バイオイメージングを用いた癌細胞由来ADAM28の生体内機能解析

• 研究課題/領域番号: 21590421
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 望月 早月 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (80365428)
• 研究分担者: 岡田 保典 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00115221)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2011年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2010年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2009年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: ADAM / 癌転移 / VWF / アポトーシス / MMP / CTGF / 血管新生 / 乳癌 / バイオイメージング / 肺癌 / 転移 / 浸潤 / ルシフェラーゼ

研究概要

ADAM28の癌細胞転移への関与を調べるために、ルシフェラーゼとVenus融合タンパク質(ffLuc-cp156)を恒常的に発現する肺癌と乳癌細胞株(PC-9^<ffluc-cp156>とMDA-MB231^<ffluc-cp156>)を作製し、マウスの尾静脈内注入による肺転移モデルと乳房皮下脂肪組織移植による自然転移モデルを用いて癌転移を解析した。バイオイメージングを用いた解析法によりPC-9^<ffluc-cp156>細胞の肺転移は、shRNAによるADAM28の発現抑制とADAM28に対する中和抗体処理により有意に抑制された。また、MDA-MB231<ffluc-cp156>細胞でもshRNAによるADAM28発現抑制で局所での癌細胞の増殖が抑制され, ffLuc-cp156に対するプライマーを用いたRT-PCRの解析から、各臓器(肺、心臓、肝臓、腎臓、脳など)への転移が有意に抑制された。さらに、PC-9^<ffluc>細胞のマウス尾静脈内注入後におけるマウス血漿中VWFの分解は、mock群に比べてshADAM28群で抑制されていた。以上のことから、癌細胞に発現するADAM28はVWFを血中で分解し、VWF誘導性アポトーシスの回避により癌細胞転移促進に働く可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Effect of ADAM28 on Carcinoma Cell Metastasis by Cleavage of von Willebrand Factor (2012)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki, Kenji Soejima, Masayuki Shimoda, Hitoshi Abe, Aya Sasaki, Hirotaka James Okano, Hideyuki Okano, Yasunori Okada
  • 雑誌名: J. Natl. Cancer Inst 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulatory Role of Dendritic Cells in Post-Infarction Healing and Left Ventricular Remodeling (2012)
  • 著者名/発表者名: Atsushi Anzai, Toshihisa Anzai, Shigenori Nagai, Yuichiro Maekawa, Kotaro Naito, Hidehiro Kaneko, Yasuo Sugano, Toshiyuki Takahashi, Hitoshi Abe, Satsuki Mochizuki, Motoaki Sano, Tsutomu Yoshikawa, Yasunori Okada, Shigeo Koyasu, Satoshi Ogawa, and Keiichi Fukuda
  • 雑誌名: Circulation 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAM28 (2012)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki and Yasunori Okada
  • 雑誌名: Handbook of Proteolytic Enzymes 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of ADAM28 on Carcinoma Cell Metastasis by Cleavage of von Willebrand Factor (2012)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki
  • 雑誌名: Journal of the National Cancer Institute 巻: 104(In press) 号: 12 ページ: 906-922
  • DOI: 10.1093/jnci/djs232
  • 査読あり
• [雑誌論文] Host-derived MMP-13 exhibits a protective role in lung metastasis of melanoma cells by local endostatin production (2011)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Fukuda, Satsuki Mochizuki, Hitoshi Abe, Hirotaka James Okano, Chikako Hara-Miyauchi, Hideyuki Okano, Noriko Yamaguchi, Mitsuo Nakayama, Jeanine D' Armiento and Yasunori Okada
  • 雑誌名: Br. J. Cancer 巻: 105 ページ: 1615-1624
  • 査読あり
• [雑誌論文] Semaphorin 3A is expressed in human osteoarthritic cartilage and antagonizes vascular endothelial growth factor 165-promoted chondrocyte migration (2011)
  • 著者名/発表者名: Masashi Okubo, Tokuhiro Kimura, Yoshinari Fujita, Satsuki Mochisuki, Yasuo Niki, Enomoto H, Yasunori Suda, Yoshiaki T and Yasunori Okada
  • 雑誌名: Arthritis Rheum 巻: 63 ページ: 3000-3009
  • 査読あり
• [雑誌論文] Host-derived MMP-13 exhibits a protective role in lung metastasis of melanoma cells by local endostatin production (2011)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Fukuda
  • 雑誌名: British Journal of Cancer 巻: 105 号: 10 ページ: 1615-1624
  • DOI: 10.1038/bjc.2011.431
  • 査読あり
• [雑誌論文] Semaphorin 3A is expressed in human osteoarthritic cartilage and antagonizes vascular endothelial growth factor 165-promoted chond rocyte migration (2011)
  • 著者名/発表者名: Masashi Okubo
  • 雑誌名: Arthritis & Rheumatism 巻: 63 号: 10 ページ: 3000-3009
  • DOI: 10.1002/art.30482
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAM28 (2011)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki
  • 雑誌名: Handbook of Proteolytic Enzymes 巻: 3(In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Connective tissue growth factor is a substrate of ADAM28 (2010)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki, Rena Tanaka, Masayuki Shimoda, Junko Onuma, Yutaka Fujii, Hiromitsu Jinno and Yasunori Okada
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 402 ページ: 651-657
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAM28 is a serological and histochemical marker for non-small-cell lung cancers (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiroaki Kuroda, Satsuki Mochizuki, Masayuki Shimoda, Miyuki Chijiiwa, Kazunori Kamiya, Yotaro Izumi, Masazumi Watanabe, Hirohisa Horinouchi, Masahumi Kawamura, Koichi Kobayashi and Yasunori Okada
  • 雑誌名: Int. J. Cancer 巻: 127 ページ: 1844-1856
  • 査読あり
• [雑誌論文] Connective tissue growth factor is a substrate of ADAM28 (2010)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 402 ページ: 651-657
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAM28 is a serological and histochemical marker for non-small-cell lung cancers (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiroaki Kuroda
  • 雑誌名: International Journal of Cancer 巻: 127 ページ: 1844-1856
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAM28 is a serological and histochemical marker for non-small-cell lung cancers (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiroaki Kuroda
  • 雑誌名: International Journal of Cancer (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAM28 as therapeutic target (2009)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki
  • 雑誌名: Current Pharmaceutical Design 15 ページ: 2349-2358
  • 査読あり
• [雑誌論文] MMP-13 Plays a Role in Keratinocyte Migration, Angiogenesis, and Contraction in Mouse Skin Wound Healing (2009)
  • 著者名/発表者名: Noriko Hattori
  • 雑誌名: American Journal of Pathology 175 ページ: 533-546
  • 査読あり
• [学会発表] ADAM28による癌細胞転移機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 望月早月、下田将之、岡田保典
  • 学会等名: 弟9回日本エラスチン研究会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-12-02
• [学会発表] ADAM28 may promote VEGF165-induced angiogenesis in breast carcinomas by the CTGF digestion in the CTGF/VEGF165 complex (2011)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki, Rena Tanaka, and Yasunori Okada
  • 学会等名: Gordon Research Conference on Matrix Metalloproteinase
  • 年月日: 2011-08-10
• [学会発表] ADAM28 may promote VEGF165-induced angiogenesis in breast carcinomas by the CTGF digestion in the CTGF/VEGF165 complex (2011)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki
  • 学会等名: Gordon Research Conference on Matrix Metal loproteinase
  • 発表場所: Smithfield, USA
  • 年月日: 2011-08-10
• [学会発表] ADAM28のCTGF分解を介したCTGF/VEGF_<165>複合体からのVEGF_<165>の遊離と血管新生促進作用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 望月早月、田中伶奈、岡田保典
  • 学会等名: 第20回がん転移学会学術集会・総会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2011-06-30
• [学会発表] 結合組織増殖因子(Connective tissue growth factor, CTGF)は、ADAM28の新規基質である (2011)
  • 著者名/発表者名: 望月早月、田中伶奈、岡田保典
  • 学会等名: 第43回日本結合組織学会学術大会、第58回マトリックス研究会大会合同学術集会
  • 発表場所: 別府
  • 年月日: 2011-06-11
• [学会発表] ADAM28のヒト癌細胞増殖・転移への関与と肺癌診断への応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 望月早月、岡田保典
  • 学会等名: 第42回日本結合組織学会学術大会、第57回マトリックス研究会大会合同学術集会
  • 発表場所: 秋田
  • 年月日: 2010-08-19
• [学会発表] ADAM28のヒト癌細胞増殖・転移への関与と肺癌診断への応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 望月早月
  • 学会等名: 第42回日本結合組織学術大会・第57回マトリックス研究会大会合同学術集会
  • 発表場所: 秋田拠点センター・アルヴェ(秋田)
  • 年月日: 2010-08-19
• [学会発表] 癌細胞転移におけるADAM28の役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 望月早月、下田雅之、岡田保典
  • 学会等名: 第19回日本がん転移学会学術集会・総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2010-06-16
• [学会発表] ADAM28によるvon Wiilebrand factorの分解と癌細胞転移 (2010)
  • 著者名/発表者名: 望月早月
  • 学会等名: 第17回プロテオグリカンフォーラム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-02-27
• [学会発表] ADAM28はVWF誘導性のアポトーシスを抑制し、癌細胞の浸潤・転移促進に働く (2009)
  • 著者名/発表者名: 望月早月、下田雅之、岡野洋尚、岡田保典
  • 学会等名: 第68回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-10-02
• [学会発表] ADAM28 is involved in the invasion and metastasis of cancer cells by escaping from apoptosis through the cleavage of von Willebrand factor (2009)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki, Masayuki Shimoda, Kenji Soejima, Hirotaka James Okano, Osahiko Tsuji, and Yasunori Okada
  • 学会等名: Gordon Research Conference on Matrix Metalloproteinase
  • 発表場所: Les Diablerets
  • 年月日: 2009-09-02
• [学会発表] The role of ADAM28 in cancer cell proliferation and progression (2009)
  • 著者名/発表者名: Satsuki Mochizuki, Masayuki Shimoda, Kenji Soejima, Rena Tanaka, Hirotaka James Okano, Osahiko Tsuji and Yasunori Okada
  • 学会等名: 8^<th> Pan-Pacific Connective Tissue Society Symposium
  • 発表場所: Yokosuka
  • 年月日: 2009-06-05
• [図書] 第1章MMP/TIMP pp66-68,第6章線維化pp458-460「日本血管生物医学事典」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 望月早月、岡田保典
  • 出版者: 朝倉書店
• [図書] 日本血管生物医学事典 (2011)
  • 著者名/発表者名: 望月早月
  • 出版者: 朝倉書店(印刷中)
• [備考]
  • URL: http://keio-okada-lab.jp/
• [備考]
  • URL: http://keio-okada-lab.jp/
• [備考]
  • URL: http://keio-okada-lab.jp/
• [備考]
  • URL: http://keio-okada-lab.jp/