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下垂体ゴナドトロピン産生細胞および腫瘍における可塑的機能分化

研究課題

研究課題/領域番号 21659090
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 人体病理学
研究機関東海大学

研究代表者

井野元 智恵 (2010)  東海大学, 医学部, 助教 (20459423)

長村 義之 (2009)  東海大学, 医学部, 教授 (10100992)

研究分担者 竹腰 進  東海大学, 医学部, 准教授 (70216878)
井野元 智恵  東海大学, 医学部, 助教 (20459423)
研究期間 (年度) 2009 – 2010
研究課題ステータス 完了 (2010年度)
配分額 *注記
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2010年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
2009年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
キーワードFSHβ / LHβ / DNAメチル化 / CpG / 転写因子 / 下垂体 / エピジェネティクス / LH / ゴナドトロフ
研究概要

「LHβ遺伝子にはFSHβ遺伝子と比較してDNAメチル化の影響を受けやすい原因があり、腫瘍化に伴うDNAメチル基転移酵素(DNMT)群の高発現によって転写抑制が起こる」という作業仮説を立て、CpGメチル化解析法であるメチル化特異的PCR(MSP)法および、バイサルファイトシーケンス法の2種類の方法を用いてLHβ・FSHβ遺伝子上流500bp中に存在するCpGのメチル化解析を行い、この仮説証明を試みた。1. MSP法によるCpGメチル化解析: LHβプロモーター領域に対して3組のプライマーを用いてMSP法を行った。LHβ転写開始点に近いMSP-LH1プライマー(LH CpG1, 2, 4, 5)、MSP-LH2プライマー(LH CpG 1, 2, 7, 8)、最もLHβ転写開始点より遠いMSP-LH3プライマー(LH CpG 9, 10, 12, 13)のいずれにおいても非メチル化は見られなかった。2. バイサルファイトシーケンス法によるCpGメチル化解析:シーケンス解析は、シーケンサーにより自動判別された配列をもとに行い、自動判別不能部位については解析データをSequence Scanner Version 1.0(Applied Biosystems社)を用いて表示・拡大し読み取ったものを使用した。転写因子Egr-1結合部位と重なるLH-CpG3, 4, 5はメチル化の比率が高い傾向にあり、これらのメチル化状態とLHβ発現には関係がないように考えられた。その他のCpGにおいてもメチル化・非メチルの混在が見られたが、転写開始領域に非常に近いLH-CpG1,2がメチル化・非メチル化の混在であった場合にLHβの発現がみられる傾向にあった。FSH-CpG1では比較的メチル化されている割合が低かった。以上の結果から、LH-CpG1, 2のDNAメチル化がLHβ遺伝子発現に重要な役割を果たしていることが強く示唆された。

報告書

(2件)
  • 2010 実績報告書
  • 2009 実績報告書
  • 研究成果

    (3件)

すべて 2009

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] The Expression of Wnt4 Is Regulated by Estrogen via an Estrogen Receptor Alpha-dependent Pathway in Rat Pituitary Growth Hormone-producing Cells2009

    • 著者名/発表者名
      Miyakoshi T, Osamura RY, et al.
    • 雑誌名

      Acta Histochemistry and Cytochemistry 42

      ページ: 205-213

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Pathology, pathogenesis and therapy of growth hormone (GH)-producing pituitary adenomas : technical advances in histochemistry and their2009

    • 著者名/発表者名
      Osamura RY, et al.
    • 雑誌名

      Acta Histochemistry and Cytochemistry 29

      ページ: 94-105

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] ラット下垂体におけるWnt4の制御機構2009

    • 著者名/発表者名
      宮腰隆史、長村義之, 他
    • 学会等名
      第82回日本内分泌学会学術総会
    • 発表場所
      群馬県民会館/前橋商工会議所(群馬県前橋市)
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書

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公開日: 2009-04-01   更新日: 2016-04-21  

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