活性化サブユニットp35コンディショナルKOを用いたCdk5の機能解析

• 研究課題/領域番号: 21500356
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経化学・神経薬理学
• 研究機関: 早稲田大学
• 研究代表者: 大島 登志男 早稲田大学, 理工学術院, 教授 (20311334)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2011年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2010年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2009年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: キナーゼ / リン酸化 / コンディショナルKO

研究概要

神経細胞特異的セリン・スレオニンキナーゼCyclin-dependent kinase 5(Cdk5)の機能を、活性化サブユニットp35のコンディショナルノックアウト(KO)マウスを作製し、空間学習課題や恐怖条件付け課題などの行動解析、電気生理学的解析、生化学的解析を行なう事で明らかにする事を本研究の目的とした。本研究ではp35遺伝子座に2つのloxPを挿入した(p35-flox)マウスを作成した。脳形成が終了してからp35遺伝子を破壊するために、タモキシフェン(TM)でCre活性を誘導できるCreERマウスと交配して、誘導型p35コンディショナルKOを作成した。2mg TMの経口投与3日間連続でp35の80%以上の量的低下が確認された。また、生後約3週の海馬CA1特異的にCreが発現するCaMKII-Creマウスとの交配で、CA1特異的p35コンディショナルKOを作成し、Cre発現後にp35タンパク質量が海馬で低下していることが確認できた。CA1特異的p35コンディショナルKOマウスにおいては、海馬CA1錐体神経細胞のスパイン数の減少が観察されている。これらのp35コンディショナルKOについて、現在行動解析を行なっている。

研究成果

• [雑誌論文] Phosphorylation of CRMP2 is involved in proper dendritic field organization (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamashita N, Ohshima T, Nakamura F, Kolattukudy P, Honnorat J, Mikoshiba K, Goshima Y
  • 雑誌名: J. Neurosci 巻: 32 ページ: 1360-1365
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylation of CRMP2 is involved in proper dendritic field organization (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamashita N, Ohshima T, Goshima Y., et al
  • 雑誌名: J.Neurosci. 巻: 32 ページ: 1360-1365
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hypomyelination Phenotype Caused by Impaired Differentiation of Oligodendrocytes in Emx1-cre Mediated Cdk5 Conditional Knockout Mice (2011)
  • 著者名/発表者名: He X, Takahashi S, Suzuki H, Hashikawa, T, Kulkarni AB, Mikoshiba K, Ohshima T
  • 雑誌名: Neurochem Res 巻: 36 ページ: 1293-1303
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hypomyelination phenotype caused by impaired differentiation of oligodendrocytes in Emxlcre mediated Cdk5 conditional knockout mice (2011)
  • 著者名/発表者名: He X, Takahashi S, Ohshima T., et al
  • 雑誌名: Neurochem Res 巻: 36 ページ: 1293-1303
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylation of AATYK1 by Cdk5 suppresses its tyrosine phosphorylation (2010)
  • 著者名/発表者名: Tsutsumi K, Takano T, Endo R, Fukuda M, Ohshima T, Tomomura M, Hisanaga S
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 5(4)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Conditional deletion of neuronal cyclin-dependent kinase 5 in developing forebrain results in microglial activation and neurodegeneration (2009)
  • 著者名/発表者名: Takahashi S, Ohshima T, Hirasawa M, Pareek TK, Bugge TH, Morozov A, Fujieda K, Brady RO, Kulkarni AB
  • 雑誌名: American J. Pathology 巻: 176 ページ: 320-329
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased proximal bifurcation of CA1 pyramidal apical dendrites in sema3A mutant mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakamura F, Ugajin K, Yamashita N, Okada T, Uchida Y, Taniguchi M, Ohshima T, Goshima Y
  • 雑誌名: J. Comp. Neurol 巻: 516 ページ: 360-375
  • 査読あり
• [雑誌論文] Commitment of 1-methyl-4-phenylpyrinidinium ion-induced neuronal cell death by proteasome-mediated degradation of p35 Cyclin-dependent kinase 5 activator (2009)
  • 著者名/発表者名: Endo R, Saito T, Asada A, Kawahara H, Ohshima T, Hisanaga S
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 284 ページ: 26029-39
  • 査読あり
• [学会発表] Collapsin response mediator proteins regulate bifurcation of apical dendrites in hippocampal CA1 pyramidal neurons during the brain development (2011)
  • 著者名/発表者名: Niisato E, Nagai, J, Yamashita N, Nakamura F, Goshima Y, and Ohshima T
  • 学会等名: 2011 SFN annual meeting
  • 発表場所: Washington DC, USA
  • 年月日: 2011-11-13
• [学会発表] Hypomyelination Phenotype Caused by Impaired Differentiation of Oligodendrocytes in Emx1-cre Mediated Cdk5 Conditional Knockout Mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: He X, et al.
  • 学会等名: BMB 2010
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2010-12-08
• [学会発表] Hypomyelination phenotype caused by impaired differentiation of oligodendrocytes in Emx1-cre mediated Cdk5 conditional knockout mice (2010)
  • 著者名/発表者名: He X, Takahashi S, Suzuki H, Hashikawa T, Kulkarni AB, Mikoshiba K, Ohshima T
  • 学会等名: BMB 2010
  • 発表場所: Kobe, Japan
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] Role of collapsin response mediator proteins for dendritic development in hippocampal CA1 pyramidal neurons (2010)
  • 著者名/発表者名: Niisato E, Yamashita N, Nakamura F, Goshima Y, Ohshima T
  • 学会等名: Neuro 2010
• [図書] 神経特異的キナーゼCdk5の神経発達と神経変性への関与. Brain Science Review 2010 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大島登志男
  • 出版者: クバプロ
• [備考] 研究室ホームページ
  • URL: http://www.ohshima.biomed.sci.waseda.ac.jp/