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出芽酵母全ノックアウト株の寿命測定と新規寿命遺伝子の探索

研究課題

研究課題/領域番号 21651083
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 基礎ゲノム科学
研究機関長浜バイオ大学

研究代表者

向 由起夫  長浜バイオ大学, バイオサイエンス学部, 准教授 (60252615)

研究期間 (年度) 2009 – 2010
研究課題ステータス 完了 (2010年度)
配分額 *注記
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
2010年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
2009年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
キーワード寿命 / 酵母 / 老化 / ノックアウト株 / ゲノム機能
研究概要

寿命は生物種によってほぼ一定であり、老化は遺伝的にプログラミングされている。本研究の目的は、真核モデル生物である出芽酵母Saccharomyces cerevisiaeの分裂寿命を決める遺伝子を網羅的に同定することにより、真核生物の寿命制御メカニズムを解明することである。出芽酵母の分裂寿命は一つの細胞が死ぬまでに産む細胞を数えることにより決める。従来の測定法では、生育可能な約4,800株の酵母ノックアウト(KO)株の分裂寿命を測定するために多大な労力と時間を要する。そこで、増殖を指標とする分裂寿命アッセイ系を利用して、大規模かつ簡便に分裂寿命を測定することにより、寿命に関わる遺伝子を網羅的に同定することを計画した。以下のような研究成果を得た。
1. 母細胞だけが増殖する分裂寿命アッセイ酵母株を構築した。
2. 上のアッセイ系を151株のKO株(65個の転写因子、63個のタンパク質リン酸化酵素、23個のタンパク質脱リン酸化酵素)に導入し、増殖が顕著に悪くなる3株(sko1、not3、kin3)を同定した。従来の方法により、sko1とnot3KO株の分裂寿命が短かいことを確認した。Sko1pとNot3pは転写因子であり、これらが分裂寿命を制御することは初めての知見である。
3. 本アッセイ系のKO株への導入効率を94%まで向上させた。現在、残りのKO株について増殖を測定し、分裂寿命制御遺伝子の同定作業を継続している。
4. 転写因子が制御する標的遺伝子の中から分裂寿命に関わる遺伝子を探索するモデル実験を行った。転写因子Uga3pの標的遺伝子の中からGABA代謝酵素遺伝子UGA1が分裂寿命を制御することを初めて見つけた。メタボローム解析から、uga1KO株が長寿命である理由が発酵から呼吸への代謝シフトであることを明らかにした。

報告書

(2件)
  • 2010 実績報告書
  • 2009 実績報告書
  • 研究成果

    (2件)

すべて 2011 2010

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] GABA metabolism pathway genes, UGA1 and GAD 1, regulate replicative lifespan in Saccharomyces cerevisiae2011

    • 著者名/発表者名
      Yuka Kamei
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 407 ページ: 185-190

    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 出芽酵母のγ・アミノ酪酸(GABA)代謝酵素遺伝子UGA1とGAD1は分裂寿命を制御する2010

    • 著者名/発表者名
      亀井優香
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      ポートピアホテル(兵庫県)
    • 年月日
      2010-12-09
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書

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公開日: 2009-04-01   更新日: 2016-04-21  

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