金属イオン-タンパク質マッピング電気泳動法の開発

• 研究課題/領域番号: 21750072
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 分析化学
• 研究機関: 埼玉大学
• 研究代表者: 齋藤 伸吾 埼玉大学, 理工学研究科, 准教授 (60343018)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2010年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2009年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
• キーワード: 分離分析 / ポリアクリルアミドゲル電気泳動 / 金属錯体 / 蛍光プローブ / 蛍光検出

研究概要

配位部位が大環状および非環状型の8 座蛍光プローブを新規合成し,キャピラリー電気泳動-レーザー励起蛍光検出法(CE-LIF)およびポリアクリルアミドゲル電気泳動法(PAGE)に適用し,種々の遷移金属イオンに対し数十pMの検出限界を得ることに成功した。CE-LIFにおいてはカチオン性ポリマーを添加することで高分離を達成した。この分離原理が新しいものであることが判明し,イオン会合複合体分離モードと命名した。また,金属検出PAGE によって,分離したトランスフェリンおよびセルロプラスミン分画中の鉄および銅イオンを検出することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Ultrasensitive CE for heavy metal ions using the variations in the chemicalstructures formed from new octadentate fluorescent probes and cationic polymers (2011)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Yuta Nakano, Atsushi Hikichi, Ryouji Suzuki, Keitaro Yoshimoto, Mizuo Maeda,Masakazu Aoyama, Masami Shibukawa
  • 雑誌名: Analyst in press.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ultrasensitive CE for heavy metal ions using the variations in the chemicalstructures formed from new octadentate fluorescent probes and cationic polymers (2011)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Yuta Nakano, Atsushi Hikichi, Ryouji Suzuki, Keitaro Yoshimoto, Mizuo Maeda, Masakazu Aoyama, Masami Shibukawa
  • 雑誌名: Analyst 巻: 136(印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] PAGE分離後のタンパク質結合型金属イオンの検出 (2010)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 雑誌名: ぶんせき 第12号 ページ: 678-678
• [雑誌論文] キャピラリー電気泳動法を用いる金属イオンの超高感度検出法の全体設計 (2010)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 雑誌名: MaLS FORUM Vol.7 ページ: 8-13
• [雑誌論文] キャピラリー電気泳動法を用いる金属イオンの超高感度検出法の全体設計 (2010)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 雑誌名: MaLS FORUM 7 ページ: 8-13
• [雑誌論文] Recognition of Monosaccharides with Energy-transfer Luminescence Using Residual Coordination Sites of Lanthanide(III)-4-aminobenzyl-EDTA Complex in Aqueous Solution (2009)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Atsushi Hikichi, Takao Kamura, Kazuyuki Hattori, Masakazu Aoyama, Masami Shibukawa
  • 雑誌名: Chemistry Letters Vol.38 ページ: 412-413
  • NAID: 10025121487
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recognition of Monosaccharides with Energy-transfer Luminescence Using Residual Coordination Sites of Lanthanide(III)-4-aminobenzyl-EDTA Complex in Aqueous Solution (2009)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Atsushi Hikichi, Takao Kamura, Kazuyuki Hattori, Masakazu Aoyama, Masami Shibukawa
  • 雑誌名: Chemistry Letters 38 ページ: 412-413
  • NAID: 10025121487
  • 査読あり
• [学会発表] キャピラリー電気泳動-レーザー励起蛍光検出法によるアクチノイド元素の高感度分析法-様々な配位構造を有する蛍光プローブの基礎的検討- (2011)
  • 著者名/発表者名: 原賀智子, 中野裕太, 渋川雅美, 齋藤伸吾, 亀尾裕, 高橋邦明
  • 学会等名: 日本化学会第91春季年会
  • 発表場所: 神奈川大学横浜キャンパス
  • 年月日: 2011-03-26
• [学会発表] 放射性廃液中の希土類イオン分析を目的とした新規蛍光プローブおよび動的三元錯体平衡を利用する高感度CE-LIF (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐藤義行, 中野裕太, 齋藤伸吾, 原賀智子, 浅井志保, 亀尾裕, 高橋邦明, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本化学会第91春季年会
  • 発表場所: 神奈川大学横浜キャンパス
  • 年月日: 2011-03-26
• [学会発表] Characterization of Novel Squarylium Dyes with Multiple Carboxylic Acid Residues as Noncovalent Protein Probes (2011)
  • 著者名/発表者名: Stephanie E.Rockett, Shingo Saito, Keita Iehara Takeshi Maeda, Hiroyuki Nakazumi, Christa L.Colyer
  • 学会等名: PittCon2011
  • 発表場所: Atlanta, GA, USA
  • 年月日: 2011-03-15
• [学会発表] 放射性廃液中の希土類イオン分析を目的とした新規蛍光プローブおよび動的三元錯体平衡を利用する高感度CE-LIF (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐藤義行, 中野裕太, 齋藤伸吾, 原賀智子, 浅井志保, 亀尾裕, 高橋邦明, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本化学会第91春季年会
  • 発表場所: 神奈川大学 横浜キャンパス
• [学会発表] キャピラリー電気泳動-レーザー励起蛍光検出法によるアクチノイド元素の高感度分析法-様々な配位構造を有する蛍光プローブの基礎的検討- (2011)
  • 著者名/発表者名: 原賀智子, 中野裕太, 渋川雅美, 齋藤伸吾, 亀尾裕, 高橋邦明
  • 学会等名: 日本化学会第91春季年会
  • 発表場所: 神奈川大学 横浜キャンパス
• [学会発表] ゲル電気泳動法をプラットフォームとするメタローム解析技術の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 学会等名: 2010旭硝子財団助成研究発表会
  • 発表場所: 市ヶ谷
  • 年月日: 2010-07-27
• [学会発表] ゲル電気泳動法をプラットフォームとするメタローム解析技術の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 学会等名: 2010旭硝子財団 助成研究発表会
  • 発表場所: 市ヶ谷
  • 年月日: 2010-07-27
• [学会発表] PAGEを基盤とした蛍光ラベル化配位子を用いるタンパク質-鉄イオン二次元マッピング法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大島大樹, 齋藤伸吾, 佐藤誠, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会関東支部若手交流会(ポスター賞受賞)
  • 発表場所: 国民宿舎サンレイク草木
  • 年月日: 2010-07-03
• [学会発表] 残余配位座でシアル酸を特異的に分子認識する発光性ランタノイド-六座大環状ポリアザカルボン酸錯体 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大内和希, 齋藤伸吾, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会関東支部若手交流会(ポスター賞受賞)
  • 発表場所: 国民宿舎サンレイク草木
  • 年月日: 2010-07-03
• [学会発表] キャピラリー電気泳動におけるポリカチオンによる金属蛍光プローブ錯体の配位構造認 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中野裕太, 齋藤伸吾, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会関東支部若手交流会
  • 発表場所: 国民宿舎サンレイク草木
  • 年月日: 2010-07-03
• [学会発表] 残余配位座でシアル酸を特異的に分子認識する発光性ランタノイド-六座大環状ポリアザカルボン酸錯体 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大内和希, 齋藤伸吾, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会関東支部若手交流会
  • 発表場所: 国民宿舎サンレイク草木
  • 年月日: 2010-07-03
• [学会発表] PAGEを基盤とした蛍光ラベル化配位子を用いるタンパク質-鉄イオン二次元マッピング法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大島大樹, 齋藤伸吾, 佐藤誠, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会関東支部若手交流会
  • 発表場所: 国民宿舎サンレイク草木
  • 年月日: 2010-07-03
• [学会発表] 発光性ランタノイド-六座大環状ポリアミノカルボン酸錯体の残余配位座を利用する単糖分子認識 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大内和希, 齋藤伸吾, 渋川雅美
  • 学会等名: 第71回分析化学討論会
  • 発表場所: 島根大学松江キャンパス
  • 年月日: 2010-05-16
• [学会発表] PAGEを基盤とした蛍光ラベル化配位子を用いるタンパク質結合型金属イオンの分離検出技術の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大島大樹, 齋藤伸吾, 佐藤誠, 渋川雅美
  • 学会等名: 第71回分析化学討論会
  • 発表場所: 島根大学松江キャンパス
  • 年月日: 2010-05-15
• [学会発表] 水溶液中における閉殻金属(II)-含ピリジン六座配位子錯体の加溶媒解離反応速度論:活性化体積の測定と反応速度制御因子の考察 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加藤健太, 齋藤伸吾, 渋川雅美, 永澤明
  • 学会等名: 日本化学会第90春季年会
  • 発表場所: 近畿大学本部キャンパス
  • 年月日: 2010-03-27
• [学会発表] Polyacrylamide gel electrophoresis of trace metal ions bounded to proteins in gel fraction using novel fluorescent probes : Fluorescent detection of trace Fe(III) in transferrin (2010)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Hiroki Oshima, Takahiro Nomura, Keitaro Yoshimoto, Makoto Sato, Mizuo Maeda, Masami Shibukawa
  • 学会等名: PittCon 2010
  • 発表場所: Orland, Florida, USA
  • 年月日: 2010-03-15
• [学会発表] Polyacrylamide gel electrophoresis of trace metal ions bounded to proteins in gel fraction using novel fluorescent probes : Fluorescent detection of trace Fe(III)in transferrin (2010)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Hiroki Oshima, Takahiro Nomura, Keitaro Yoshimoto, Makoto Sato, Mizuo Maeda, Masami Shibukawa
  • 学会等名: PittCon 2010
  • 発表場所: Orland, Florida, USA
  • 年月日: 2010-02-28
• [学会発表] 超微量重金属イオンのCE蛍光検出のための試薬および分離システム設計 (2009)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 学会等名: 第26回イオンクロマトグラフィー討論会(招待公演)
  • 年月日: 2009-12-04
• [学会発表] 超微量重金属イオンのCE蛍光検出のための試薬および分離システム設計 (2009)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 学会等名: 第26回イオンクロマトグラフィー討論会
  • 発表場所: 草津
  • 年月日: 2009-12-04
• [学会発表] 八座発蛍光性配位子を用いる金属イオンのCE-LIF分離検出-カチオン性ポリマーとのイオン会合による配位構造認識- (2009)
  • 著者名/発表者名: 中野裕太, 齋藤伸吾, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会第58年会
  • 発表場所: 北海道大学
  • 年月日: 2009-09-24
• [学会発表] 八座発蛍光性配位子を用いる金属イオンのCE-LIF分離検出-カチオン性ポリマーとのイオン会合による配位構造認識- (2009)
  • 著者名/発表者名: 中野裕太, 齋藤伸吾, 渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会第58年会
  • 発表場所: 北海道大
  • 年月日: 2009-09-24
• [学会発表] PAGEをプラットフォームとするタンパク質結合型金属イオンの検出法の開発:トランスフェリン結合型Fe(III)の検出 (2009)
  • 著者名/発表者名: 野村高弘, 大島大樹, 佐藤誠, 齋藤伸吾, 渋川雅美
  • 学会等名: 東京コンファレンス2009
  • 発表場所: 幕張メッセ国際会議場
  • 年月日: 2009-09-04
• [学会発表] 分離分析システムにおけるランタノイドイオンの高感度検出試薬の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 学会等名: 「核燃料サイクルの物質利用」研究専門委員会第15回委員会(招待講演)
  • 発表場所: 大宮ソニックシティ
  • 年月日: 2009-07-22
• [学会発表] 分離分析システムにおけるランタノイドイオンの高感度検出試薬の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 学会等名: 「核燃料サイクルの物質利用」研究専門委員会 第15回委員会
  • 発表場所: 大宮 ソニックシティ
  • 年月日: 2009-07-22
• [学会発表] 配位構造の異なる金属プローブ錯体のPAGEにおける分離検出特性の調査 (2009)
  • 著者名/発表者名: 榎本七基, 齋藤伸吾, 嶋田康紀, 佐藤誠, 渋川雅美
  • 学会等名: 分離技術会年会2009
  • 発表場所: 明治大生田キャンパス
  • 年月日: 2009-06-12
• [学会発表] 剛性の高い八座非環状蛍光配位子を用いる金属イオンのキャピラリー電気泳動分離 (2009)
  • 著者名/発表者名: 中野裕太, 齋藤伸吾, 渋川雅美
  • 学会等名: 分離技術会年会2009(学生ポスター賞受賞)
  • 発表場所: 明治大生田キャンパス
  • 年月日: 2009-06-12
• [学会発表] 配位構造の異なる金属プローブ錯体のPAGEにおける分離検出特性の調査 (2009)
  • 著者名/発表者名: 榎本七基, 齋藤伸吾, 嶋田康紀, 佐藤誠, 渋川雅美
  • 学会等名: 分離技術会 年会2009
  • 発表場所: 明治大生田キャンパス
  • 年月日: 2009-06-12
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.apc.saitama-u.ac.jp/bunseki/Indexl.html
• [備考]
  • URL: http://www.apc.saitama-u.ac.jp/bunseki/Index1.html
• [産業財産権] 流れ分離分析法による金属測定に使用する試薬及び測定方法 (2010)
  • 発明者名: 齋藤伸吾, 穴田哲也, 星座
  • 権利者名: 株式会社シノテスト, 齋藤伸吾, 星座
  • 取得年月日: 2010-08-20