出芽酵母におけるスフィンゴ糖脂質の意義を探る

• 研究課題/領域番号: 21770148
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 東北薬科大学
• 研究代表者: 上村 聡志 東北薬科大学, 薬学部, 助教 (10399975)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円); 2010年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2009年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: 糖鎖生物学 / スフィンゴ糖脂質 / 出芽酵母 / 糖転移酵素 / 出芽酵素

研究概要

本研究では,出芽酵母におけるスフィンゴ糖脂質(GSL)の意義を明らかにするために,GSL組成を改変した酵母に蛍光タンパク質(enhanced green fluorescent protein,EGFP)を融合した細胞膜タンパク質,Hxt1-EGFPを発現させ,fluorescence recovery after photobleaching (FRAP)解析を行った.FRAP解析とは,特定の蛍光領域に強い励起光を照射することで,蛍光を不可逆的に退色させた後,その周辺部からの蛍光の流入を観察し,蛍光分子の動く速度及び割合を求める実験である.この解析により,スフィンゴ糖脂質の糖鎖部分の伸長と脂質部分への水酸化(特にスフィンゴイド塩基の4位)の両方が欠失した変異体(Δsur2Δcsg1Δcsh1変異体)において,Hxt1-EGFPの動く分子の割合と速度を著しく低下させることを明らかになった.つまり,この結果は,スフィンゴ糖脂質の糖鎖部分と水酸基部分が,細胞膜タンパク質の側方拡散の維持に必須であることを示している.

研究成果

• [学会発表] 出芽酵母において複合型スフィンゴ脂質組成変化が細胞膜タンパク質の側方拡散を低下させる (2010)
  • 著者名/発表者名: 上村聡志
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会第86回に本生物化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートピアランド(神戸)
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] 出芽酵母において,複合型スフィンゴ脂質の組成変化が細胞膜タンパク質の側方拡散を低下させる (2010)
  • 著者名/発表者名: 上村聡志
  • 学会等名: 第33回 日本分子生物学会年会 第86回 日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] Phyto-type glycosphingolipids participate in the regulation of the lateral diffusion of plasma membrane proteins (2010)
  • 著者名/発表者名: 上村聡志
  • 学会等名: The 27th NAITO CONFERENCE ON Membrane Dynamics and Lipid Biology[I]
  • 発表場所: シャトレーゼ ガトーキングダム サッポロ(札幌)
  • 年月日: 2010-06-30
• [学会発表] Phyto-type glycosphingolipids participate in the regulation of the lateral diffusion of plasma membrane proteins (2010)
  • 著者名/発表者名: 上村聡志
  • 学会等名: The 27th NAITO CONFERENCE ON Membrane Dynamics and Lipid Biology [I]
  • 発表場所: シャトレーゼ ガトーキングダム サッポロ(札幌)
  • 年月日: 2010-06-30
• [学会発表] スフィンゴ糖脂質合成酵素の細胞内トラフィック制御機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 上村聡志
  • 学会等名: 東北糖鎖研究会
  • 発表場所: 長岡技術科学大学(新潟)
  • 年月日: 2009-11-20
• [学会発表] スフィンゴ糖脂質合成酵素の細胞内トラフィック制御機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 上村聡志
  • 学会等名: 東北糖鎖研究会
  • 発表場所: 長岡技術科学大学(新潟県)
  • 年月日: 2009-11-20