培養細胞及び個体レベルにおけるオーキシン誘導デグロン法基盤技術の開発

• 研究課題/領域番号: 21681027
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用ゲノム科学
• 研究機関: 国立遺伝学研究所 (2010-2012); 大阪大学 (2009)
• 研究代表者: 鐘巻 将人 国立遺伝学研究所, 新分野創造センター, 准教授 (20444507)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 25,610千円 (直接経費: 19,700千円、間接経費: 5,910千円); 2012年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2011年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2010年度: 6,760千円 (直接経費: 5,200千円、間接経費: 1,560千円); 2009年度: 9,750千円 (直接経費: 7,500千円、間接経費: 2,250千円)
• キーワード: 条件特異的変異株 / 条件特異的変異体 / タンパク質分解 / 植物ホルモン

研究概要

本助成により、植物ホルモンオーキシンが植物内で引き起こす分解システムを、異種真核生物に移植することに成功した。これにより、非植物細胞において標的タンパク質をオーキシン依存的に分解除去することが可能になり、私たちは本手法をオーキシン誘導デグロン(AID)法と命名した。私たちは本手法が出芽酵母、分裂酵母、ニワトリDT40細胞、マウスおよびヒト培養細胞で機能することを確認し、その成果を論文公表した。さらに、本手法を利用して、出芽酵母内の因子の機能解析に応用し、その成果を論文公表した。また、改良版AID 法を開発することに成功し、特許申請を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Frontiers of Protein Expression Control with Conditional Degrons (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanemaki MT
  • 雑誌名: Pflugers Archive - European Journal of Physiology 巻: 465 ページ: 419-425
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Elg1 Replication Factor C-like Complex Functions in PCNA Unloading during DNA Replication (2013)
  • 著者名/発表者名: Kubota T, Nishimura K, Kanemaki MT, Donaldson AD.
  • 雑誌名: Molecular Cell 巻: 50 号: 2 ページ: 273-280
  • DOI: 10.1016/j.molcel.2013.02.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Frontiers of protein expression control with conditional degrons (2013)
  • 著者名/発表者名: Kanemaki MT.
  • 雑誌名: Pflugers Archive - European Journal of Physiology 巻: 465 号: 3 ページ: 419-425
  • DOI: 10.1007/s00424-012-1203-y
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mcm8 and Mcm9 Form a Complex that Functions in Homologous Recombination Repair Induced by DNA Interstrand Crosslinksl (2012)
  • 著者名/発表者名: Nishimura K, Ishiai M, Horikawa K, Fukagawa T, Takata M, Takisawa H, Kanemaki MT
  • 雑誌名: Molecular Cell 巻: 47 ページ: 511-522
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mcm10 Plays a Role in Functioning of the Eukaryotic Replicative DNA Helicase, (2012)
  • 著者名/発表者名: Watase G, Takisawa H, Kanemaki MT
  • 雑誌名: Cdc45-Mcm-GINS Current Biology 巻: 22 ページ: 343-349
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mcm8 and Mcm9 form a complex that functions in homologous recombination induced by interstrand crosslinks (2012)
  • 著者名/発表者名: K. Nishimura
  • 雑誌名: Molecular Cell 巻: 47 号: 4 ページ: 511-522
  • DOI: 10.1016/j.molcel.2012.05.047
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mcm10 Plays a Role in Functioning of the Eukaryotic Replicative DNA Helicase, Cdc45-Mcm-GINS (2012)
  • 著者名/発表者名: Watase G, Takisawa H, Kanemaki M
  • 雑誌名: Current Biology 巻: 22 ページ: 343-349
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Inheritance of Histone Modifications Depends upon the Location in the Chromosome in Saccharomyces cerevisiae (2011)
  • 著者名/発表者名: Masumoto H, Nakato R, Kanemaki M, Shirahige K, Hachinohe M
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 6(12)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sld7, an Sld3-associated protein required for efficient chromosomal DNA replication in budding yeast (2011)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Umemori T, Endo S, Muramatsu S, Kanemaki M, Kamimura Y, Obuse C, Araki H
  • 雑誌名: EMBO Journal 巻: 30 ページ: 30-30
  • 査読あり
• [雑誌論文] Auxin-inducible protein depletion system in fission yeast (2011)
  • 著者名/発表者名: Kanke M, Nishimura K, Kanemaki M, Kakimoto T, Takahashi TS, Nakagawa T, Masukata H.
  • 雑誌名: BMC Cell Biology 巻: 12(1) ページ: 8-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Inheritance of Histone Modifications Depends upon the Location in the Chromosome in Saccbaromyces cerevisiae (2011)
  • 著者名/発表者名: Masumoto H, Nakato R, Kanemaki M, Shirahige K, Hachinohe M
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Auxin-inducible protein depletion system in fission yeast (2011)
  • 著者名/発表者名: Kanke, et al.
  • 雑誌名: BMC Cell Biology 巻: 12 ページ: 8-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Condensins promote chromosome recoiling during early anaphase to complete sister chromatid separation (2010)
  • 著者名/発表者名: Renshaw MJ, Ward JJ, Kanemaki M, Natsume K, Nedelec FJ, Tanaka TU
  • 雑誌名: Developmental Cell 巻: 19 ページ: 232-44
  • 査読あり
• [雑誌論文] Condensins promote chromosome recoiling during early anaphase to complete sister chromatid separation (2010)
  • 著者名/発表者名: Renshaw, et al.
  • 雑誌名: Developmental Cell 巻: 19 ページ: 232-244
  • 査読あり
• [雑誌論文] 動物の培養細胞における迅速なタンパク質発現制御法(AID法) (2010)
  • 著者名/発表者名: 西村浩平, 鐘巻将人
  • 雑誌名: 実験医学 巻: 28 ページ: 2279-2284
• [雑誌論文] An auxin-based degron system for the rapid depletion of proteins in non-plant cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishimura K, Fukagawa T, Takisawa H, Kakimoto T, Kanemaki M
  • 雑誌名: Nature Methods 巻: 6 ページ: 917-22
  • 査読あり
• [雑誌論文] An auxin-based dgeron system for the rapid depletion of proteins in nonplamt cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, K., Fukagawa, T., Takisawa, H., Kakimoto, T., Kanemaki, M.
  • 雑誌名: Nature Methods 6 ページ: 917-922
  • 査読あり
• [学会発表] Mcm8 and Mcm9 form a novel complex that functions in HR repair induced by DNA interstrand crosslinks (2012)
  • 著者名/発表者名: 鐘巻 将人
  • 学会等名: 染色体ワークショップ,
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2012-01-26
• [学会発表] Mcm8 and Mcm9 form a complex that functions in homologous recombination repair induced by DNA interstrand crosslinks (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanemaki, M
  • 学会等名: The 8th 3R symposium,
  • 発表場所: Awaji island, Japan
• [学会発表] Mcm8 and Mcm9 Form a Complex that Functions in Homologous Recombination Repair Induced by DNA Interstrand Crosslinks (2012)
  • 著者名/発表者名: Nishimura K., Ishiai M., Fukagawa T., Takata M., Takisawa H. and Kanemaki M.
  • 学会等名: 24th Annual Fanconi Anemia Research Fund Scientific Symposium
  • 発表場所: Denver, USA,
• [学会発表] Mcm8 and Mcm9 Form a Complex that Functions in Homologous Recombination Repair Induced by DNA Interstrand Crosslinks (2012)
  • 著者名/発表者名: Nishimura K., Ishiai M., Fukagawa T., Takata M., Takisawa H. and Kanemaki M.
  • 学会等名: 24th Annual Fanconi Anemia Research Fund Scientific Symposium
  • 発表場所: Denver, USA
• [学会発表] Mcm8 and Mcm9 form a complex that functions in homologous recombination repair induced by DNA interstrand crosslinks (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanemaki, M.
  • 学会等名: The 8th 3R symposium
  • 発表場所: Awaji Island, Japan
• [学会発表] MCM8 and MCM9 form a novel complex involved in resistance to DNA crosslinking regents (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishimura K., Ishiai M., Fukagawa T., Takata M., Takisawa H., Kanemaki M.
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2011-12-15
• [学会発表] Mcm10 is required for origin unwinding in S.cerevisiae (2011)
  • 著者名/発表者名: Watase G, Takisawa H, Kanemaki M
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2011-12-15
• [学会発表] MCM8 and MCM9 form a novel complex involved in resistance to DNA crosslinking regents Cold Spring Harbor Meeting on Eukaryotic DNA Replication & Genome Maintenance (2011)
  • 著者名/発表者名: Kanemaki M.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor
  • 発表場所: USA
  • 年月日: 2011-09-07
• [学会発表] MCM8 and MCM9 form a novel complex involved in resistance to DNA crosslinking regents (2011)
  • 著者名/発表者名: Kanemaki M.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Meeting on Eukaryotic DNA Replication & Genome Maintenance
  • 発表場所: Cold Spring Harbor Laboratory, NY, USA
  • 年月日: 2011-09-07
• [学会発表] 染色体複製因子MCM10の出芽酵母における新たな機能 (2010)
  • 著者名/発表者名: 渡瀬成治, et al.
  • 学会等名: BMB2010 日本分子生物学会/日本生化学会合同年会
  • 発表場所: 神戸国際展示場
  • 年月日: 2010-12-08
• [学会発表] An auxin based degron system to the new genetics of animal cells International Symposium on Cell Function mediated (2010)
  • 著者名/発表者名: K. Nishimura and M. Kanemaki
  • 学会等名: Small Molecules
  • 発表場所: 筑波大学
  • 年月日: 2010-11-08
• [学会発表] An auxin based degron system to the new genetics of animal cells (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Nishimura, M.Kanemaki
  • 学会等名: International Symposium on Cell Function mediated by Small Molecules
  • 発表場所: 筑波大学 総合研究棟D
  • 年月日: 2010-11-08
• [学会発表] 合成生物学的アイデアに基づいた植物ホルモン誘導デグロン法によりタンパク質発現調節 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鐘巻将人
  • 学会等名: 第19回酵母合同シンポジウム
  • 発表場所: 東京大学
  • 年月日: 2010-06-25
• [学会発表] 合成生物学的アイデアに基づいた植物ホルモン誘導デグロン法によりタンパク質発現調節 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鐘巻将人
  • 学会等名: 第19回酵母合同シンポジウム
  • 発表場所: 東京大学 弥生講堂
  • 年月日: 2010-06-25
• [学会発表] AID法を用いた出芽酵母および動物細胞内における染色体制御因子の遺伝学的解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鐘巻 将人、西村浩平、渡瀬成治、深川竜郎、滝澤温彦
  • 学会等名: 染色体ワークショップ
  • 発表場所: 箱根
  • 年月日: 2010-01-20
• [学会発表] AID法を用いた出芽酵母および動物細胞内における染色体制御因子の遺伝学的解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鐘巻将人、西村浩平、渡瀬成治、深川竜郎、滝澤温彦
  • 学会等名: 第27回染色体ワークショップ
  • 発表場所: 御殿場高原時之栖(静岡)
  • 年月日: 2010-01-20
• [学会発表] 植物ホルモンオーキシン依存的タンパク質分解を応用した迅速なタンパク質除去法による出芽酵母と動物細胞コンディショナル変化部の作成 (2009)
  • 著者名/発表者名: 西村浩平, 深川竜郎, 柿本辰男, 滝澤温彦, 鐘巻将人
  • 学会等名: 日本分子生物学会 第32回年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2009-12-12
• [学会発表] 出芽酵母における新たなコンディショナル変異株を用いた、複製因子Mcm10の機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 渡瀬成治, 滝澤温彦, 鐘巻将人
  • 学会等名: 日本分子生物学会 第32回年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2009-12-11
• [学会発表] ヒストンシャペロンEACTは複製伸長反応において複製フォークの安定化に関わる (2009)
  • 著者名/発表者名: 中村淳児, Richard Jones, 久保田弓子, 室伏壙, 滝澤温彦, 鐘巻将人
  • 学会等名: 日本分子生物学会 第32回年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] Exploring factors involving maintenance and restart of the stalled forks by using a novel method to induce rapid degradation in budding yeast Clod Spring Harbor Symposium on Eukaryotic DNA Replication and Genome Maintenance (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, K., Takisawa, H., Kakimoto,T. and Kanemaki, M
  • 学会等名: Cold Spring Harbor
  • 発表場所: USA
  • 年月日: 2009-09-03
• [学会発表] Exploring factors involving maintenance and restart of the stalled forks by using a novel method to induce rapid degradation in budding yeast (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, K., Takisawa, H., Kakimoto, T., Kanemaki, M.
  • 学会等名: Clod Spring Harbor Symposium on Eukaryotic DNA Replication and Genome Maintenance
  • 発表場所: Cold Spring Harbor Laboratory, NY, USA
  • 年月日: 2009-09-03
• [図書] ケミカルバイオロジー 成功事例から学ぶ研究戦略 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鐘巻将人
  • 出版者: 丸善出版
• [図書] Mcm8とMcm9は複合体を形成しDNA二本鎖間架橋のひき起こす相同組換え修復において機能する (2013)
  • 著者名/発表者名: 西村浩平, 鐘巻将人
  • 出版者: First Author's
• [図書] 成功事例から学ぶ研究戦略 (2012)
  • 著者名/発表者名: 鐘巻将人
  • 出版者: ケミカルバイオロジー
• [図書] Mcm8とMcm9は複合体を形成しDNA二本鎖間架橋の引き起こす相同組換え修復において機能する (2012)
  • 著者名/発表者名: 西村浩平, 鐘巻将人
  • 出版者: First Author'
  • URL: http://first.lifesciencedb.jp/archives/5309
• [図書] 動物の培養細胞における迅速なタンパク質発現制御法(AID法) (2010)
  • 著者名/発表者名: 西村浩平, 鐘巻将人
  • 出版者: 実験医学
• [備考]
  • URL: http://www.nig.ac.jp/section/kanemaki/kanemaki-j.html
• [備考]
  • URL: http://www.nig.ac.jp/labs/MolFunc/Molecular_Function_HP/Home.html
• [備考] DNA 二本鎖架橋修復の相同組換え反応に関与する新規複合体の発見
  • URL: http://www.nig.ac.jp/Research-Highlights/992/1082.html
• [備考] 分子機能研究室HP
  • URL: http://www.nig.ac.jp/labs/MolFunc/Molecular_Function_HP/Home.html
• [備考] 分子機能研究室・鐘巻研究室HP
  • URL: http://www.nig.ac.jp/section/kanemaki/kanemaki-j.html
• [備考]
  • URL: http://www.nig.ac.jp/section/kanemaki/kanemaki-j.html
• [備考]
  • URL: http://www.nig.ac.jp/labs/MolFunc/Molecular_Function_HP/Home.html
• [備考]
  • URL: http://www.nig.ac.jp/section/kanemaki/kanemaki-j.html
• [備考] 当研究科のHPに新着論文の記事がでました。
  • URL: http://www.bio.sci.osaka-u.ac.jp/newinfo/info50.html
• [産業財産権] タンパク質分解誘導性細胞、その製造方法、および、タンパク質分解の制御方法 (2013)
  • 発明者名: 鐘巻将人、西村浩平、柿本辰男、滝澤温彦
  • 権利者名: 大阪大学
  • 出願年月日: 2013-04-26
• [産業財産権] 改良型オーキシン分解誘導法を用いたタンパク質発現制御 (2011)
  • 発明者名: 鐘巻将人、西村浩平、小畑有以、三村覚、滝澤温彦
  • 権利者名: 大阪大学、国立遺伝学研究所
  • 産業財産権番号: 2011-252147
  • 出願年月日: 2011-11-18
• [産業財産権] 真核細胞におけるタンパク質分解誘導方法 (2011)
  • 発明者名: 鐘巻将人、西村浩平、滝澤温彦、三村覚、小畑有以
  • 権利者名: 国立遺伝学研究所、大阪大学
  • 産業財産権番号: 2011-511193
  • 出願年月日: 2011-11-18
• [産業財産権] 哺乳類動物細胞におけるタンパク質分解誘導法 (2009)
  • 発明者名: 鐘巻将人、西村浩平、柿本辰男、深川竜郎、滝澤温彦
  • 権利者名: 大阪大学、国立遺伝学研究所
  • 産業財産権番号: 2009-110449
  • 出願年月日: 2009-11-25
• [産業財産権] 哺乳類動物細胞におけるタンパク質分解誘導法 (2009)
  • 発明者名: 代表者:鐘巻将人共同発明者:西村浩平、柿本辰男、深川竜郎、滝澤温彦
  • 権利者名: 大阪大学
  • 産業財産権番号: 2009-110449
  • 出願年月日: 2009-04-30
  • 外国