原始卵胞卵子の超低温保存と個体再生システムの開発

• 研究課題/領域番号: 21380175
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 独立行政法人農業生物資源研究所
• 研究代表者: 金子 浩之 独立行政法人農業生物資源研究所, 発生分化研究ユニット, 上級研究員 (60343993)
• 研究分担者: 菊地 和弘 独立行政法人・農業生物資源研究所, 動物科学研究領域・動物発生分化研究ユニット, 上級研究員 (20360456) ; 柏崎 直巳 麻布大学, 獣医学部, 教授 (90298232)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 19,240千円 (直接経費: 14,800千円、間接経費: 4,440千円); 2012年度: 3,120千円 (直接経費: 2,400千円、間接経費: 720千円); 2011年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2010年度: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2009年度: 5,850千円 (直接経費: 4,500千円、間接経費: 1,350千円)
• キーワード: 原始卵胞卵 / 体外培養系 / ガラス化冷却 / 超低温保存 / 応用動物 / 発生・分化 / 発生工学 / 異種間移植 / カルニチン / ブタ / 胚発生 / ガラス化 / 卵発生能 / 未成熟生殖細胞

研究概要

原始卵胞卵は個体を再生する重要な資源となり得るが、保存し胚・胎子にまで発生させることは困難である。本研究では、新生子期のブタ卵巣を用いて、異種間移植、体外培養および顕微操作を組み合わせることによって、原始卵胞卵からの胚発生率を格段に向上させることに成功した。さらに、超低温保存においては、原始卵胞卵が受精能を保持し得るガラス化冷却条件を明らかにした。これらの手法は、稀少動物等の原始卵胞卵から個体を再生する上で必須である。

研究成果

• [雑誌論文] Normal reproductive development of offspring derived by intracytoplasmic injection of porcine sperm grown in hoist mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Kaneko H, Kikuchi K, Nakai M, Tanihara F, Noguchi J, Noguchi M, Ito J, Kashiwazaki N
  • 雑誌名: Theriogenology 巻: 78 号: 4 ページ: 898-906
  • DOI: 10.1016/j.theriogenology.2012.04.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Normal reproductive development of offspring derived by intracytoplasmic injection of porcine sperm grown in host mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Kaneko H, Kikuchi K, et al
  • 雑誌名: Theriogenology 巻: (accepted)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Xenografting of gonadal tissues into mice as a possible method for conservation and utilization of porcine genetic resources (2011)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi K, Nakai M, Kashiwazaki N, Kaneko H
  • 雑誌名: Anim Sci J 巻: 82 号: 4 ページ: 495-503
  • DOI: 10.1111/j.1740-0929.2011.00919.x
  • NAID: 10030377418
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dang-Nguyen TQ, Maedomari N, Nguyen BX, Nagai T, Manabe N. Improvement of porcine oocytes with low developmental ability after fusion of cytoplasmic fragments prepared by serial centrifugation (2011)
  • 著者名/発表者名: Viet Linh N, Kikuchi K, Nakai M, Noguchi J, Kaneko H
  • 雑誌名: J Reprod Dev 巻: 57 ページ: 620-626
  • URL: https://www.jstage.jst.go.jp/article/jrd/57/5/57_11-053H/_article.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Factors affecting fertilization and embryonic development during intracytoplasmic sperm injection in pigs (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakai M, Kashiwazaki N, Ito J, Maedomari N, Ozawa M, Shino M, Noguchi J, Kanek H, Kikuchi K
  • 雑誌名: J Reprod Dev 巻: 57 ページ: 183-187
  • NAID: 10028275004
  • URL: https://www.jstage.jst.go.jp/article/jrd/57/2/57_10-200E/_article
  • 査読あり
• [雑誌論文] Noguchi J, Ito J, Kashiwazaki N, Kikuchi K. Production of viable piglets for the first time using sperm derived from ectopic testicular xenografts (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakai M, Kaneko H, Somfai T, Maedomari N, Ozawa M, Noguchi J, Ito J, Kashiwazaki N, Kikuchi K
  • 雑誌名: Reprod 巻: 139 号: 2 ページ: 331-335
  • DOI: 10.1530/rep-09-0509
  • 査読あり
• [雑誌論文] ヌードマウス体内におけるブタ原始卵胞の発育と卵の発生能 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金子浩之、中井美智子、菊地和弘
  • 雑誌名: J Reprod Enginer 巻: 13 ページ: 1-6
  • URL: http://sre.ac.affrc.go.jp/Contents/Vol_13/13_Kaneko.pdf
  • 査読あり
• [雑誌論文] 家畜の未成熟生殖細胞利用の現状と展望 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金子浩之
  • 雑誌名: 畜産技術 巻: 657 ページ: 15-17
  • NAID: 40016953569
  • URL: http://jlta.lin.gr.jp/publish/chikusan/chiku_back/h22.html#page_top
  • 査読あり
• [雑誌論文] ヌードマウス体内におけるブタ原始卵胞の発育と卵の発生能 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金子浩之、中井美智子、菊地和弘
  • 雑誌名: Journal of Reproduction Engineering 巻: 13 ページ: 1-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of viable piglets for the first time using sperm derived from Ectopic testicular xenografts (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakai M, Kaneko H, Kashiwazaki N, Kikuchi K, et al.
  • 雑誌名: Reproduction 139 ページ: 331-335
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peripheral concentrations of inhibin A, ovarian steroids, and gonadotropins associated with follicular development throughout the estrous cycle of the sow (2010)
  • 著者名/発表者名: Noguchi M, Kaneko H, et al.
  • 雑誌名: Reproduction 139 ページ: 153-161
  • 査読あり
• [雑誌論文] 家畜の未成熟生殖細胞の利用の現状と展望 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金子浩之
  • 雑誌名: 畜産技術 657 ページ: 15-17
• [雑誌論文] Generation of porcine diploid blastocysts after injection of spermatozoa grown in nude mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakai M, Kaneko H, Somfai T, Maedomari N, Ozawa M, Noguchi J, Kashiwazaki N, Kikuchi K
  • 雑誌名: Theriogenology 巻: 72 号: 1 ページ: 2-9
  • DOI: 10.1016/j.theriogenology.2008.10.020
  • 査読あり
• [雑誌論文] Xenografting of gonadal tissues into mice as a possible method for conservation and utilization of porcine genetic resources
  • 著者名/発表者名: Kikuchi K, Kaneko H, et al
  • 雑誌名: Animal Science Journal 巻: (印刷中)
  • NAID: 10030377418
  • 査読あり
• [学会発表] マウス体内におけるブタ卵胞の発育と卵の発生能 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金子浩之
  • 学会等名: 日本生殖工学会
  • 発表場所: 明治大学
• [学会発表] 異種移植によるブタ雄性生殖細胞の保存・利用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 菊地和弘、金子浩之、柏崎直巳他3名
  • 学会等名: 第41回精子研究会
  • 発表場所: 東京大学
• [学会発表] An approach for conservation of pig resources by xenografting of gonadal tissue to mice. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi K, Kaneko H, Nakai M, Noguchi J, Kashiwazaki N
  • 学会等名: The 4th Congress of Asian Pig Veterinary Society
  • 発表場所: エポカルつくば
• [学会発表] An approach for conservation of pig resources by xenografting of gonadal tissue to mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi K, Kaneko H, et al.
  • 学会等名: The 4^<th> Congress of Asian Pig Veterinary Society
  • 発表場所: エポカルつくば
• [学会発表] 異種移植によるブタ雄性生殖細胞の保存・利用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 菊地和弘, 金子浩之, ほか
  • 学会等名: 第41回精子研究会
  • 発表場所: 東京大学駒場キャンパス