C型肝炎ウイルスの培養細胞と生体での増殖能の比較と慢性化機序の解明

• 研究課題/領域番号: 21590868
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 加藤 孝宣 国立感染症研究所, ウイルス第二部, 室長 (20333370)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2011年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2010年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2009年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: HCV / 慢性化 / ウイルス培養 / 感染実験 / チンパンジー / 慢性感染 / 動物モデル / ウイルス増殖モデル / ウイルス培養実験

研究概要

培養細胞で作製したJFH-1ウイルスとそのJFH-1株が分離された患者血清をチンパンジーに接種し感染実験を行った。感染が成立したJFH-1株に認めた変異をJHF-1株に導入し、それらの変異がJFH-1株の培養細胞での感染増殖に与える影響を検討した。その結果、これらの変異を導入するとJFH-1株の培養細胞内での増殖は低下するが、ウイルス粒子の生成効率は亢進していた。これらの変異のJFH-1株に与える影響は、HCVのチンパンジーでの感染に関与していると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Role of the Endoplasmic Reticulum-associated Degradation(ERAD) Pathway in Degradation of Hepatitis C Virus Envelope Proteins and Production of Virus Particles (2011)
  • 著者名/発表者名: Saeed M, Suzuki R, Watanabe N, Masaki T, Tomonaga M, Muhammad A, Kato T, Matsuura Y, Watanabe H, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 286 ページ: 37264-37273
• [雑誌論文] In vivo adaptation of hepatitis C virus in chimpanzees for efficient virus production and evasion of apoptosis (2011)
  • 著者名/発表者名: Saeed M, Shiina M, Date T, Akazawa D, Watanabe N, Murayama A, Suzuki T, Watanabe H, Hiraga N, Imamura M, Chayama K, Choi Y, Krawczynski K, Liang TJ, Wakita T, Kato T
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 54 ページ: 425-433
• [雑誌論文] Development of recombinant hepatitis C virus with NS5A from strains of genotypes 1 and 2 (2011)
  • 著者名/発表者名: Okamoto Y, Masaki T, Murayama A, Munakata T, Nomoto A, Nakamoto S, Yokosuka O, Watanabe H, Wakita T, Kato T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 410 ページ: 404-409
• [雑誌論文] Studies on virus kinetics using infectious fluorescence-tagged hepatitis C virus cell culture (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto M, Sakamoto N, Nakamura T, Itsui Y, Nakagawa M, Nishimura-Sakurai Y, Kakinuma S, Azuma S, Tsuchiya K, Kato T, Wakita T, Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 41 ページ: 258-269
• [雑誌論文] Endoplasmic Reticulum-associated Degradation (ERAD) Pathway in Degradation of Hepatitis C Virus Envelope Proteins and Production of Virus Particles (2011)
  • 著者名/発表者名: Saeed M., et al
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 286 号: 43 ページ: 37264-37273
  • DOI: 10.1074/jbc.m111.259085
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of Infectious Chimeric Hepatitis C Virus Genotype 2b Harboring Minimal Regions of JFH-1 (2011)
  • 著者名/発表者名: Murayama A., et al
  • 雑誌名: J Virol 巻: 86 号: 4 ページ: 2143-2152
  • DOI: 10.1128/jvi.05386-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biological properties of purified recombinant HCV particles with an epitope-tagged envelope (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahashi H, Akazawa D, Kato T, Date T, Shirakura M, Nakamura N, Mochizuki H, Tanaka-Kaneko K, Sata T, Tan aka Y, Mizokami M, Suzuki T, Wakita T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 395 ページ: 565-571
• [雑誌論文] RNA polymerase activity and specific RNA structure are required for efficient HCV replication in cultured cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Murayama A, Weng L, Date T, Akazawa D, Tian X, Suzuki T, Kato T, Tanaka Y, Mizokami M, Wakita T, Toyoda T
  • 雑誌名: PLoS Pathog 巻: 6
• [雑誌論文] In Vivo Adaptation of Hepatitis C Virus for Efficient Virus Production and Evasion of Apoptosis
  • 著者名/発表者名: Saeed M, Kato T, et al.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: in press
  • 査読あり
• [学会発表] HCV JFH-1株のチンパンジー感染実験で得られた適応変異株の機能解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 加藤孝宣、椎名正明、脇田隆字
  • 学会等名: 第15回日本肝臓学会大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2011-10-20
• [学会発表] Hepatitis C virus JFH-1 strain that adapted in vivo acquired abilities for efficient virus production and anti-apoptosis (2010)
  • 著者名/発表者名: Saeed M, Kato T, et al.
  • 学会等名: The 16th International Symposium on HCV and Related Viruses
  • 発表場所: Yokohama, Japan
  • 年月日: 2010-09-11
• [学会発表] HCVの増殖適応変異とその意義 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加藤孝宣,岡本有加,村山麻子,政木隆博,脇田隆字
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
• [学会発表] C型肝炎ウイルスJFH-1株患者血清のチンパンジーへの感染実験 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加藤孝宣, Saeed Mohsan,脇田隆字
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
• [学会発表] C型肝炎ウイルスの生体内での感染様式と培養細胞での増殖能 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加藤孝宣, 他
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 山形
• [学会発表] In Vitro Behavior of Hepatitis C Virus JFH-1 Strains with Mutations Emerged after Passage in Chimpanzees (2009)
  • 著者名/発表者名: Mohsan Saeed
  • 学会等名: The 16th International Symposium on HCV and Related Viruses
  • 発表場所: Nice(France)
  • 年月日: 2009-10-04
• [学会発表] In vitro behavior of hepatitis C virus JFH-1 strains with mutations emerged after passage in chimpanzees (2009)
  • 著者名/発表者名: Mohsan Saeed, Takanobu Kato, Youkyung Choi, Krzyaztof Krawczynski, Jake Liang, Takaji Wakita
  • 学会等名: 16^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
• [学会発表] Dynamic profile of gene expression in the liver during hepatitis C virus(HCV) JFH1 infection in chimpanzees (2009)
  • 著者名/発表者名: Youkyung Choi, Takanobu Kato, Takaji Wakita, Jake Liang, Krzyaztof Krawczynski
  • 学会等名: 16^<th> International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
• [学会発表] Specific RNA structures and mutations implicated for HCV RNA replication and virus particle formation in cultured cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Asako Murayama, Tomoko Date, Daisuke Akazawa, Takanobu Kato, Tetsuro Suzuki, and Takaji Wakita
  • 学会等名: The Liver Meeting 2009, AASLD's 60th Annual Meeting
  • 発表場所: Boston, MA
• [学会発表] C型肝炎ウイルスの生体内での感染様式と培養細胞での増殖能 (2009)
  • 著者名/発表者名: 加藤孝宣,伊達朋子,脇田隆字
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] C型肝炎ウイルスの複製増殖に関与するウイルス遺伝子領域の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 村山麻子,加藤孝宣,脇田隆字
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] C型肝炎ウイルスの複製増殖に関与するウイルス遺伝子変異および遺伝子構造の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 村山麻子,伊達朋子,赤澤大輔,加藤孝宣,鈴木哲朗,豊田哲也,脇田隆字
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京