異性化タンパク質修復酵素PIMTの活性調節機構の解析

• 研究課題/領域番号: 21590069
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 古地 壯光 北里大学, 薬学部, 准教授 (00302167)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2011年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2010年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2009年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 分子生物学 / アスパラギン酸 / アスパラギン / PIMT / 異性化 / ラセミ化 / タンパク質 / 修復 / 発現調節

研究概要

異性化タンパク質修復酵素PIMTの発現調節機構の解明を目的として、部分的に欠損あるいは点変異させた各種プロモーターを用いたレポータージーンアッセイにより転写調節部位の特定を行い、プロモーター活性に必要な最小領域を同定した。また本領域に結合するタンパク質を簡便に精製し、LC-MS/MSにより転写因子候補の同定を試みた結果、転写因子NRF1の同定に成功した。さらに、NRF1が実際に本プロモーター部位に結合することを、ゲルシフトアッセイおよびクロマチン免疫沈降法を用いて確認した。

研究成果

• [雑誌論文] Spatiotemporal localization of D-amino acid oxidase and D-aspartate oxidases during development in Caenorhabditis elegans (2012)
  • 著者名/発表者名: Saitoh Y, Katane M, Kawata T, Maeda K, Sekine M, Furuchi T, Kobuna H, Sakamoto T, Inoue T, Arai H, Nakagawa Y, Homma H
  • 雑誌名: Mol Cell Biol 巻: 32(10) 号: 10 ページ: 1967-1983
  • DOI: 10.1128/mcb.06513-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of the active site residues arginine-216 and arginine-237 in the substrate specificity of mammalian D-aspartate oxidase (2011)
  • 著者名/発表者名: Katane M, Saitoh Y, Maeda K, Hanai T, Sekine M, Furuchi T, Homma H
  • 雑誌名: Amino Acids 巻: 40(2) 号: 2 ページ: 467-476
  • DOI: 10.1007/s00726-010-0658-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of the active site residues arginine-216 and arginine-237 in the substrate specificity of mammalian D-aspartate oxidase. (2011)
  • 著者名/発表者名: Katane, Masumi
  • 雑誌名: Amino Acids. 巻: 40(2) ページ: 467-476
  • 査読あり
• [雑誌論文] Thiolactomycin inhibits D-aspartate oxidase : a novel approach to probing the active site environment (2010)
  • 著者名/発表者名: Katane M, Saitoh Y, Hanai T, Sekine M, Furuchi T, Koyama N, Nakagome I, Tomoda H, Hirono S, Homma H
  • 雑誌名: Biochimie 巻: 92(10) 号: 10 ページ: 1371-1378
  • DOI: 10.1016/j.biochi.2010.06.021
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative characterization of three D-aspartate oxidases and one D-amino acid oxidase from Caenorhabditis elegans (2010)
  • 著者名/発表者名: Katane M, Saitoh Y, Seida Y, Sekine M, Furuchi T, Homma H
  • 雑誌名: Chem Biodivers 巻: 7(6) 号: 6 ページ: 1424-1434
  • DOI: 10.1002/cbdv.200900294
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of protein L-isoaspartyl/D-aspartyl O-methyltransferase(PIMT) in intracellular signal transduction (2010)
  • 著者名/発表者名: Furuchi T, Sakurako K, Katane M, Sekine M, Homma H
  • 雑誌名: Chem Biodivers 巻: 7(6) 号: 6 ページ: 1337-1348
  • DOI: 10.1002/cbdv.200900273
  • 査読あり
• [雑誌論文] Thiolactomycin inhibits d-aspartate oxidase : A novel approach to probing the active site environment. (2010)
  • 著者名/発表者名: Katane, Masumi
  • 雑誌名: Biochimie. 巻: 92(10) ページ: 1371-1378
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative characterization of three D-aspartate oxidases and one D-amino acid oxidase from Caenorhabditis elegans. (2010)
  • 著者名/発表者名: Katane, Masumi
  • 雑誌名: Chem Biodivers. 巻: 7(6) ページ: 1424-1434
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of protein L-isoaspartyl/D-aspartyl O-methyltransferase (PIMT) in intracellular signal transduction. (2010)
  • 著者名/発表者名: Furuchi, Takemitsu
  • 雑誌名: Chem Biodivers. 巻: 7(6) ページ: 1337-1348
  • 査読あり
• [雑誌論文] Apoptotic inducers activate the release of D-aspartate through a hypotonic stimulus-triggered mechanism in PC12 cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Furuchi T, Suzuki T, Sekine M, Katane M, Homma H
  • 雑誌名: Arch Biochem Biophys 巻: 490(2) 号: 2 ページ: 118-128
  • DOI: 10.1016/j.abb.2009.08.017
  • 査読あり
• [雑誌論文] Apoptotic inducers activate the release of D-aspartate through a hypotonic stimulus-triggered mechanism in PC12 cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Furuchi, Takemitsu
  • 雑誌名: Arch Biochem Biophys. 490(2) ページ: 118-128
  • 査読あり
• [学会発表] Protein L-isoaspartyl/D-aspartyl-o-methyltransferase(PIMT)の転写調節機構の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 古地壯光、本間浩
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会(京都)シンポジウム
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] Protein L-isoaspartyl/D-aspartyl-o-methyltransferase (PIMT)の転写調節機構の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 古地壯光
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会シンポジウム「D-アミノ酸の生化学-飛躍する新領域-」
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] 異性化タンパク質修復酵素PIMTの転写因子の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 立石秀樹、古地壯光、原田怜、清水由香里、伊藤耕平、片根真澄、関根正恵、太田安隆、本間浩
  • 学会等名: 第7回D-アミノ酸研究会学術講演会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-09-09
• [学会発表] Identification of the transcription factor(s) responsible for Protein L-isoaspartyl(D-aspartyl) O-methyltransferase(PIMT) gene expression (2011)
  • 著者名/発表者名: Takemitsu Furuchi, Satoru Harada, Kohei Ito, Shimizu Yukari, Masumi Katane, Masae Sekine, Yasutaka Ohta, Hiroshi Homma
  • 学会等名: 23rd Biennial Joint Meeting of the International Society for Neurochemistry(ISN) and the European Society for Neurochemistry(ESN)
  • 発表場所: Athens, Greece
  • 年月日: 2011-08-29
• [学会発表] Identification of the transcription factor(s) responsible for Protein L-isoaspartyl (D-aspartyl) O-methyltransferase (PIMT) gene expression (2011)
  • 著者名/発表者名: Furuchi, Takemitsu
  • 学会等名: 23rd Biennial Joint Meeting of the International Society for Neurochemistry (ISN) and the European Society for Neurochemistry (ESN)
  • 発表場所: アテネ、ギリシャ
  • 年月日: 2011-08-29
• [学会発表] Protein L-isoaspartyl(D-aspartyl) O-methyltransferase(PIMT)の転写調節に関わる因子の探索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 伊藤耕平、古地壯光、原田怜、清水由香里、片根真澄、関根正恵、太田安隆、本間浩
  • 学会等名: 第83回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] Protein L-isoaspartyl(D-aspartyl) O-methyltransferase(PIMT)の転写調節に関わる因子の探索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 伊藤耕平
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会第83回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] FUNCTIONAL ANALYSIS OF THE PROTEIN L-ISOASPARTYL/D-ASPARTYL O-METHYLTRANSFERASE(PINT)GENE PROMOTER (2010)
  • 著者名/発表者名: Furuchi, Takemitsu
  • 学会等名: OzBio2010
  • 発表場所: メルボルン,オーストラリア
  • 年月日: 2010-09-28
• [学会発表] 異性化タンパク質修復酵素PIMTの転写調節因子の検索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原田怜、古地壯光、清水由香里、伊藤耕平、片根真澄、関根正恵、太田安隆、本間浩
  • 学会等名: 第6回D-アミノ酸研究会学術講演会
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 2010-09-18
• [学会発表] 異性化タンパク質修復酵素PIMTの転写調節因子の検索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原田怜
  • 学会等名: 第6回D-アミノ酸研究会学術講演会
  • 発表場所: 富山国際会議場
  • 年月日: 2010-09-18
• [学会発表] Protein L-isoaspartyl/D-aspartyl-o-methyltransferase(PIMT)の転写活性化に必須な領域の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原田怜、古地壯光、清水由香里、片根真澄、関根正恵、本間浩
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2010-03-28
• [学会発表] Protein L-isoaspartyl/D-aspartyl methyltransferase promoter(PIMT)の転写活性化に必須な領域の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原田怜
  • 学会等名: 日本薬学会 第130年会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2010-03-28
• [学会発表] Protein L-isoaspartyl/D-aspartyl methyltransferase(PIMT)プロモーターの転写制御に関わる転写因子の探索 (2009)
  • 著者名/発表者名: 清水由香里、古地壯光、原田怜、小杉桜子、片根真澄、関根正恵、本間浩
  • 学会等名: 第53回日本薬学会関東支部大会
  • 発表場所: 坂戸
  • 年月日: 2009-10-03
• [学会発表] Protein L-isoaspartyl/D-aspartyl methyltransferase promoter(PIMT)プロモーターの活性制御に関わる転写因子の探索 (2009)
  • 著者名/発表者名: 清水由香里
  • 学会等名: 日本薬学会関東支部会
  • 発表場所: 城西大学
  • 年月日: 2009-10-03
• [学会発表] Characterization of the promoter region of the protein L-isoaspartyl/D-aspartyl O-methyltransferase(PIMT) gene (2009)
  • 著者名/発表者名: Yukari Shimizu, Takemitsu Furuchi, Sakurako Kosugi, Masumi Katane, Masae Sekine, Hiroshi Homma
  • 学会等名: The first international conference of D-amino acid research
  • 発表場所: Awaji, Hyogo
  • 年月日: 2009-07-03
• [学会発表] Characterization of the promoter region of the protein L-isoaspartyl/D-aspartyl O-methyltransferase(PIMT)gene. (2009)
  • 著者名/発表者名: Shimizu, Yukari
  • 学会等名: The 1^<st> International Conference of D-Amino Acid Research
  • 発表場所: 淡路
  • 年月日: 2009-07-03
• [学会発表] Analysis of mechanisms of EDF-triggered hyperactivation of ERK in L-isoaspartyl/D-aspartyl O-methyltransferase(PIMT)-knockdown cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Takemitsu Furuchi, Sakurako Kosugi, Satoru Harada, Masumi Katane, Masae Sekine, Hiroshi Homma
  • 学会等名: The first international conference of D-amino acid research
  • 発表場所: Awaji, Hyogo
  • 年月日: 2009-07-02
• [学会発表] Analysis of mechanisms of EGF-triggered hyperactivation of ERK in L-isoasparty 1/D-aspartyl O-methyltransferase(PIMT)-knockdown cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Furuchi, Takemitsu
  • 学会等名: The 1^<st> International Conference of D-Amino Acid Research
  • 発表場所: 淡路
  • 年月日: 2009-07-02
• [学会発表] Simple high-performance liquid chromatography-fluorescence detection method to measure protein L-isoaspartyl/D-aspartyl O-methyltransferase activity in cell lysates (2009)
  • 著者名/発表者名: Takemitsu Furuchi, Sakurako Kosugi, Tsukasa Egawa, Keiko Ohno, Masae, Sekine, Masumi Katane, Hiroshi Homma
  • 学会等名: 21th IUBMB and 12th FAOBMB International congress of biochemistry and molecular biology
  • 発表場所: Shanghai, China
• [学会発表] Simple high-performance liquid chromatography-fluorescence detection method to measure protein L-isoaspartyl/D-aspartyl O-methyltransferase activity in cell lysates. (2009)
  • 著者名/発表者名: Furuchi, Takemitsu
  • 学会等名: 21^<st> IUBMB and 12^<th> FAOBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology
  • 発表場所: 上海
• [備考]
  • URL: http://www.pharm.kitasato-u.ac.jp/ac/SeitaiHP/
• [備考]
  • URL: http://www.pharm.kitasato-u.ac.jp/ac/SeitaiHP/
• [備考]
  • URL: http://www.pharm.kitasato-u.ac.jp/ac/SeitaiHP/
• [備考]
  • URL: http://www.pharm.kitasato-u.ac.jp/ac/web/ResTop.htm