環境アンドロゲンバイオマーカー(スピギン)の合成における2種ARの役割解明

• 研究課題/領域番号: 21510069
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 放射線・化学物質影響科学
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 長江 真樹 長崎大学, 大学院・水産・環境科学総合研究科, 准教授 (00315227)
• 研究分担者: 征矢野 清 長崎大学, 環東シナ海海洋環境資源研究センター, 教授 (80260735) ; 東藤 孝 北海道大学, 大学院水産科学研究院, 准教授 (60303111)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2011年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2010年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2009年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: バイオマーカー / 環境ホルモン / イトヨ / 男性ホルモン / スピギン / バオマーカー

研究概要

成熟したイトヨ雄腎臓からARαおよびARβcDNAを単離した。これらcDNAを導入したレポータージーンアッセイ系により、何れのARも機能的であり、両者の転写活性化能には違いがないことも明らかにされた。次に種々の濃度の男性ホルモンを未成熟のイトヨ雌に曝露し、腎臓でのスピギンおよび両ARmRNAの発現変化をリアルタイム定量RT-PCR法およびin situ hybridization法によりそれぞれ明らかにした。スピギンmRNA濃度は、男性ホルモン濃度および曝露期間に依存した増加が認められた。一方、AR mRNA濃度は、何れのタイプにおいても、曝露により顕著な発現量の低下が認められた。このことから、ARは腎臓でのスピギン合成を仲介すると同時に、男性ホルモン受容に応じて自身の発現量を調節(ダウンレギュレート)することが示唆された。また、両ARのmRNA濃度は大きく異なっており、ARαmRNA発現量はβのそれに比べて少なくとも10倍高値を示した。このことから、腎臓でのスピギン合成には、主にARαが関与するものと示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Comparative responsiveness to natural and synthetic estrogens of fish species commonly used in the laboratory and field monitoring (2012)
  • 著者名/発表者名: Lange A., Katsu Y., Miyagawa S., Ogino Y., Urushitani H., Kobayashi T., Hirai T., Shears J. A., Nagae M., Yamamoto J., Ohnishi Y., Oka T., Tatarazako N., Ohta Y., Tyler C. R. and Iguchi T
  • 雑誌名: Aquatic Toxicology 巻: 109 ページ: 250-250
• [雑誌論文] Comparative responsiveness to natural and synthetic estrogens of fish species commonly used in the laboratory and field monitoring (2012)
  • 著者名/発表者名: Lange A, Katsu Y, Miyagawa S, Ogino Y, Urushitani H, Kobayashi T, Hirai T, Shears JA, Nagae M, Yamamoto J, Ohnishi Y, Oka T, Tatarazako N, Ohta Y, Tyler CR, Iguchi T
  • 雑誌名: Aquatic Toxicology 巻: 109 ページ: 250-258
  • DOI: 10.1016/j.aquatox.2011.09.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of ethynylestradiol on vitellogenin synthesis and sex differentiation in juvenile grey mullet(Mugil cephalus) persist after long-term exposure to a clean environment (2011)
  • 著者名/発表者名: Aoki J., Hatsuyama A., Hiramatsu N. and Soyano K
  • 雑誌名: Comparative Biochemistry and Physiology Part C 巻: 154(4) ページ: 346-352
• [雑誌論文] Effects of ethynylestradiol on vitellogenin synthesis and sex differentiation in juvenile grey mullet (Mugil cephalus) persist after long-term exposure to a clean environment (2011)
  • 著者名/発表者名: Aoki J., Hatsuyama A., Hiramatsu N., Soyano K.
  • 雑誌名: Comparative Biochemistry and Physiology Part C 巻: 154(4) 号: 4 ページ: 346-352
  • DOI: 10.1016/j.cbpc.2011.07.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] The effects of 17beta-estradiol on various reproductive parameters in the hermaphrodite fish Kryptolebias marmoratus (2010)
  • 著者名/発表者名: Park C. B., Aoki J., Lee J. S., Nagae M, Lee Y. D., Sakakura Y., Hagiwara A. and Soyano K
  • 雑誌名: Aquat. Toxicol 巻: 96(4) ページ: 273-279
• [雑誌論文] Survey of contamination of estrogenic chemicals in Japanese and Korean coastal waters using the wild grey mullet(Mugil cephalus) (2010)
  • 著者名/発表者名: Aoki J., Nagae M., Takao Y., Hara A., Lee Y. D., Yeo I. K., Lim B. S., Park C. B. and Soyano K
  • 雑誌名: Sci. Total Environ 巻: 408(3) ページ: 660-665
• [雑誌論文] Bisphenol A modulates expression of gonadotropin subunit genes in the hermaphroditic fish, Kryptolebias marmoratus (2010)
  • 著者名/発表者名: Rhee J. S., Kim R. O., Seo J. S., Kang H. S., Park C. B., Soyano K., Lee J., Lee Y. M. and Lee J. S
  • 雑誌名: Comparative Biochemistry and Physiology Part C 巻: 152(4) ページ: 456-466
• [雑誌論文] The effects of 17beta-estradiol on various reproductive parameters in the hermap hrodite fish Kryptolebias marmoratus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Park CB, Aoki J, Lee JS, Nagae M, Lee YD, Sakakura Y, Hagiwara A, Soyano K
  • 雑誌名: Aquat.Toxicol. 巻: 96(4) ページ: 273-279
  • 査読あり
• [雑誌論文] Survey of contamination of estrogenic chemicals in Japanese and Korean coastal waters using the wild grey mullet (Mugil cephalus). (2010)
  • 著者名/発表者名: Aoki J, Nagae M, Takao Y, Hara A, Lee YD, Yeo IK, Lim BS, Park CB, Soyano K
  • 雑誌名: Sci.Total Environ. 巻: 408(3) ページ: 660-665
  • 査読あり
• [雑誌論文] The effects of 17beta-estradiol on various reproductive parameters in the hermap hrodite fish Kryptolebias marmoratus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Park CB, Aoki J, Lee JS, Nagae M, Lee YD, Sakakura Y, Hagiwara A, Soyano K
  • 雑誌名: Aquat.Toxicol. 96(4) ページ: 273-279
  • 査読あり
• [雑誌論文] Survey of contamination of estrogenic chemicals in Japanese and Korean coastal waters using the wild grey mullet(Mugil cephalus). (2010)
  • 著者名/発表者名: Aoki J, Nagae M, Takao Y, Hara A, Lee YD, Yeo IN, Lim BS, Park CB, Soyano K
  • 雑誌名: Sci.Total Environ. 408(3) ページ: 660-665
  • 査読あり
• [雑誌論文] Choriogenin and vitellogenin in red lip mullet(Chelon haematocheilus): Purification, characterization, and evaluation as potential biomarkers for detecting estrogenic activity (2009)
  • 著者名/発表者名: Hong L., Fujita T., Wada T., Amano H., Hiramatsu N., Zhang X., Todo T. and Hara A
  • 雑誌名: Comparative Biochemistry and Physiology Part C 巻: 149(1) ページ: 9-17
• [学会発表] イトヨ腎臓での男性ホルモン刺激によるスピギン合成にはARαが必須である (2011)
  • 著者名/発表者名: 長江真樹, 松尾昴, 瀬川卓也, 東藤孝, 勝義直, 井口泰泉, Alexander P. Scott, Ioanna Katsiadaki
  • 学会等名: 第14回環境ホルモン学会研究発表会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-12-01
• [学会発表] トビハゼを用いた干潟における環境ホルモン汚染の影響評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 鈴木絢子, 長江真樹, 征矢野清
  • 学会等名: 第14回環境ホルモン学会研究発表会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-12-01
• [学会発表] 原彰彦"イトヨ腎臓におけるスピギンとアンドロジェン受容体の発現解析" (2011)
  • 著者名/発表者名: 瀬川卓也, 松尾昴, 長江真樹, 平松尚志, 東藤孝
  • 学会等名: 平成23年度日本水産学会北海道支部大会
  • 発表場所: 函館
  • 年月日: 2011-11-26
• [学会発表] 使用方法の異なるPPCPsをマーカーとして用いた河川水の生活排水等による汚濁パターンの分類法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 三浦嘉仁, 山城詩織, 山中潤二, 久保隆, 長江真樹, 有薗幸司, 高尾雄二
  • 学会等名: 第20回環境化学討論会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2011-07-17
• [学会発表] 九州北部河川における環境エストロゲン汚染の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 瀬戸彩友, 小柳祐美, 秦拓朗, 荒木一清, 奈須一晃, 高尾雄二, 長江真樹
  • 学会等名: 第13回環境ホルモン学会研究発表会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-12-16
• [学会発表] 外因性男性ホルモンにより誘導されるトゲウオ腎臓での特異的バイオマーカー(スピギン)と男性ホルモン受容体の遺伝子発現 (2009)
  • 著者名/発表者名: 松尾昴
  • 学会等名: 環境ホルモン学会
  • 発表場所: 東京大学山上会館
  • 年月日: 2009-12-08
• [学会発表] 外因性男性ホルモンにより誘導されるトゲウオ腎臓での特異的バイオマーカー(スピギン)と男性ホルモン受容体の遺伝子発現 (2009)
  • 著者名/発表者名: 松尾昴, 岩田健志, 大久保信幸, 松原孝博, 征矢野清, Ioanna Katsiadaki, Alexander P. Scott, 長江真樹
  • 学会等名: 第12回環境ホルモン学会研究発表会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-12-07
• [学会発表] マハゼビテロゲニンを指標にした九州北西部河口域における環境エストロゲン汚染評価 (2009)
  • 著者名/発表者名: 長江真樹, 秦拓朗, 武村幸紀, 城山健一郎, 奈須一晃, 高尾雄二, 大久保信幸, 松原孝博, 征矢野清
  • 学会等名: 第12回環境ホルモン学会研究発表会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-12-07
• [図書] Coastal Environmental and Ecosystem Issues of the East China Sea, A. Ishimatsu and H. J Lie(eds), Nagasaki University (2010)
  • 著者名/発表者名: Nagae M., Takao Y., Ohkubo N., Matsubara T. and Soyano K
  • 出版者: Estrogenic activity in estuaries by measuring serum vitellogenin concentration of Japanese male common goby in Northwestern part of Kyusyu
• [図書] Coastal Environmental and Ecosystem Issues of the East China Sea, A. Ishimatsu and H. J Lie(eds), Nagasaki University (2010)
  • 著者名/発表者名: Takao Y., Kuwahara K., Nagae M. and Soyano K
  • 出版者: Relationship between concentration of chemical substances in estuarine sediments and concentration of vitellogenin in mudskipper(Periophthalmus modestus) and common goby(Acanthogobius flavimanus) serum
• [図書] Coastal Environmental and Ecosystem Issues of the East China Sea, A. Ishimatsu and H. J Lie(eds), Nagasaki University (2010)
  • 著者名/発表者名: Soyano K., Aoki J., Itashiki, Y., Park C. B., Nagae M., Takao Y., Lee Y. D., Yeo I. K. and Zhong J
  • 出版者: Contaminations by endocrine disrupting chemicals in coastal waters of the East China Sea
• [図書] Estrogenic activity in estuaries by measuring serum vitellogenin concentration of Japanese male common goby in Northwestern part of Kyusyu. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nagae M, Takao Y, Ohkubo N, Matsubara T, Soyano K
  • 出版者: Nagasaki University/TERRAPUB
• [図書] Estrogenic activity in estuaries by measuring serum vitellogenin concentration of Japanese male common goby in Northwestern part of Kyusyu. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nagae M, Takao Y, Ohkubo N, Matsubara T, Sovano K
  • 総ページ数: 9
  • 出版者: Nagasaki University/TERRAPUB