核内受容体によるMcl-1発現制御が癌細胞増殖・転移に与える影響とそのメカニズム

• 研究課題/領域番号: 21592357
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能系基礎歯科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 和田 孝一郎 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 准教授 (90263467)
• 研究分担者: 上崎 善規 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (40116017)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2011年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2010年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2009年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 核内受容体 / Mcl-1 / 扁平上皮癌 / アノイキス / 浸潤 / PPAR / 増殖 / 転移 / 癌治療 / 生活習慣病 / 癌細胞 / Aquaporin

研究概要

核内受容体によって発現を制御されている遺伝子群を網羅的に解析したところ、癌細胞でMyeloi d cell leukemia-1(Mcl-1)と呼ばれる分子の発現が亢進していた。そこでMcl-1の癌細胞増殖・浸潤における役割について検討したところ、Mcl-1の発現抑制によって癌細胞の増殖・浸潤が抑制された。さらに新たな癌細胞増殖・浸潤関連分子として、アクアポリン3の存在が明らかになった。これらの結果は、Mcl-1などの分子が癌細胞の増殖・浸潤に重要な役割を果たしていることを示したものであり、その成果は多くの外国雑誌や各種学会において報告された。

研究成果

• [雑誌論文] Differential expression of aquaporin 5 and aquaporin 3 in squamous cell carcinoma and adenoid cystic carcinoma (2012)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto S, Wada K, Usami Y, Tanaka N, Aikawa T, Okura M, Nakajima A, Kogo M, Kamisaki Y.
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 巻: 40 ページ: 1011-1019
  • 査読あり
• [雑誌論文] Infection of specific strains of Streptococcus mutans, oral bacteria, confers a risk of ulcerative colitis (2012)
  • 著者名/発表者名: Kojima A, Nakano K, Wada K, Takahashi H, Katayama K, Yoneda M, Higurashi T, Nomura R, Hokamura K, Muranaka Y, Matsuhashi N, Umemura K, Kamisaki Y, Nakajima A, Ooshima T.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 2 号: 1 ページ: 332-332
  • DOI: 10.1038/srep00332
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of a periodontal pathogen, Porphyromonas gingivalis on the pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Yoneda M, Naka S, Nakano K, Wada K, Endo H, Mawatari H, Imajo K, Nomura R, Hokamura K, Ono M, Murata S, Tohnai I, Sumida Y, Shima T, Kuboniwa M, Umemura K, Kamisaki Y, AmanoA, OkanoueT, OoshimaT, Nakajima A.
  • 雑誌名: BMC Gastroenterology 巻: 12 ページ: 16-16
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of endothelin receptor signaling in squamous cell carcinoma (2012)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto S, Wada K, Tanaka N, Yamanishi T, Ishihama K, Aikawa T, Okura M, Nakajima A, Kogo M, Kamisaki Y.
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 巻: 40 ページ: 1011-1019
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of a periodontal pathogen, Porphyromonas gingivalis on the pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Yoneda M, Naka S, Nakano K, Wada K, et.al.
  • 雑誌名: BMC Gastroenterology 巻: 12 ページ: 16-16
  • 査読あり
• [雑誌論文] The collagen-binding protein of Streptococcus mutans is involved in hemorrhagic stroke (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakano K, Hokamura K, Taniguchi N, Wada K, Kudo C, Nomura R, Kojima A, Naka S, Muranaka Y, Thura M, Nakajima A, Masuda K, Nakagawa I, Speziale P, Shimada N, Amano A, Kamisaki Y, Tanaka T, Umemura K, Ooshima T.
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 2 号: 1 ページ: 485-485
  • DOI: 10.1038/ncomms1491
  • 査読あり
• [雑誌論文] Leptin receptor is involved in STAT3 activation in human colorectal adenoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama T, Takahashi H, Sugiyama M, Sakai E, Hosono K, Endo H, Yoneda K, Yoneda M, Inamori M, Nagashima Y, Inayama Y, Wada K, Nakajima A.
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 102 ページ: 367-372
  • NAID: 10029290045
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of aortic aneurysms in cardiovascular disease patients harboring Porphyromonas gingivalis (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakano K, Wada K, Nomura R, Nemoto H, Inaba H, Kojima A, Naka S, Hokamura K, MukaiT, Nakajima A, Umemura K, Kamisaki Y, YoshiokaH, Taniguchi K, Amano A, Ooshima T.
  • 雑誌名: Oral Disease 巻: 17 ページ: 370-378
  • 査読あり
• [雑誌論文] Liver abscess caused by periodontal bacterial infection with Fusobacterium necrophorum (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoneda M, Kato S, Mawatari H, Kirikoshi H, Imajo K, Fujita K, Endo H, Takahashi H, Inamori M, Kobayashi N, Kubota K, Saito S, Tohnai I, Watanuki K, Wada K, Maeda S, Nakajima A.
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 41 ページ: 194-196
  • 査読あり
• [雑誌論文] Distribution of oral streptococci highly resistant toamoxicillin in dental plaque specimens from Japanese children and adolescents (2011)
  • 著者名/発表者名: Nemoto H, Nakano K, Masuda K, Wada K, Ardin AC, Nomura R, Ooshima T.
  • 雑誌名: Journal of Medical Microbiology 巻: 60 ページ: 1853-1859
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular detection of human periodontal pathogens in oral swab specimens from dogs in Japan (2011)
  • 著者名/発表者名: Kato Y, Shirai M, Murakami M, Mizusawa T, Hagimoto A, Wada K, Nomura R, Nakano K, Ooshima T, Asai F.
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Dentistry 巻: 28 ページ: 84-89
  • 査読あり
• [雑誌論文] Leptin acts as a growth factor for colorectal tumours at stages subsequent to tumour initiation in murine colon carcinogenesis (2011)
  • 著者名/発表者名: Endo H, Hosono K, Uchiyama T, Sakai E, Sugiyama M, Takahashi H, Nakajima N, Wada K, Takeda K, Nakagama H, Nakajima A.
  • 雑誌名: Gut 巻: 60 ページ: 1363-1371
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of the long form leptin receptor and of the STAT3 signaling pathway in colorectal cancer progression (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama T, Takahashi H, Endo H, Sugiyama M, Sakai E, Hosono K, Nagashima Y, Inayama Y, Wada K, Hippo Y, Nakajima A.
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 巻: 39 ページ: 935-940
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum nitric oxide metabolite as a biomarker of visceral fat accumulation : clinical significance of measurement for nitrate/ nitrite (2011)
  • 著者名/発表者名: Fujita K, Wada K, Nozaki Y, Yoneda M, Endo H, Takahashi H, Kirikoshi H, Inamori M, Saito S, Nakajima A.
  • 雑誌名: Med. Sci. Monitor 巻: 17
  • 査読あり
• [雑誌論文] Critical role of aquaporin 3 on growth of human esophageal and oral squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Kusayama M, Wada K, Nagata M, Ishimoto S, Takahashi H, Yoneda M, Nakajima A, Okura M, Kogo M, Kamisaki Y.
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 102 ページ: 1128-1136
  • NAID: 10029294222
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of endothelin receptor signaling in squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto S, Wada K, et.al.
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 巻: 40 ページ: 1011-1019
  • DOI: 10.3892/ijo.2011.1258
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum nitric oxide metabolite as a biomarker of visceral fat accumulation : clinical significance of measurement for nitrate/nitrite (2011)
  • 著者名/発表者名: Fujita K, Wada K, et.al.
  • 雑誌名: Medical Science Monitor 巻: 25
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel findings for the development of drug therapy for various liver diseases : Liver microsomal triglyceride transfer protein activator may be a possible therapeutic agent in non-alcoholic steatohepatitis (2011)
  • 著者名/発表者名: Fujita K, Imajo K, Shinohara Y, Nozaki Y, Wada K, et.al.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 巻: 115 ページ: 270-273
  • NAID: 10029892362
  • 査読あり
• [雑誌論文] Leptin receptor is involved in STAT3 activation in human colorectaladenoma. (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama T, Wada K, et al.
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 102 ページ: 367-372
  • 査読あり
• [雑誌論文] Liver abscess caused by periodontal bacterial infection with Fusobacterium necrophorum. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoneda M, Kato S, Mawatari H, Kirikoshi H, Fujita K, Wada K.
  • 雑誌名: Hepatol.Res. 巻: 41 ページ: 194-196
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular analysis of aortic intimal hyperplasia caused by Porphyromonas gingivalis infection in mice with endothelial damage (2010)
  • 著者名/発表者名: Hokamura K, Inaba H, Nakano K, Nomura R, Yoshioka H, Taniguchi K, Ooshima T, Wada K, Amano A, Umemura K.
  • 雑誌名: Journal of Periodontal Research 巻: 45 ページ: 337-344
  • 査読あり
• [雑誌論文] cis9, trans11-conjugated linoleic acid differentiates mouse 3T3-L1 preadipocytes into mature small adipocytes through induction of peroxisome proliferator-activated receptor gamma (2010)
  • 著者名/発表者名: Sakuma S, Nishioka Y, Imanishi R, Nishikawa K, Sakamoto H, Fujisawa J, Wada, K, Kamisaki Y, Fujimoto Y.
  • 雑誌名: Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition 巻: 47 ページ: 167-173
  • NAID: 130004879208
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular dissection of Porphyromonas gingivalis-related arteriosclerosis : a novel mechanism of vascular disease. (2010)
  • 著者名/発表者名: Wada K, Kamisaki Y.
  • 雑誌名: Periodontology 2000 巻: 54 ページ: 222-234
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of oral bacteria in cardiovascular diseases : Involvement of P.gingivalis on the development of human aortic aneurysm. (2010)
  • 著者名/発表者名: Wada K, Kamisaki Y.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 巻: 113 ページ: 115-119
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of oral bacteria in cardiovascular diseases-from molecular mechanisms to clinical cases : Preface. (2010)
  • 著者名/発表者名: Umemura K, Wada K.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 巻: 113 ページ: 101-102
  • NAID: 10027745258
  • 査読あり
• [雑誌論文] cis9, trans11-Conjugated Linoleic Acid Differentiates Mouse 3T3-L1 Preadipocytes into Mature Small Adipocytes through Induction of Peroxisome Proliferator-activated Receptor γ (2010)
  • 著者名/発表者名: Sakuma S, Nishioka Y, Imanishi R, Nishikawa K, Sakamoto H, Wada K, Kamisaki Y, Fujimoto Y
  • 雑誌名: J.Clin.Biochem.Nutr. 巻: 47 ページ: 167-173
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular analysis of aortic intimal hyperplasia caused by Porphyromon as gingivalis infection in mice with endothelial damage. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hokamura K, Inaba H, Nakano K, Ooshima T, Wada K, et al.
  • 雑誌名: J.Periodontal.Res. 巻: 45 ページ: 337-344
  • 査読あり
• [雑誌論文] 歯周病と循環器疾患 (2010)
  • 著者名/発表者名: 和田孝一郎
  • 雑誌名: 日本薬理学雑誌 巻: 135 ページ: 220-220
  • NAID: 10026439470
• [雑誌論文] PPARγアゴニストの抗炎症作用 : 基礎・臨床研究の最新動向 (2010)
  • 著者名/発表者名: 和田孝一郎, 上崎善規
  • 雑誌名: 日本臨床 68 ページ: 278-283
• [雑誌論文] Involvement of JNK pathway in the promotion of the early stage of colorectal carcinogenesis under high-fat dietary condition (2009)
  • 著者名/発表者名: Endo H, Hosono K, Fujisawa T, Takahashi H, Sugiyama M, Yoneda K, Nozaki Y, Fujita K, Yoneda M, Inamori M, Wada K, Nakagama H, Nakajima A.
  • 雑誌名: Gut 巻: 58 ページ: 1637-16431
• [雑誌論文] Influence of iNOS polymorphisms in Japanese patients with nonalcoholic fatty liver disease (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoneda M, Hotta K, Nozaki Y, Endo H, Tomeno W, Watanabe S, Hosono K, Mawatari H, Iida H, Fujita K, Takahashi H, Kirikoshi H, Kobayashi H, Inamori M, Kubota K, Shimamura T, Saito S, Maeyama S, Wada K, Nakajima A.
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 39 ページ: 963-971
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association between angiotensin II type1receptor polymorphisms and the occurrence of nonalcoholic fatty liver disease. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoneda M, Hotta K, Nozaki Y, Endo H, Uchiyama T, Mawatari H, Iida H, Kato S, Fujita K, Takahashi H, Kirikoshi H, Kobayashi N, Inamori M, Abe Y, Kubota K, Saito S, Maeyama S, Wada K, Nakajima A.
  • 雑誌名: Liver International 巻: 29 ページ: 1078-1085
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of myeloid cell leukemia-1 on cell growth of squamous cell carcinoma (2009)
  • 著者名/発表者名: Nagata M, Wada K, Nakajima A, Kusayama M, MasudaT, IidaS, OkuraM, KogoM, Kamisaki Y.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 巻: 110 ページ: 344-353
  • NAID: 10025737800
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of myeloid cell leukemia-1 in cell growth of squamous cell carcinoma (2009)
  • 著者名/発表者名: Nagata M, Wada K, Nakajima A, Nakajima N, Kusayama M, Masuda T, et al.
  • 雑誌名: J.Pharmacol. Sci. 110 ページ: 344-353
  • NAID: 10025737800
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dysfunctional VLDL synthesis and release is a key factor in non-alcoholic steatohepatitis (NASH) pathogenesis (2009)
  • 著者名/発表者名: Fujita K, Nozaki Y, Wada K, Yoneda M, Fujimoto Y, et al.
  • 雑誌名: Hepatology 50 ページ: 772-780
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of JNK pathway in the promotion of the early stage of colorectal carcinogenesis under high-fat dietary condition (2009)
  • 著者名/発表者名: Endo H, Hosono K, Fujisawa T, Yoneda M, Wada K, et al.
  • 雑誌名: Gut 58 ページ: 1637-1643
  • 査読あり
• [学会発表] 非アルコール性脂肪肝発症のリスクファクターとしての歯周病菌 (2012)
  • 著者名/発表者名: 和田孝一郎、上崎善規、米田正人、中島淳
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 口腔癌におけるAquaporin 5とAquaporin 3の発現と役割 (2012)
  • 著者名/発表者名: 石本俊介、和田孝一郎、大倉正也、古郷幹彦、上崎善規
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 高病原性Streptococcus mutansは炎症性腸炎を悪化させる (2012)
  • 著者名/発表者名: 小島あゆち、和田孝一郎、仲野和彦、大嶋隆、梅村和夫、中島淳、上崎善規
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Periodontal pathogen, Porphyromonous gingivalis is a potential risk factor for nonalcoholic fatty liver disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Wada K, et.al.
  • 学会等名: The 85^<th> Annual Meeting of Journal of Pharmacological society
  • 発表場所: Kyoto Japan
• [学会発表] 扁平上皮癌におけるAQP5受容体シグナルの役割 (2011)
  • 著者名/発表者名: 石本俊介、和田孝一郎, 他
  • 学会等名: 第119回日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-07-08
• [学会発表] Role of oral bacteria in cardiovascular diseases-Involvement of Porphyromonous gingivalis in arteriosclerosis (2011)
  • 著者名/発表者名: Kamisaki Y, Wada K, et. al.
  • 学会等名: 2^<nd> Inetrnational conference of Inflammation and Translational medicine
  • 発表場所: Shanghai
• [学会発表] Role of endothelin receptor signaling on proliferation of squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto S, Wada K, et. al.
  • 学会等名: The 6^<th> International Symposium on Receptor Mechanisms, Signal Transduction and Drag Effects
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] Role of endothelin reseptor signaling in squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto S, Wada K, et al.
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] High-virulent Streptococcus mutans aggravates inflammation in DSS-induced colitis mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Kojima A, Wada K, et al.
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Role of endothelin receptor signaling on proliferation of squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto S, Wada K, et.al.
  • 学会等名: The 6^<th> International Symposium on Receptor Mechanisms, Signal Transduction and Drag Effects
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Role of oral bacteria in cardiovascular diseases---Involvement of Porphyromonous gingivalis in arteriosclerosis (2011)
  • 著者名/発表者名: Kamisaki Y, Wada K, et.al.
  • 学会等名: 2^<nd> Inetrnational conference of Inflammation and Translational medicine
  • 発表場所: Shanghai(招待講演)
• [学会発表] Role of endothelin receptor signaling in squamous cell carcinoma. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto S, Wada K, et al.
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] High-virulent Streptococcus mutans aggravates inflammation in DSS-induced colitis mice. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kojima A, Wada K, et al.
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] 扁平上皮癌におけるエンドセリン受容体シグナルの役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 石本俊介、和田孝一郎, 他
  • 学会等名: 第118回日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2010-11-19
• [学会発表] 扁平上皮癌におけるエンドセリン受容体シグナルの役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 石本俊介、和田孝一郎, ら
  • 学会等名: 第118回 日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 大阪・千里中央
  • 年月日: 2010-11-19
• [学会発表] 口腔扁平上皮癌における細胞接着分子ギセリンの発現と役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小浜恵子、和田孝一郎, 他
  • 学会等名: 第117回日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2010-07-08
• [学会発表] 口腔扁平上皮ガンにおける細胞接着分子キゼリン/CD146の発現と役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小浜恵子、和国孝一郎、平英一、上崎善規
  • 学会等名: 第117回 日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2010-07-08
• [学会発表] 非アルコール性脂肪肝炎発症のリスクファクターとしての口腔細菌 (2010)
  • 著者名/発表者名: 和田孝一郎, 他
  • 学会等名: 第31回日本臨床薬理学会年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] ロイコトリエンB4はヒト脂肪細胞分化を制御する (2010)
  • 著者名/発表者名: 平田佳永、和田孝一郎, 他
  • 学会等名: 第52回歯科基礎医学会学術大会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Bacteremia by virulent oral bacteria is a potent risk factor for stroke under endothelial cell injury condition (2010)
  • 著者名/発表者名: Wada K, Kamisaki Y.
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Role of Aquaporin-3 on squamous cell carcinoma (2010)
  • 著者名/発表者名: Kusayama M, Wada K, et al.
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] RLeukotriene B4 is a regulatory signal for human adipocyte differentiation (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirata K, Wada K, et al.
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] ロイコトリエンB4はヒト脂肪細胞分化を制御する (2010)
  • 著者名/発表者名: 平田佳永、和田孝一郎, ら
  • 学会等名: 第52回 歯科基礎医学会学術大会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Bacteremia by virulent oral bacteria is a potent risk factor stroke under endothelial cell injury condition (2010)
  • 著者名/発表者名: Wada K, Kamisaki Y
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Role of Aquaporin-3 squamous cell carcinoma (2010)
  • 著者名/発表者名: Kusayama M, Wada K, Okura M, Kogo M, Kamisaki Y
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Leukotrien B4 is a regulatory signal for human adipocytes differentiation (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirata K, Wada K, Takada K, Kamisaki Y
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪
• [産業財産権] 高病原性口腔細菌による腸炎誘発原因分子の産生とその高感度検出法 (2010)
  • 発明者名: 梅村和夫、外村和也、仲野和彦、大嶋隆、野村良太、和田孝一郎
  • 権利者名: 国立大学法人浜松医科大学・国立大学法人大阪大学
  • 出願年月日: 2010-03-10