粘膜アジュバントLTを用いた結核菌に対する経鼻投与サブユニットワクチンの開発

• 研究課題/領域番号: 21590497
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 細菌学(含真菌学)
• 研究機関: 藤田保健衛生大学
• 研究代表者: 辻 孝雄 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (60171998)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2011年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2010年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2009年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 結核抗原 / 毒素原性大腸菌 / 下痢毒素(LT) / Ag85A, B, C / CFP-10 / BCG / Ag85A,B,C / EAST-6 / PPE

研究概要

本研究では、BCG抗原(Ag85A, B, C)及びTB7.3を除く結核菌特異抗原(CFP-10, EAST-6、PPE)の精製に成功した。しかし各抗原とLTBとの融合体は凝集し易く精製出来ていない。また精製抗原+mLTのマウス経鼻投与によるBCGまたは結核感染予防実験では、BCG抗原のBCGまたは結核感染予防効果は低かった。さらに結核特異抗原については、結核菌感染予防実験が数ヶ月の時間を要するため、現在も検討を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Specific egg yolk immunoglobulin as a new preventive approach for Shiga-toxin-mediated diseases (2012)
  • 著者名/発表者名: Neri P, Tokoro S, Kobayashi R, Sugiyama T, Umeda K, Shimizu T, Tsuji T, Kodama Y, Oguma K, Mori H.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 6(10)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Randomized placebo-controlled clinical trial of immunoglobulin Y as adjunct to standard supportive therapy for rotavirus-associated diarrhea among pediatric patients. (2012)
  • 著者名/発表者名: Rahman S, Higo-Moriguchi K, Htun KW, Taniguchi K, Icatlo FC Jr, Tsuji T, Kodama Y, Van Nguyen S, Umeda K, Oo HN, Myint YY, Htut T, Myint SS, Thura K, Thu HM, Fatmawati NN, Oguma K.
  • 雑誌名: Vaccine 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recombinant Shiga toxin B subunit can induce neutralizing IgY antibody Biol (2012)
  • 著者名/発表者名: Neri P, Tokoro S, Sugiyama T, Umeda K, Shimizu T, Tsuji T, Kodama Y, Mori H.
  • 雑誌名: Pharm. Bull 巻: 35(6) ページ: 917-923
  • 査読あり
• [雑誌論文] Putative new heat-stable cytotoxic and enterotoxic factors in culture supernatant of Escherichia coli isolated from drinking water (2011)
  • 著者名/発表者名: Ribeiro AD, Niemann FS, Gatti MSV, Lanna MSC, Tsuji T, Yano T.
  • 雑誌名: J Vennom Anim Toxins and Trop Dis 巻: 17 ページ: 103-107
  • 査読あり
• [雑誌論文] The bacteriological and epidemiological characteristics of enterotoxigenic Escherichia coli isolated in Tokyo between 1966 and 2009 (2011)
  • 著者名/発表者名: Koshi N., Obata H., Monma C., Nakama A., Kai A., Tsuji T.
  • 雑誌名: J. Clinical. Microbiol 巻: 49 ページ: 3348-3351
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural and mutational analyses of the receptor binding domain of botulinum D/C mosaic neurotoxin : insight into the ganglioside binding mechanism (2011)
  • 著者名/発表者名: Nuemket N, Tanaka Y, Tsukamoto K, Tsuji T Nakamura K, Kozaki S, Yao M, Tanaka I.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 411(2) ページ: 433-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Single chain variable fragment antibodies against Shiga toxins isolated from a human antibody phage display library (2011)
  • 著者名/発表者名: Neri P, Shigemori N, Hamada-Tsutsumi S, Tsukamoto K, Arimitsu H, Shimizu T, Akahori Y, Kurosawa Y, Tsuji T.
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 29(33) ページ: 5340-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Single chain variable fragment antibodies against Shiga toxins isolated from a human antibody phase display library (2011)
  • 著者名/発表者名: Neri P
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 29 ページ: 5340-5346
  • 査読あり
• [雑誌論文] structural and mutational analyses of the receptor binding domain of botulinum D/C mosaic neurotoxin: insight into the ganglioside binding mechanism (2011)
  • 著者名/発表者名: Nuemket N
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 29 ページ: 433-439
  • 査読あり
• [雑誌論文] The bacteriological and epidemiological characteristics of enterotoxigenic Escherichia coli isolated in Tokyo between 1966 and 2009 (2011)
  • 著者名/発表者名: Koshi N.
  • 雑誌名: J.Clinical.Microbiol. 巻: 49 ページ: 103-107
  • 査読あり
• [雑誌論文] Specific egg yolk immunoglobulin as a new preventive approach for Shiga-toxin-mediated diseases (2011)
  • 著者名/発表者名: Paola Neri, Shunji Tokoro, Ryo Kobayashi, Tsuyoshi Sugiyama, Kouji Umeda, Takeshi Shimizu, Takao Tsuji, Yoshikatsu Kodama, Keiji Oguma Hiroshi Mori
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 6(10) 号: 10 ページ: e26526-e26526
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0026526
  • 査読あり
• [雑誌論文] Passive oral immunization by egg yolk immunoglobulin (IgY) to Vibrio cholerae effectively prevents cholera (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirai K
  • 雑誌名: Acta Med Okayama 巻: 64 ページ: 163-70
  • 査読あり
• [雑誌論文] Putative new heat-stable cytotoxic and enterotoxic factors in culture supernatant of Escherichia coli isolated from drinking water. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ribeiro AD
  • 雑誌名: J Vennom Anim Toxins ind Trop Dis 巻: 17 ページ: 103-107
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preliminary X-ray crystallographic study of the receptor-binding domain of the D/C mosaic neurotoxin from Clostridium botulinum (2010)
  • 著者名/発表者名: Nuemket N, Tanaka Y, Tsukamoto K, Tsuji T Nakamura K, Kozaki S, Yao M, Tanaka I.
  • 雑誌名: Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun 巻: 66 ページ: 608-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Passive oral immunization by egg yolk immunoglobulin(IgY) to Vibrio cholerae effectively prevents cholera (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirai K, Arimitsu H, Umeda K, Yokota K, Shen L, Ayada K, Kodama Y, Tsuji T, Hirai Y, Oguma K.
  • 雑誌名: Acta Med Okayama 巻: 64(3) ページ: 163-70
  • NAID: 120002311046
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preliminary X-ray crystallographic study of the receptor binding domain of the D/C mosaic neurotoxin from Clostridium botulinum (2010)
  • 著者名/発表者名: Nuemket N
  • 雑誌名: Acta Crystallographica Section F 巻: 66 ページ: 608-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preliminary X-ray crystallographic study of the receptor binding domain of the D/C mosaic neurotoxin from Clostridium botulinum (2010)
  • 著者名/発表者名: Nuemket N
  • 雑誌名: Acta Crystallographica Section F (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lincomycin-induced over-expression of mature recombinant cholera toxin B subunit and the holotoxin in Escherichia coli (2009)
  • 著者名/発表者名: Arimitsu H, Tsukamoto K, Ochi S, Sasaki K, Kato M, Taniguchi K, Oguma K and Tsuji T.
  • 雑誌名: Protein Expression and Purification 巻: 67 ページ: 96-103
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nucleotide sequence analysis of the enterotoxigenic Escherichia col i Ent plasmid (2009)
  • 著者名/発表者名: Ochi S, Shimizu T, Ohtani K, Ichinose Y, Arimitsu H, Tsukamoto K, Kato M, Tsuji T.
  • 雑誌名: DNA Res 巻: 16(5) ページ: 299-309
  • 査読あり
• [雑誌論文] 6種類の毒素原性大腸菌が検出された仕出し弁当を原因とする集団食中毒例とColony-sweep PCR法を応用した検査法について (2009)
  • 著者名/発表者名: 小西典子、尾畑浩魅、下島優香子、門間千枝、甲斐明美、辻孝雄
  • 雑誌名: 感染症学雑誌 巻: 83(5) ページ: 490-495
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nucleotide sequence analysis of the enterotoxigenic Escherichia coli Ent plasmid (2009)
  • 著者名/発表者名: Ochi S
  • 雑誌名: DNA Research 16 ページ: 299-309
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lincomycin-induced over-expression of mature recombinant cholera (2009)
  • 著者名/発表者名: Arimitsu H
  • 雑誌名: Protein Expression and Purification 67 ページ: 96-103
  • 査読あり
• [学会発表] 胚性腫瘍細胞P19を用いたボツリヌス神経毒素の作用機構の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 塚本健太郎、辻孝雄
  • 学会等名: 第85回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長崎県長崎市
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] Lincomycin-induced overexpression method of mutant Shiga toxin-2 for vaccine antigen (2011)
  • 著者名/発表者名: Arimitsu H
  • 学会等名: 42nd U.S.-Japan Cholera & Other Bacterial Enteric Infections Joint Panel Meeting-
  • 発表場所: Kolkata India(招待講演)
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] Structure and activity of receptor binding domain of Clostridium botulinum D/C mosaic neurotoxin (2011)
  • 著者名/発表者名: Kentaro Tsukamoto, Takao Tsuji
  • 学会等名: International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
  • 発表場所: Sapporo, Japan
  • 年月日: 2011-09-07
• [学会発表] ボツリヌスC型及びDCモザイク神経毒素は異なるガングリオシドを介して細胞内に侵入する (2010)
  • 著者名/発表者名: 西脇啓太、辻孝雄
  • 学会等名: 第47回日本細菌学会中部支部総会
  • 発表場所: 新潟県新潟市
  • 年月日: 2010-10-23
• [学会発表] ボツリヌス神経毒素受容体結合領域の結晶構造と細胞内侵入機構の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 塚本健太郎、辻孝雄
  • 学会等名: 第57回トキシンシンポジウム
  • 発表場所: 滋賀県長浜市
  • 年月日: 2010-07-15
• [学会発表] ボツリヌスDCモザイク毒素重鎖C末端領域の構造と活性について (2010)
  • 著者名/発表者名: 塚本健太郎、辻孝雄
  • 学会等名: 第8回感染症沖縄フォーラム
  • 発表場所: 沖縄県宜野湾市
  • 年月日: 2010-02-12
• [学会発表] Analysis of the transfer and plasmid maintenance regions of the enterotoxigenic Escherichia coli Ent plasmid pEntH10407. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ochi S
  • 学会等名: 45th Joint Meeting and Conference of the United States-Japan Panel on Cholera and Other Bacterial Enteric Infections
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] EC細胞を用いたボツリヌス神経毒素重鎖C末端領域の機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 塚本健太郎、辻孝雄
  • 学会等名: 第46回日本細菌学会中部支部総会
  • 発表場所: 愛知県名古屋市
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] ボツリヌス神経毒素の脂質受容体に対する結合活性の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 塚本健太郎、辻孝雄
  • 学会等名: 第41回藤田学園医学会
  • 発表場所: 愛知県豊明市
  • 年月日: 2009-10-02
• [学会発表] ボツリヌス神経毒素重鎖C末端領域の脂質受容体に対する結合活性 (2009)
  • 著者名/発表者名: 塚本健太郎、辻孝雄
  • 学会等名: 第56回トキシンシンポジウム
  • 発表場所: 岐阜県岐阜市
  • 年月日: 2009-08-26
• [学会発表] Construction of over-expression and purification system of cholera toxin and its mutants in Escherichia coli (2009)
  • 著者名/発表者名: Arimitsu H
  • 学会等名: 44th Joint Meeting and Conference of the United States-Japan Panel on Cholera and Other Bacterial Enteric Infections
  • 発表場所: San Diego in America
• [図書] ナイセリア科とその類縁属の菌について、シンプル微生物学、(第5版) (2011)
  • 著者名/発表者名: 辻孝雄
• [図書] ナイセリア科とその類縁属の菌について、シンプル微生物学(東匡伸、小熊惠二、堀田博編)、第5版 (2011)
  • 著者名/発表者名: 辻孝雄
  • 総ページ数: 436
  • 出版者: 南江堂
• [図書] ナイセリア科とその類縁属の菌について、シンプル微生物学(東匡伸、小熊恵二、堀田博編)、第5版 (2011)
  • 著者名/発表者名: 辻孝雄
  • 総ページ数: 436
  • 出版者: 南江堂