生物発光長期イメージングによる時計タンパク質の核-細胞質間シャトル機構解析

• 研究課題/領域番号: 21590266
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 環境生理学(含体力医学・栄養生理学)
• 研究機関: 独立行政法人産業技術総合研究所
• 研究代表者: 中島 芳浩 独立行政法人産業技術総合研究所, 健康工学研究部門, 研究グループ長 (10291080)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2011年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2010年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2009年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 生物時計 / ルシフェラーゼ / 発光イメージング / 核内移行

研究概要

本研究では、時刻依存的な時計タンパク質の核-細胞質間シャトルを生物発光プローブを用いた長期発光イメージングにより、時計タンパク質の細胞内局在の変化を追跡し、時刻依存的な局在変化の分子機構解明を目的とする。このため発光イメージングに特化した発光プローブの改良、およびイメージング条件の最適化などの基盤技術の構築に成功、さらに時計タンパク質の細胞質と核の間の連続する局在変化の可視化に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Enhanced beetle luciferase for high-resolution bioluminescence imaging (2010)
  • 著者名/発表者名: Y. Nakajima, T. Yamazaki, S. Nishii, T. Noguchi, H. Hoshino, K. Niwa, V. R. Viviani, Y. Ohmiya
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 5 号: 4 ページ: e10011-e10011
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0010011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bioluminescence assays : multicolor luciferase assay, secreted luciferase assay and imaging luciferase assay (2010)
  • 著者名/発表者名: Y. Nakajima, Y. Ohmiya
  • 雑誌名: Expert Opin. Drug Discover 巻: 5 号: 9 ページ: 835-849
  • DOI: 10.1517/17460441.2010.506213
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dual-color luciferase mouse directly demonstrates coupled expression of two clock genes (2010)
  • 著者名/発表者名: Noguchi T, Michihata T, Nakamura W, Takumi T, Shimizu R, Yamamoto M, Ikeda M, Ohmiya Y, Nakajima Y.
  • 雑誌名: Biochemistry 巻: 49(37) 号: 37 ページ: 8053-8061
  • DOI: 10.1021/bi100545h
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced red-emitting railroad worm luciferase for bioassays and bioimaging (2010)
  • 著者名/発表者名: X. Li, Y. Nakajima, K. Niwa, V. R. Viviani, Y. Ohmiya
  • 雑誌名: Protein Sci 巻: 19 号: 1 ページ: 26-33
  • DOI: 10.1002/pro.279
  • 査読あり
• [雑誌論文] Coactivation of the CLOCK-BMAL1 complex by CBP mediates resetting of the circadian clock (2010)
  • 著者名/発表者名: Y. Lee, J, Lee, I. Kwon, Y. Nakajima, Y. Ohmiya Y, G. H. Son, K. H. Lee, K. Kim
  • 雑誌名: J. Cell Sci 巻: 123 号: 20 ページ: 3547-3557
  • DOI: 10.1242/jcs.070300
  • 査読あり
• [雑誌論文] Coactivation of the CLOCK-BMAL1 complex by CBP mediates resetting of the circadian clock (2010)
  • 著者名/発表者名: Lee Y, Lee J, Kwon I, Nakajima Y, Ohmiya Y, Son GH, Lee KH, Kim K
  • 雑誌名: Journal of Cell Science 巻: 123 ページ: 3547-3557
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced beetle luciferase for high-resolution bioluminescence imaging (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakajima Y, Yamazaki T, Nishii S, Noguchi T, Hoshino H, Niwa K, Viviani V.R, Ohmiya Y
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced red-emitting railroad worm luciferase for bioassays and bioimaging".(2010) (2010)
  • 著者名/発表者名: Li, X., Nakajima, Y., Niwa, K., Viviani, V.R., Ohymiya, Y.
  • 雑誌名: Protein Science 19 ページ: 26-33
  • 査読あり
• [学会発表] 生物発光技術による細胞情報解析の新展開 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中島芳浩
  • 学会等名: 生物発光化学発光研究会第28回学術講演階
  • 発表場所: 長崎県長崎大学
  • 年月日: 2011-10-08
• [学会発表] Development of enhanced beetle luciferase for high-resolution bioluminescence imaging (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakajima, Y., Ohmiya, Y.
  • 学会等名: Pacifichem 2010
  • 発表場所: ハワイコンベンションセンター
  • 年月日: 2010-12-17
• [学会発表] Development of enhanced beetle luciferase for high-resolution biolumines cence imaging (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakajima, Y., Ohmiya, Y.
  • 学会等名: Pacifichem2010
  • 発表場所: ハワイコンベンションセンター
  • 年月日: 2010-12-17
• [学会発表] Development of multicolor luciferase assay system using different coloremitting luciferases for monitoring multiple gene expressions (2009)
  • 著者名/発表者名: 中島芳浩
  • 学会等名: The 36th Congress of the International Union of Physiological Sciences
  • 発表場所: 京都国際会議場(京都)
  • 年月日: 2009-08-01