精子幹細胞からの精子形成培養法の開発

• 研究課題/領域番号: 21592080
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 泌尿器科学
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 小川 毅彦 横浜市立大学, 医学部, 准教授 (50254222)
• 研究分担者: 湯村 寧 横浜市立大学, 市民総合医療センター, 講師 (30522023)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2011年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2010年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2009年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 精子形成 / 精子幹細胞 / 培養

研究概要

精子形成をin vitroで再現することは非常に困難であり、長い間の課題であった。我々は、気層液層境界面培養法という古典的な器官培養法を用いてマウス精巣組織片を様々な条件下で培養した。その結果血清代替物(KSR)を培養液に加えて精巣組織を培養すると、完全な精子形成がin vitroで進行することを発見した。そこで得られた精子から産仔を取ることにも成功し、また凍結保存した組織でも解凍後に精子形成を誘導できることも見出した。

研究成果

• [雑誌論文] In vitro production of fertile sperm from murine spermatogonial stem cell lines (2011)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Katagiri K, Yokonishi T, Kubota Y, Inoue K, Ogonuki N, Matoba S, Ogura A, Ogawa T
  • 雑誌名: Nat. Commun 巻: 2 ページ: 472-472
• [雑誌論文] In vitro production of functional sperm in cultured neonatal mouse testes (2011)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Katagiri K, Gohbara A, Inoue K, Ogonuki N, Ogura A, Kubota Y, Ogawa T
  • 雑誌名: Nature 巻: 471 ページ: 504-507
• [雑誌論文] In vitro production of fertile sperm from murine spermatogonial stem cell lines (2011)
  • 著者名/発表者名: T. Sato, K. Katagiri, T. Yokonishi, Y. Kubota, K. Inoue, N. Ogonuki, S. Matoba, A. Ogura, T. Ogawa
  • 雑誌名: Nat Commun 巻: 2 号: 1 ページ: 472-472
  • DOI: 10.1038/ncomms1478
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro production of functional sperm in cultured neonatal mouse testes. (2011)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Katagiri K, Gohbara A, Inoue K, Ogonuki N, Ogura A, Kubota Y, Ogawa T
  • 雑誌名: Nature 巻: 471 ページ: 504-507
  • 査読あり
• [雑誌論文] Proliferation of mouse spermatogonial stem cells in microdrop culture (2010)
  • 著者名/発表者名: Araki Y, Sato T, Katagiri K, Kubota Y, Araki Y, Ogawa T
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 巻: 83 ページ: 951-957
• [雑誌論文] In vitro murine spermatogenesis in an organ culture system (2010)
  • 著者名/発表者名: Gohbara A, Katagiri K, Sato T, Kubota Y, Kagechika H, Araki Y, Araki Y, Ogawa T
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 巻: 83 ページ: 261-267
• [雑誌論文] Proliferation of Mouse Spermatogonial Stem Cells in Microdrop Culture. (2010)
  • 著者名/発表者名: Araki Y, Sato T, Katagiri K, Kubota Y, Araki Y, Ogawa T
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 巻: 83 ページ: 951-957
  • 査読あり
• [雑誌論文] In Vitro Murine Spermatogenesis in an Organ Culture System. (2010)
  • 著者名/発表者名: Gohbara A, Katagiri K, Sato T, Kubota Y, Kagechika H, ArakiY, Araki Y, Ogawa T
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 巻: 83 ページ: 261-267
  • 査読あり
• [雑誌論文] 精子幹細胞の培養と精子形成(総説) (2010)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 雑誌名: 日本生殖内分泌学会雑誌 巻: 15 ページ: 13-18
• [雑誌論文] 哺乳類の精子幹細胞のマニピュレーション:医学的な展望や課題を含めて (2010)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 雑誌名: 細胞工学 巻: 29 ページ: 687-692
• [雑誌論文] In Vitro Murine Spermatogenesis in an Organ Culture System (2010)
  • 著者名/発表者名: Gohbara A, Katagiri K, Sato T, Kubota Y, Kagechika H, Araki Y, Araki Y, Ogawa T.
  • 雑誌名: Biology of Reproduction (印刷前電子版)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of Reactive Oxygen Species in Semen on the Pregnancy of Infertile Couples (2009)
  • 著者名/発表者名: Yumura Y, Iwasaki A, Saito K, Ogawa T, Hirokawa M
  • 雑誌名: Int. J. Urology 巻: 16 ページ: 202-207
  • NAID: 10025196423
• [雑誌論文] Effect of Reactive Oxygen Species in Semen on the Pregnancy of Infertile Couples (2009)
  • 著者名/発表者名: Yumura Y, Iwasaki A, Saito K, Ogawa T, Hirokawa M.
  • 雑誌名: Int.J.Urology 16 ページ: 202-207
  • NAID: 10025196423
  • 査読あり
• [学会発表] 器官培養法を用いたin vitro精子形成法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第20回平成不妊研究会(招待講演)
  • 発表場所: 六本木・アカデミーヒルズ(東京都)
  • 年月日: 2012-03-15
• [学会発表] 器官培養法を用いたin vitro精子形成法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第20回平成不妊研究会
  • 発表場所: 六本木・アカデミーヒルズ(東京都)(招待講演)
  • 年月日: 2012-03-15
• [学会発表] 器官培養法を用いたin vitro精子形成法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第26回動物生殖工学研究会(招待講演)
  • 発表場所: 北里大学・北里本館2F大会議室(東京都)
  • 年月日: 2011-12-04
• [学会発表] 器官培養法を用いたin vitro精子形成法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第26回動物生殖工学研究会
  • 発表場所: 北里大学・北里本館2F大会議室(東京都)(招待講演)
  • 年月日: 2011-12-04
• [学会発表] In vitro精子形成法の開発と臨床応用の可能性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第3回生殖補助医療胚培養士セミナー
  • 発表場所: JA共済ビル(東京都)(招待講演)
  • 年月日: 2011-11-13
• [学会発表] 器官培養法を用いた精子形成法の開発と臨床応用の可能性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第2回生殖医療研究会(招待講演)
  • 発表場所: 国際医療福祉大学青山キャンパス(東京都)
  • 年月日: 2011-11-06
• [学会発表] 器官培養法を用いた精子形成法の開発と臨床応用の可能性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第2回生殖医療研究会
  • 発表場所: 国際医療福祉大学青山キャンパス(東京都)(招待講演)
  • 年月日: 2011-11-06
• [学会発表] 器官培養法を用いたin vitro精子形成法の開発と発展 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第89回発生工学・疾患モデル研究会(招待講演)
  • 発表場所: 順天堂大学(東京都)
  • 年月日: 2011-10-26
• [学会発表] 器官培養法を用いたin vitro精子形成法の開発と発展 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第89回発生工学・疾患モデル研究会
  • 発表場所: 順天堂大学(東京都)(招待講演)
  • 年月日: 2011-10-26
• [学会発表] 器官培養法によるin vitro精子形成と臨床応用の可能性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第76回日本泌尿器科学会東部総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
  • 年月日: 2011-10-22
• [学会発表] In vitro spermatogenesis (2011)
  • 著者名/発表者名: Ogawa T
  • 学会等名: 57th Annual meeting of Canadian Fertility and Andrology Society(Invited)
  • 発表場所: Toronto, Canada
  • 年月日: 2011-09-21
• [学会発表] In vitro spermatogenesis (2011)
  • 著者名/発表者名: Ogawa T
  • 学会等名: 57^<th> Annual meeting of Canadian Fertility and Andrology Society
  • 発表場所: Toronto, Canada(Invited)
  • 年月日: 2011-09-21
• [学会発表] マウス精巣の器官培養によるin vitro精子形成シンポジウム「精原幹細胞:基礎から応用まで」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第104回日本繁殖学会(招待講演)
  • 発表場所: いわて県民情報交流センター・アイーナ(岩手県)
  • 年月日: 2011-09-17
• [学会発表] マウス精巣の器官培養によるin vitro精子形成シンポジウム「精原幹細胞:基礎から応用まで」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第104回日本繁殖学会
  • 発表場所: いわて県民情報交流センター・アイーナ(岩手県)(招待講演)
  • 年月日: 2011-09-17
• [学会発表] In vitro production of functional sperm in cultured neonatal mouse testes (2011)
  • 著者名/発表者名: Ogawa T
  • 学会等名: 16th World Congress on In vitro Fertilization & 5th World Congress on In vitro Maturation(Invited)
  • 発表場所: Keio Plaza, Tokyo, Japan
  • 年月日: 2011-09-13
• [学会発表] In vitro production of functional sperm in cultured neonatal mouse testes (2011)
  • 著者名/発表者名: Ogawa T
  • 学会等名: 16^<th> World Congress on In vitro Fertilization & 5^<th> World Congress on In vitro Maturation
  • 発表場所: Keio Plaza, Tokyo, Japan(Invited)
  • 年月日: 2011-09-13
• [学会発表] 器官培養法を用いた新生仔マウス精巣でのin vitro精子産生 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦、佐藤卓也、横西哲広、郷原絢子、河路かおる、窪田吉信
  • 学会等名: 第99回日本泌尿器科学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場
  • 年月日: 2011-04-22
• [学会発表] 器官培養法を用いた新生仔マウス精巣でのin vitro精子産生 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦、佐藤卓也、横西哲広、郷原絢子、河路かおる、窪田吉信
  • 学会等名: 第99回日本泌尿器科学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県)
  • 年月日: 2011-04-22
• [学会発表] In vitro精子形成の進展 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第6回日本生殖再生医学会
  • 発表場所: 東京、シェーンバッハ・サボー
  • 年月日: 2011-03-13
• [学会発表] in vitro精子形成の進展 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第6回 日本生殖再生医学会
  • 発表場所: シェーンバッハ・サボー、東京(招待講演)
  • 年月日: 2011-03-13
• [学会発表] 精子幹細胞の培養とin vitro精子形成の進展/シンポジウム「精子形成研究の新たなるフロンティア:幹細胞から精子の品質まで」 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第55回日本生殖医学会総会
  • 発表場所: 徳島市あわぎんホール
  • 年月日: 2010-11-12
• [学会発表] 精子幹細胞の培養とin vitro精子形成の進展/シンポジウム「精子形成研究のあらたなるフロンティア:幹細胞から精子の品質まで」 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第55回日本生殖医学会総会
  • 発表場所: 徳島市あわぎんホール徳島(招待講演)
  • 年月日: 2010-11-12
• [学会発表] In vitro production of functional sperm in cultured neonatal mouse testes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ogawa T, Sato T, Katagiri K, Kubota Y.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Symposium on Germ Cells
  • 発表場所: New York, USA.
  • 年月日: 2010-10-08
• [学会発表] 培養精子幹細胞(GS細胞)への効率的な遺伝子導入 (2010)
  • 著者名/発表者名: 佐藤卓也, 片桐久美子, 窪田吉信, 小川毅彦
  • 学会等名: 第5回日本生殖再生医学会学術集会
  • 発表場所: 東京・シェーンバッハ・サボー
  • 年月日: 2010-02-21
• [学会発表] 精原幹細胞と精子形成 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第13回 RMB研究会シンポジウム
  • 発表場所: 持田製薬株式会社「ルークホール」
  • 年月日: 2010-01-23
• [学会発表] マウス精子幹細胞のマイクロドロップ培養下での増殖動態 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第41回精子研究会
  • 発表場所: 東京大学 駒場キャンパス 16号館 119-129室
  • 年月日: 2009-12-19
• [学会発表] 「精子幹細胞の培養と精子形成」シンポジウム-生殖臓器由来幹細胞研究の最前線 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第14回日本生殖内分泌学会学術集会
  • 発表場所: 東京・シェーンバッハ・サボー
  • 年月日: 2009-11-28
• [学会発表] 「in vitro にもニッチはあるか?」シンポジウム「配偶子幹細胞制御に関する研究の新展開」 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第86回日本動物学会
  • 発表場所: 静岡グランシップ
  • 年月日: 2009-09-17
• [学会発表] In vitro murine spermatogenesis in an organ culture system (2009)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: European society of human reproduction and embryology meeting
  • 発表場所: Amsterdam Nederland
  • 年月日: 2009-07-01