生育活性蛍光プローブを用いた酵母真菌細胞集団の定量的解析と臨床応用

• 研究課題/領域番号: 21590634
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態検査学
• 研究機関: 琉球大学
• 研究代表者: 山根 誠久 琉球大学, 大学院・医学研究科, 教授 (80125682)
• 研究分担者: 潮平 知佳 琉球大学, 大学院・医学研究科, 助教 (50325833) ; 東上里 康司 琉球大学, 医学部附属病院, 助教 (80381226)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2011年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2010年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2009年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
• キーワード: 酵母真菌 / 蛍光プローブ / 生育活性 / 抗真菌薬 / 感染症 / live/dead染色 / thiazole orange(TO) / propidium iodide(PI) / フローサイトメトリ法 / 尿路感染症 / 易感染症 / 治療予後予測 / live/dead蛍光染色 / 易感染性 / thiazole orange (TO) / propidium iodide (PI) / live / dead蛍光染色

研究概要

ヒト生体内における酵母真菌の細胞様式を,選択的な膜透過性を持つ蛍光プローブを応用して患者尿検体を直接試料に用い,フローサイトメトリ法で解析する技術を確立した。Live/dead 染色した尿中酵母真菌は,悪性腫瘍,糖尿病,自己免疫疾患患者など易感染性が危惧される患者群とその種の病態にない患者群で大きく変化した。尿中酵母真菌の存在様式を直接フローサイトメトリ法で解析することにより,患者の病態,易感染性,薬剤による治療の予後予測の指標になる可能性を見出した。

研究成果

• [雑誌論文] High-resolution MIRU-VNTRs typing reveals the unique nature of Mycobacterium tuberculosis Beifing genotype in Okinawa, Japan (2011)
  • 著者名/発表者名: Millet j., Shiohira M. C., Yamane N., Mokrousov I., Rastogi N.
  • 雑誌名: Infect. Genet. Evol. 巻: 12 ページ: 637-641
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-resolution MIRU-VNTRs typing reveals the unique nature of Mycobacterium tuberculosis Beijing genotype in Okinawa, Japan (2011)
  • 著者名/発表者名: Millet J., Shiohira M.C., Yamane N., Mokrousov I., Rastogi N.
  • 雑誌名: Infect.Genet.Evol. 巻: 12 ページ: 637-641
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of drug sensitivity and genotypes of clinically isolated strains of levofloxacin-resistant Streptococcus pneumoniae obtained from Okinawa Island, the Japanese main island and Hong Kong (2011)
  • 著者名/発表者名: Sunagawa S., Fujita J., Higa F., Tateyama M., Haranaga S., Nakasone I., Yamane N., Uno T.
  • 雑誌名: J.Antibiot (Tokyo) 巻: 64(8) ページ: 539-545
  • NAID: 10030639796
  • 査読あり
• [雑誌論文] β-ラクタマーゼ非産生・アンピシリン耐性Haemophilus influenzaeのディスク拡散法を用いた簡易同定-Cephalexin、CefsulodinおよびCefaclorディスクの有効性- (2010)
  • 著者名/発表者名: 遠藤隆一, 山根誠久, 他3名
  • 雑誌名: 臨床病理 巻: 58(10) ページ: 963-971
  • NAID: 10029426324
  • 査読あり
• [雑誌論文] 沖縄県におけるPanton-Valenrine Leukocidin陽性Staphylococcus aureusの探索型調査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮城郁乃, 山根誠久, 他4名
  • 雑誌名: 臨床病理 巻: 58(9) ページ: 869-877
  • 査読あり
• [雑誌論文] Loop-Mediated Isothermal Amplification(LAMP)法を用いた糞便検体からのクリプトスポリジウム・オーシストおよびジアルジア・シストの直接検出 (2010)
  • 著者名/発表者名: 名護珠美, 山根誠久, 他3名
  • 雑誌名: 臨床病理 巻: 58(8) ページ: 765-771
  • NAID: 10029426168
  • 査読あり
• [雑誌論文] 貯血式自己血輸血製剤の採取に伴う細菌汚染の評価 (2010)
  • 著者名/発表者名: 田野口優子, 山根誠久, 他3名
  • 雑誌名: 日本輸血細胞治療学会誌 巻: 56(3) ページ: 354-358
  • NAID: 10027584345
  • 査読あり
• [雑誌論文] 血液培養における「嫌気培養ボトル」併用の有効性評価・菌検出率と迅速陽性判定の解析から (2009)
  • 著者名/発表者名: 玉寄美也子, 山根誠久, 木佐貫京子, 河合美夢, 仲宗根勇
  • 雑誌名: 臨床病理 57 ページ: 1145-1150
  • NAID: 10026337899
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dissemination of Panton-Valentine Leukocidin-positive Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in Okinawa, Japan
  • 著者名/発表者名: Mine Y., Nakasone I., Yamamoto Y., Utani A., Yamane N., Uezato H., Takahashi K.
  • 雑誌名: J.Dermatol. 巻: (in press)
  • 査読あり
• [学会発表] 琉球大学医学部附属病院で分離されたExtended-Spectrum β-Lactamase産生Escherichia coliおよびKlebsiella pneumoniaeのESBL耐性遺伝子の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 仲宗根勇, 玉寄美也子, 山根誠久
  • 学会等名: 第58回日本臨床検査医学会
  • 発表場所: 岡山コンベンションセンター
  • 年月日: 2011-11-19
• [学会発表] Live/Dead 染色を用いたフローサイトメトリ法での尿中酵母真菌細胞の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 潮平知佳,渡嘉敷良乃,東上里康司,山根誠久
  • 学会等名: 第57回日本臨床検査医学会
  • 発表場所: 東京京王プラザホテル
  • 年月日: 2010-09-22
• [学会発表] Live/Dead染色を用いたフローサイトメトリ法での尿中酵母真菌細胞の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 潮平知佳, 山根誠久, 他3名
  • 学会等名: 第57回日本臨床検査医学会
  • 発表場所: 東京京王プラザホテル
  • 年月日: 2010-09-12
• [学会発表] Line probe assayを検査原理とするブドウ球菌Genotype試薬「GT Staphylococcus」の精度評価 (2010)
  • 著者名/発表者名: 木佐貫京子, 山根誠久, 他2名
  • 学会等名: 第57回日本臨床検査医学会
  • 発表場所: 東京京王プラザホテル
  • 年月日: 2010-09-10
• [学会発表] 沖縄県におけるPanton-Valentine leucocidin(PVL)陽性Staphylococcus aureusの探索型調査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮城郁乃, 山根誠久, 他3名
  • 学会等名: 第57回日本臨床検査医学会
  • 発表場所: 東京京王プラザホテル
  • 年月日: 2010-09-10
• [学会発表] LAMP(Loop-mediated Isothermal Amplification)法を用いた糞便検体からの Cryosporidium と Giardia の直接検出法の検討・評価 (2010)
  • 著者名/発表者名: 名護珠美, 渡嘉敷良乃, 木佐貫京子, 仲宗根勇, 山根誠久
  • 学会等名: 第21回日本臨床微生物学会総会
  • 発表場所: 東京都文京区
• [学会発表] 九州・沖縄地域で分離された Clostridiukm difficile の遺伝子疫学調査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 木佐貫京子, 仲宗根勇, 名護珠美, 渡嘉敷良乃, 河合美夢
  • 学会等名: 第21回日本臨床微生物学会総会
  • 発表場所: 東京都文京区
• [学会発表] The Unique Endemic Nature of Beijing Genotype Strains in Okinawa, Ryukyu Islands of Japan as Revealed by Newly Described 15 and 24-loci MIRU-VNTR Typing Schemes (2009)
  • 著者名/発表者名: Julie Millet, Chika Miyagi-Shiohira, Nobuhisa Yamane, Igor Mokrousov, Nalin Rastogi
  • 学会等名: 30th Annual Congress of European Society of Mycobacteriology
  • 発表場所: Porto, Portugal
• [学会発表] A Simple Disk Diffusion Test Using Cephalexin to Identify β-Lactamase-Negative, Ampicillin-Resistant Haemophihrs influenzae (2009)
  • 著者名/発表者名: R.Endo, N.Yamane, M Higa, K.Kisanuki, I.Nakasone
  • 学会等名: 49th Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy (ICAAC)
  • 発表場所: San Franclsco, CA, U.S.A.
• [備考]
  • URL: http://www.hosp.u-ryukyu.ac.jp/labo/
• [備考]
  • URL: http://www.hosp.u-ryukyu.ac.jp/labo/
• [備考]
  • URL: http://www.hosp.u-ryukyu.ac.jp/labo/
• [備考]
  • URL: http://www.hosp.u-ryukyu.ac.jp/labo/