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乳汁に含まれる膜小胞含有RNAの生物学的機能の解明

研究課題

研究課題/領域番号 21658117
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 応用分子細胞生物学
研究機関三重大学

研究代表者

青木 直人  三重大学, 大学院・生物資源学研究科, 准教授 (40242846)

研究期間 (年度) 2009 – 2010
研究課題ステータス 完了 (2010年度)
配分額 *注記
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
2010年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2009年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
キーワード乳汁 / 乳腺 / 膜小胞 / RNA / microRNA
研究概要

マンモソームを介した細胞間での遺伝子のやり取りの可能性を探るために,ウシマンモソームを培養下のNIH-3T3繊維芽細胞に添加して一定期間インキュベートした。細胞を十分洗浄後,RNAを抽出し,乳汁関連遺伝子(αs1-casein,αs2-casein,β-casein,β-lactoglobulin)に対する特異プライマーを用いてRT-PCRを実施した。調べたいずれのRNAも増幅されたことから,マンモソームを介して細胞への遺伝子移入の可能性が強く示唆された。また消化管内での取り込みを想定し,乳汁を酸性条件下で一定期間インキュベートした後,超遠心分離法によりマンモソームを調製し,引き続いてRNAを調製したところ,未処理サンプルと同程度のRNAが抽出された。さらに含まれるmRNA(αs1-casein,β-casein,β-lactoglobulin)およびmiRNA(miR-93,miR-101,miR-150)量をリアルタイム定量RT-PCR法あるいは半定量的RT-PCR法により測定したところ,酸処理と未処理群間で有意な差が認められなかったことから,マンモソームは腸管内でも比較的安定に存在出来る可能性が強く示唆された。
またマンモソームに内包されるmRNAのうちαs1-casein,β-caseinはin vitroで翻訳されることも併せて明らかとなった。さらに予備的実験ながら,MFG-E8ノックアウトマウスの乳汁には野生型マウスと同程度のマンモソームRNAが含まれることも明らかとなった。

報告書

(2件)
  • 2010 実績報告書
  • 2009 実績報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2010

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Isolation of bovine milk-derived microvesicles carrying mRNAs and microRNAs2010

    • 著者名/発表者名
      Hata, T., Murakami, K., Nakatani, H., Yamamoto, Y., Matsuda, T., Aoki, N.
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 396 ページ: 528-533

    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Establishment of a mammary stromal fibroblastic cell line for in vitro studies in mice of mammary adipocyte differentiation2010

    • 著者名/発表者名
      Nakatani, H., Aoki, N., Okajima, T., Nadano, D., Flint, D., Matsuda, T.
    • 雑誌名

      Biology of Reproduction 82

      ページ: 44-53

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 分泌性膜小胞の驚くべき機能 : 新たな細胞間コミュニケーションツールの可能性2010

    • 著者名/発表者名
      青木直人, 田中千絵, 秦健敏
    • 雑誌名

      化学と生物 48

      ページ: 107-113

    • NAID

      10026437611

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] ウシ乳汁にはRNAを内包する膜小胞が存在し, RNA輸送媒体として機能しうる2010

    • 著者名/発表者名
      長崎はるか, 秦健敏, 村上耕介, 中谷肇, 山本泰也, 松田幹, 青木直人
    • 学会等名
      日本農芸化学会中部支部例会
    • 発表場所
      名古屋大学(名古屋市)
    • 年月日
      2010-10-30
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
  • [学会発表] ウシ乳汁にはRNAを含む膜小胞が存在する2010

    • 著者名/発表者名
      秦健敏, 長崎はるか, 村上耕介, 中谷肇, 山本泰也, 松田幹, 青木直人
    • 学会等名
      日本酪農科学シンポジウム
    • 発表場所
      共立女子大学(東京都)
    • 年月日
      2010-08-20
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書

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公開日: 2009-04-01   更新日: 2016-04-21  

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