キメラ受容体を用いた動物細胞での抗体選択法の開発

• 研究課題/領域番号: 21686077
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 河原 正浩 東京大学, 大学院・工学系研究科, 講師 (50345097)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 27,170千円 (直接経費: 20,900千円、間接経費: 6,270千円); 2011年度: 8,710千円 (直接経費: 6,700千円、間接経費: 2,010千円); 2010年度: 8,710千円 (直接経費: 6,700千円、間接経費: 2,010千円); 2009年度: 9,750千円 (直接経費: 7,500千円、間接経費: 2,250千円)
• キーワード: 抗体 / 受容体 / 細胞増殖 / ライブラリー選択 / シグナル伝達

研究概要

本研究では抗体ライブラリーの中から抗原特異的抗体を動物細胞の増殖活性を指標として迅速且つ簡便に選択する新手法の開発を目指した。これを達成するために、抗体ライブラリーと増殖誘導型受容体との融合蛋白質を動物細胞で発現させ、二量体抗原を標的抗原として用いて培地に加えて培養し、増殖した細胞の抗原結合性および抗原特異性を解析した。その結果、抗原に結合する抗体断片を細胞増殖を指標として取得することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Growth control ofgenetically modified cells using anantibody/c-Kit chimera (2012)
  • 著者名/発表者名: Kaneko, E., Kawahara, M., Ueda, H., andNagamune, T.
  • 雑誌名: J. Biosci. Bioeng. 巻: 113 号: 5 ページ: 641-646
  • DOI: 10.1016/j.jbiosc.2011.12.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Growth promotion ofgenetically modified hematopoieticprogenitors using an antibody/c-Mpl chimera (2011)
  • 著者名/発表者名: Kawahara, M., Chen, J., Sogo, T., Teng, J., Otsu, M., Onodera, M., Nakauchi, H., Ueda, H. and Nagamune, T.
  • 雑誌名: Cytokine 巻: 55 号: 3 ページ: 402-408
  • DOI: 10.1016/j.cyto.2011.05.024
  • 査読あり
• [雑誌論文] 生体における「危険信号」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 河原正浩
  • 雑誌名: 生物工学会誌 巻: 89 ページ: 28-28
  • NAID: 110008441023
• [雑誌論文] Engineering cytokine receptors to controlcellular functions (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawahara, M., Ueda, H., and Nagamune, T.
  • 雑誌名: Biochem. Eng. J. 巻: 48 号: 3 ページ: 283-294
  • DOI: 10.1016/j.bej.2009.09.010
• [雑誌論文] T cell growth control usinghapten-specific antibody/interleukin-2receptor chimera (2009)
  • 著者名/発表者名: Sogo, T., Kawahara, M., Ueda, H., Otsu, M., Onodera, M., Nakauchi, H. and Nagamune, T.
  • 雑誌名: Cytokine 巻: 46 号: 1 ページ: 127-136
  • DOI: 10.1016/j.cyto.2008.12.020
• [雑誌論文] The influence of domainstructures on the signal transduction ofchimeric receptors derived from theerythropoietin receptor (2009)
  • 著者名/発表者名: Liu, W., Kawahara, M., Ueda, H. and Nagamune, T.
  • 雑誌名: J. Biochem 巻: 145 号: 5 ページ: 575-584
  • DOI: 10.1093/jb/mvp013
• [雑誌論文] Selection and growthregulation of genetically modified cells withhapten-specific antibody/receptor tyrosinekinase chimera (2009)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, K., Kawahara, M., Ueda, H. and Nagamune, T.
  • 雑誌名: Biotechnol. Prog. 巻: 25 号: 4 ページ: 1138-1145
  • DOI: 10.1002/btpr.185
• [雑誌論文] T cell growth control using hapten-specific antibody/interleukin-2 receptor chimera (2009)
  • 著者名/発表者名: Sogo, T., et al
  • 雑誌名: Cytokine 46 ページ: 127-136
  • 査読あり
• [雑誌論文] The influence of domain structures on the signal transduction of chimeric receptors derived from the erythropoietin receptor (2009)
  • 著者名/発表者名: Liu, W., et al.
  • 雑誌名: J.Biochem. 145 ページ: 575-584
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selection and growth regulation of genetically modified cells with hapten-specific antibody/receptor tyrosine kinase chimera (2009)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, K., et al.
  • 雑誌名: Biotechnol.Prog. 25 ページ: 1138-1145
  • 査読あり
• [学会発表] 増殖誘導型キメラ受容体を用いたイントラボディー選択法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高須賀仁・河原正浩・グエントゥイズオン・加来義浩・井上智・上田宏・長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] 細胞増殖活性を指標とした抗体選択法 (2012)
  • 著者名/発表者名: 寺西佑理・河原正浩・藤原範子・上田宏・鈴木敬一郎・長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] 抗体ライブラリー選択を指向したキメラ受容体構造の最適化 (2012)
  • 著者名/発表者名: 吉田理恵・河原正浩・上田宏・長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] キメラ受容体を用いた細胞の自殺スイッチの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 戸根悠一郎・河原正浩・上田宏・長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] 抗体/受容体キメラを用いた胚性幹細胞の効率的分化法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中林秀人・河原正浩・大津真・小野寺雅史・中内啓光・上田宏・長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] キメラ受容体を用いた抗狂犬病ウイルスP蛋白質抗体の細胞内選択 (2012)
  • 著者名/発表者名: 李松熹・河原正浩・加来義浩・井上智・上田宏・長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] 細胞増殖活性を指標とした抗体選択法 (2012)
  • 著者名/発表者名: 寺西佑理, ら
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 東京都・工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] 抗体ライブラリー選択を指向したキメラ受容体構造の最適化 (2012)
  • 著者名/発表者名: 吉田理恵, ら
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 東京都・工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] キメラ受容体を用いた細胞の自殺スイッチの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 戸根悠一郎, ら
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 東京都・工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] 抗体/受容体キメラを用いた胚性幹細胞の効率的分化法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中林秀人, ら
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 東京都・工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] 増殖誘導型キメラ受容体を用いたイントラボディー選択法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高須賀仁, ら
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 東京都・工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] キメラ受容体を用いた抗狂犬病ウイルスP蛋白質抗体の細胞内選択 (2012)
  • 著者名/発表者名: 李松熹, ら
  • 学会等名: 化学工学会第77年会
  • 発表場所: 東京都・工学院大学
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] キメラ受容体を用いたintrabody選択法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 高須賀仁,鈴木菜央,河原正浩,加来義浩,井上智,上田宏,長棟輝行
  • 学会等名: 第63回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 東京農工大学
  • 年月日: 2011-09-26
• [学会発表] キメラ受容体を用いたintrabody選択法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 高須賀仁, ら
  • 学会等名: 第63回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 東京都・東京農工大学
  • 年月日: 2011-09-26
• [学会発表] 抗体/受容体キメラによる胚性幹細胞の運命制御 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中林秀人・河原正浩・大津真・小野寺雅史・中内啓光・上田宏・長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第43回秋季大会
  • 発表場所: 名古屋工業大学
  • 年月日: 2011-09-14
• [学会発表] 抗体/受容体キメラによる胚性幹細胞の運命制御 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中林秀人, ら
  • 学会等名: 化学工学会第43回秋季大会
  • 発表場所: 愛知県・名古屋工業大学
  • 年月日: 2011-09-14
• [学会発表] Receptor for expansion of geneticallymodified hematopoietic stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Masahiro Kawahara, Jianhong Chen, Takahiro Sogo, Jinying Teng, Makoto Otsu, Masafumi Onodera, Hiromitsu Nakauchi, Hiroshi Ueda, Teruyuki Nagamune
  • 学会等名: AsianCongress on Biotechnology(ACB-2011)
  • 発表場所: Shanghai
  • 年月日: 2011-05-13
• [学会発表] Receptor for expansion of genetically modified hematopoietic stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Kawahara, M., et al.
  • 学会等名: Asian Congress on Biotechnology (ACB-2011)
  • 発表場所: 中国・上海
  • 年月日: 2011-05-13
• [学会発表] キメラ受容体を用いたタンパク質間相互作用検出法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小川健一朗,河原正浩,長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第76年会
  • 発表場所: 東京農工大学
  • 年月日: 2011-03-22
• [学会発表] フルオレセイン応答性キメラ受容体を用いた細胞死誘導法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 戸根悠一郎,林隼,川口大地,河原正浩,上田宏,長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第76年会
  • 発表場所: 東京農工大学
  • 年月日: 2011-03-22
• [学会発表] ICASS(In Cell Affinity Selection System)の構築とscFvのスクリーニング (2011)
  • 著者名/発表者名: 東野茜, ら
  • 学会等名: 化学工学会第76年会
  • 発表場所: 東京農工大学
  • 年月日: 2011-03-22
• [学会発表] Expansion of genetically modifiedhematopoietic stem cells using afluorescein-responsive chimericthrombopoietin receptor (2010)
  • 著者名/発表者名: Jianhong Chen, Jinying Teng, TakahiroSogo, Masahiro Kawahara, Makoto Otsu, Masafumi Onodera, Hiromitsu Nakauchi, Hiroshi Ueda, and Teruyuki Nagamune
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会)
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] 哺乳動物細胞の増殖を指標とした細胞内抗体選択法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高須賀仁,鈴木菜央,河原正浩,加来義浩,井上智,上田宏,長棟輝行
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会)
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] 抗体/受容体キメラを用いた細胞死誘導スイッチの開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 戸根悠一郎,林隼,川口大地,河原正浩,上田宏,長棟輝行
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会)
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] Expansion of genetically modified hematopoietic stem cells using a fluorescein-res (2010)
  • 著者名/発表者名: Jianhong Chen, et al.
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会)
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] 哺乳動物細胞の増殖を指標とした細胞内抗体選択法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高須賀仁, ら
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会)
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] フルオレセイン応答性キメラ受容体を用いた造血幹細胞の増幅 (2010)
  • 著者名/発表者名: 滕晋イン,河原正浩,大津真,小野寺雅史,中内啓光,上田宏,長棟輝行
  • 学会等名: 第62回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 宮崎シーガイヤ
  • 年月日: 2010-10-28
• [学会発表] 受容体のエンジニアリングによる細胞運命制御 (2010)
  • 著者名/発表者名: 河原正浩,上田宏,長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第42回秋季大会
  • 発表場所: 同志社大学
  • 年月日: 2010-09-06
• [学会発表] フルオレセイン応答性キメラ受容体を用いたT細胞の増殖制御 (2010)
  • 著者名/発表者名: 十河孝浩,河原正浩,上田宏,大津真,小野寺雅史,中内啓光,長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第75年会
  • 発表場所: 鹿児島大学
  • 年月日: 2010-03-19
• [学会発表] キメラ受容体を用いた新規抗体選択法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 寺西佑理,劉文海,河原正浩,藤原範子,上田宏,鈴木敬一郎,長棟輝行
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会)
• [学会発表] キメラ受容体を用いた新規抗体選択法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 寺西佑理, ら
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会)
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] Fluorescein-responsive migration ofmammalian cells equipped with anantibody/receptor chimera (2009)
  • 著者名/発表者名: Masahiro Kawahara, Yusuke Shimo, AzusaHitomi, Yuki Mochida, Takahiro Sogo, Hiroshi Ueda, Teruyuki Nagamune
  • 学会等名: APBioChEC' 09
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2009-11-26
• [学会発表] Fluorescein-responsive migration of mammalian cells equipped with an antibody/receptor chimera (2009)
  • 著者名/発表者名: 河原正浩, et al.
  • 学会等名: APBioChEC'09
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2009-11-26
• [学会発表] Growth promotion of mouse Tcells using a fluorescein-responsivechimeric interleukin-2 receptor (2009)
  • 著者名/発表者名: Takahiro Sogo, Masahiro Kawahara, Hiroshi Ueda, Makoto Otsu, MasafumiOnodera, Hiromitsu Nakauchi, TeruyukiNagamune
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2009-10-24
• [学会発表] Growth promotion of mouse T cells using a fluorescein-responsive chimeric interleukin-2 receptor (2009)
  • 著者名/発表者名: 十河孝浩, et al.
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2009-10-24
• [学会発表] 抗体/受容体キメラを用いた細胞運動制御 (2009)
  • 著者名/発表者名: 河原正浩,下茂佑輔,人見梓,持田祐希,十河孝浩,上田宏,長棟輝行
  • 学会等名: 第61回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 名古屋大学東山キャンパス
  • 年月日: 2009-09-24
• [学会発表] 抗体/受容体キメラを用いた細胞運動制御 (2009)
  • 著者名/発表者名: 河原正浩, ら
  • 学会等名: 第61回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 名古屋大学
  • 年月日: 2009-09-24
• [学会発表] 抗体-エリスロポエチン受容体キメラのシグナル伝達におけるドメイン構造の影響 (2009)
  • 著者名/発表者名: 劉文海、河原正浩、上田宏、長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第41回秋季大会
  • 発表場所: 広島大学東広島キャンパス
  • 年月日: 2009-09-18
• [学会発表] 抗体-エリスロポエチン受容体キメラのシグナル伝達におけるドメイン構造の影響 (2009)
  • 著者名/発表者名: 劉文海, ら
  • 学会等名: 化学工学会第41回秋季大会
  • 発表場所: 広島大学
  • 年月日: 2009-09-18
• [学会発表] 抗体-サイトカイン受容体キメラによる遺伝子導入造血幹細胞の増幅法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 陳建宏,十河孝浩,河原正浩,上田宏,大津真,小野寺雅史,中内啓光,長棟輝行
  • 学会等名: 化学工学会第41回秋季大会
  • 発表場所: 広島大学東広島キャンパス
  • 年月日: 2009-09-17
• [学会発表] 抗体-サイトカイン受容体キメラによる遺伝子導入造血幹細胞の増幅法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 陳建宏, ら
  • 学会等名: 化学工学会第41回秋季大会
  • 発表場所: 広島大学
  • 年月日: 2009-09-17
• [学会発表] キメラ受容体と遺伝子組換え酵素を用いた抗体選択・生産一貫系の基礎的検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 林隼、河原正浩、上田宏、長棟輝行
  • 学会等名: 日本動物細胞工学会2009年度大会(JAACT 2009)
  • 発表場所: つくば国際会議場
  • 年月日: 2009-07-25
• [図書] Animal Cell Technology : Basic & Applied Aspects (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawahara, M., Inoue, T., Ren, X., Sogo, T., Yamada, H., Katoh, M., Ueda, H., Oshimura, M. and Nagamune, T.
  • 出版者: Growth control ofmammalian cells via a human artificialchromosome harboring a chimeric receptor
• [図書] Animal Cell Technology : Basic & Applied Aspects (2010)
  • 著者名/発表者名: Liu, W., Kawahara, M., Ueda, H., and Nagamune, T.
  • 出版者: The characteristic ofchimeric receptors based on erythropoietinreceptor
• [図書] Animal Cell Technology : Basic & Applied Aspects (2009)
  • 著者名/発表者名: Liu, W., Kawahara, M., Ueda, H., and Nagamune, T.
  • 出版者: Construction of afluorescein-responsive chimeric receptorwith strict ligand dependency and analysis ofthe role of erythropoietin receptor domainsin signal transduction
• [図書] Animal Cell Technology : Basic & Applied Aspects (2009)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, K., Kawahara, M., Ueda, H., and Nagamune, T.
  • 出版者: Promotingnon-hematopoietic cell proliferation bychimeric receptors
• [図書] Animal Cell Technology : Basic & Applied Aspects (2009)
  • 著者名/発表者名: Sogo, T., Kawahara, M., Ueda, H., and Nagamune, T.
  • 出版者: Selective expansion ofgenetically modified T cells using a chimericIL-2 receptor for cancer therapy