ジアシルグリセロールキナーゼηによる細胞増殖制御機構の解明

• 研究課題/領域番号: 21770147
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 国立医薬品食品衛生研究所
• 研究代表者: 安田 智 国立医薬品食品衛生研究所, 遺伝子細胞医薬部, 主任研究官 (20381262)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2010年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2009年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: シグナル伝達 / 脂質 / 酵素

研究概要

Ras/B-Raf/C-Raf/MEK/ERK経路(ERK経路)は、細胞増殖を含む細胞機能の制御に重要な役割を果たしている。HeLa細胞にsiRNAをトランスフェクトし、ジアシルグリセロールキナーゼη(DGKη)の発現を抑制すると、上皮増殖因子(EGF)刺激によって誘導されるERK経路の活性化の阻害が認められた。またDGKηの発現は触媒活性非依存的にERK経路を活性化したことより、DGKηはアダプタータンパク質として機能していることが考えられた。B-RafとC-Rafのキナーゼ活性を測定したところ、DGKηの発現抑制によりC-Raf活性のみが減少することが明らかになった。さらにDGKηの発現抑制によって、EGF刺激によって誘導されるB-RafとC-Rafのヘテロ二量体形成も顕著に抑制された。またDGKηはB-RafおよびC-Rafと相互作用し、EGF刺激によって誘導されるB-Raf およびC-Raf の細胞膜への移行も制御した。以上の結果は、DGKηはERK経路を制御する新規の因子であることを示唆している。

研究成果

• [雑誌論文] Diacylglycerol kinase η augments C-Raf activity and B-Raf/C-Raf heterodimerization. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, S, Kai, M, Imai,S, Takeishi, K, Taketomi, A, Toyota, M, Kanoh, H, Sakane, F
  • 雑誌名: J.Biol. Chem. 284(43) ページ: 29559-29570
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diacylglycerol kinase α enhances protein kinase C ζ-dependent phosphorylation at Ser311 of p65/RelA subunit of nuclear factor-κB. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kai, M, Yasuda, S, Imai, S, Toyota, M, Kanoh, H, Sakane, F
  • 雑誌名: FEBS Lett. 583(19) ページ: 3265-3268
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diacylglycerol kinase eta augments C-Raf activity and B-Raf/C-Raf heterodimerization. (2009)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Yasuda
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 284 ページ: 29559-29570
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diacylglycerol kinase alpha enhances protein kinase Czeta-dependent phosphorylation at Ser311 of p65/RelA subunit of nuclear factor-kappaB. (2009)
  • 著者名/発表者名: Masahiro Kai
  • 雑誌名: FEBS Lett. 583 ページ: 3265-3268
  • 査読あり
• [学会発表] マウス胚性癌細胞および胚性幹細胞における心筋分化能マーカーの検索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安田智
  • 学会等名: 第10回 日本再生医療学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-03-01
• [学会発表] マウス胚性癌細胞および胚性幹細胞における心筋分化能マーカーの検索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安田智、長谷川哲也、細野哲司、佐藤光利、山口照英、鈴木和博、佐藤陽治
  • 学会等名: 第10回日本再生医療学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] ジアシルグリセロールキナーゼηは上皮増殖因子に依存したRafシグナル経路を制御する (2009)
  • 著者名/発表者名: 安田智
  • 学会等名: 第68回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市)
  • 年月日: 2009-10-02
• [学会発表] ジアシルグリセロールキナーゼηは、上皮増殖因子に応答してB-RAFとC-RAFの相互作用を促進し、MEK-ERK経路を活性化する (2009)
  • 著者名/発表者名: 安田智
  • 学会等名: 第51回日本脂質生化学会
  • 発表場所: ウィルあいち(名古屋市)
  • 年月日: 2009-07-30
• [学会発表] ジアシルグリセロールキナーゼηは上皮増殖因子に依存したRAFシグナル経路を制御する (2009)
  • 著者名/発表者名: 安田智、今井伸一、甲斐正広、鈴木拓、今井浩三、豊田実、坂根郁夫
  • 学会等名: 第68回日本癌学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] PKCζによるp65のリン酸化がメラノーマ細胞におけるジアシルグリセロールキナーゼαからNF-κBへのシグナル伝達を仲介する (2009)
  • 著者名/発表者名: 甲斐正広、安田智、今井伸一、鈴木拓、今井浩三、豊田実、坂根郁夫
  • 学会等名: 第68回日本癌学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] ジアシルグリセロールキナーゼηは、上皮増殖因子に応答してB-RAFとC-Rafの相互作用を促進し、MEK-ERK経路を活性化する (2009)
  • 著者名/発表者名: 安田智、坂根郁夫
  • 学会等名: 第51回日本脂質生化学会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Diacylglycerol kinase α suppresses tumor necrosis factor-α-induced apoptosis of human melanoma cells through NF-κB activation. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kai, M, Yanagisawa, K, Yasuda, S, Sakane, F.
  • 学会等名: 4th International Conference on Phospholipase A_2 and Lipid Mediators
  • 発表場所: Tokyo