama, N., Ohmori, H.
  • 雑誌名: J.Biosci.Bioeng. 巻: 351 ページ: 351-358
  • NAID: 110007730029
  • 査読あり
• [雑誌論文] Conditional transformation of immunoglobulin mutation pattern from gene conversion to point mutation by controlling XRCC3 expression in the DT40 B cell line. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kajita, M., Hagari, M., Todo, K., Kanayama, N., Ohmori, H.
  • 雑誌名: Journal of Bioscience and Bioengoneering 109 ページ: 407-410
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhancement of antibody production from a chicken B cell line DT40 by reducing Pax5 expression. (2009)
  • 著者名/発表者名: Magari, M., Aya, T., Ikeda, M., Todo, K.Kanayam, N., Ohmori, H.
  • 雑誌名: Journal of Bioscience and Bieengineering 107 ページ: 206-209
  • NAID: 110007110260
  • 査読あり
• [学会発表] DT40を用いるin vitro抗体作製・改良システムの開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹, 他2名
  • 学会等名: 日本分子生物学会大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] DT40を用いるin vitro抗体作製・改良システムの開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹、曲正樹、大森齊
  • 学会等名: 日本分子生物学会大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)(招待講演)
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] IL-34依存性の新規な単球系細胞の機能解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松井一恵, 他5名
  • 学会等名: 日本免疫学会総会
  • 発表場所: 幕張メッセ(千葉)
  • 年月日: 2011-11-28
• [学会発表] IL-34依存性の新規単球系細胞の機構解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松井一恵、大森齊, 他5名
  • 学会等名: 日本免疫学会大会
  • 発表場所: 幕張メッセ(千葉県)
  • 年月日: 2011-11-28
• [学会発表] 変異導入能力を有する培養B細胞株を用いたin vitro抗体作製システムの高機能化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹, 他5名
  • 学会等名: 日本分子生物学会、日本生化学会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] 変異導入能力を有する培養B細胞株を用いたin vitro抗体作製システムの高機能化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹、曲正樹、梶田真道、金広優一、藤堂景史、大森齊
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会、第81回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] 変異能力を有するニワトリB細胞株を用いた抗体の親和性成熟 : DT40-SWを用いたマウスモノクローナル抗体の改変 (2009)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹、小島聡史、藤井忍、北村幸一、井上和恵、岡山展久、松田修一、藤堂景史、曲正樹、大森齊
  • 学会等名: 日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] 変異能力を有するニワトリB細胞株を用いた抗体の親和性成熟 : 外来の抗体可変部遺伝子のDT40-SWにおける発現・改良系の構築 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小島聡史、藤井忍、北村幸一、井上和恵、岡山展久、松田修一、藤堂景史、曲正樹、金山直樹、大森齊
  • 学会等名: 日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] FDCとIL-21の関与する胚中心B細胞の新規な負の選択機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 藤井康正, 他4名
  • 学会等名: 日本免疫学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪)
  • 年月日: 2009-12-03
• [学会発表] FDCとIL-21の関与する胚中心B細胞の新規な負の選択機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 藤井康正、西川裕美子、西尾裕美、金山直樹、大森齊
  • 学会等名: 日本免疫学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
  • 年月日: 2009-12-03
• [学会発表] DT40-SWを用いるin vitro抗体作製システムの高機能化 : 変異様式の転換による高性能抗体作製 (2009)
  • 著者名/発表者名: 梶田真道、曲正樹、藤堂景史、金山直樹、大森齊
  • 学会等名: 日本生物工学会大会
  • 発表場所: 名古屋大学(愛知県)
  • 年月日: 2009-09-24
• [学会発表] DT40-SWを用いるin vitro抗体作製システムの高機能化 : 遺伝子変換と点突然変異の転換システムの構築 (2009)
  • 著者名/発表者名: 曲正樹、梶田真道、金山直樹、大森齊
  • 学会等名: 日本生物工学会大会
  • 発表場所: 名古屋大学(愛知県)
  • 年月日: 2009-09-24
• [学会発表] 抗体の親和性成熟機構の解析とそれに基づく効率的in vitro抗体作製システムの開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大森斉
  • 学会等名: 蛋白質と酵素の構造と機能に関する九州シンポジウム
  • 発表場所: 唐津シーサイドホテル(佐賀)
  • 年月日: 2009-09-11
• [学会発表] 抗体の親和性成熟機構の解析とそれに基づく効率的in vitro抗体作製システムの開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大森齊
  • 学会等名: 蛋白質と酵素の構造と機能に関する九州シンポジウム
  • 発表場所: 唐津シーサイドホテル(佐賀県)
  • 年月日: 2009-09-11
• [図書] 改訂細胞工学 (2010)
  • 著者名/発表者名: 永井和夫、大森斉、金山直樹、町田千代子
  • 総ページ数: 230
  • 出版者: 講談社
• [図書] 改訂 細胞工学 (2010)
  • 著者名/発表者名: 永井和男、大森齊、町田千代子、金山直樹
  • 総ページ数: 230
  • 出版者: 講談社サイエンティフィック
• [備考]
  • URL: http://www.eng.okayama-u.ac.jp/eng_biotech/html/
• [産業財産権] 細胞の遺伝子変異機能の制御による変異タンパク質の作製方法 (2011)
  • 発明者名: 金山直樹、大森斉
  • 権利者名: 岡山大学
  • 取得年月日: 2011-04-09
• [産業財産権] ヒト型抗体を産出するB細胞の作製方法 (2010)
  • 発明者名: 金山直樹、大森斉
  • 権利者名: 岡山大学
  • 出願年月日: 2010-11-18
• [産業財産権] ヒト型抗体を産出するB細胞の作製方法 (2010)
  • 発明者名: 金山直樹、大森齊
  • 権利者名: 岡山大学
  • 産業財産権番号: 2010-258404
  • 出願年月日: 2010-11-18
• [産業財産権] 細胞の遺伝子変異機能の制御による変異タンパク質の作製方法 (2010)
  • 発明者名: 大森齊、金山直樹
  • 権利者名: 岡山大学
  • 取得年月日: 2010-04-09