新規NMR解析法を用いたアミロイド線維の過渡的中間体の構造解析

• 研究課題/領域番号: 21770169
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物物理学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 櫻井 一正 大阪大学, 蛋白質研究所, 助教 (10403015)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2010年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2009年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 蛋白質 / 生物物理 / 自己組織化 / アミロイド線維 / NMR

研究概要

本研究の目的は透析アミロイド病の原因蛋白質であるβ2ミクログロブリン(β2m)が病気発症時にどのような構造変化をするかを調べることである。そのために本研究では主に核磁気共鳴法(NMR)を用いた。従来の研究から、β2mの部分構造状態がアミロイド線維の前駆体だと考えられていた。ところが本計画の結果から、完全変性状態の方が真の前駆体だということが示された。これは他の蛋白質のアミロイド線維形成にも共通であると思われ、より一般的な理解につながると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Kinetic Intermediates of β2-Microglobulin Fibril Elongation Probed by Pulse-Labeling H/D Exchange Combined with NMR Analysis (2011)
  • 著者名/発表者名: Konuma, T., Chatani, E., Yagi, M., Sakurai, K., Ikegami, T., Naiki, H., Goto, Y.
  • 雑誌名: Journal of Molecular Biology 巻: 405 ページ: 851-862
  • 査読あり
• [雑誌論文] Kinetic Intermediates of ss2-Microglobulin Fibril Elongation Probed by Pulse-Labeling H/D Exchange Combined with NMR Analysis. (2010)
  • 著者名/発表者名: 小沼剛、茶谷絵理、八木正典、櫻井一正、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 雑誌名: J.Mol.Biol. 405 ページ: 851-862
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct Observation of Minimum-Sized Amyloid Fibrils Using Solution NMR Spectroscopy. (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、李映昊、池上貴久、茶谷絵理、内木宏延、後藤祐児
  • 雑誌名: Protein Sci. 12 ページ: 2347-2355
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pre-Steady-State Kinetic Analysis of the Elongation of Amyloid Fibrils of ss2-Microglobulin with Tryptophan Mutagenesis. (2010)
  • 著者名/発表者名: 茶谷絵理、大西玲奈、小沼剛、櫻井一正、内木宏延、後藤祐児
  • 雑誌名: J.Mol.Biol. 400 ページ: 1057-1066
  • 査読あり
• [雑誌論文] NMR-based characterization of a refolding intermediate of ss2-microglobulin labeled using a wheat germ cell-free system. (2010)
  • 著者名/発表者名: 亀田篤司、森田勇人、櫻井一正、内木宏延、後藤祐児
  • 雑誌名: Protein Sci. 12 ページ: 2347-2355
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pre-Steady-State Kinetic Analysis of the Elongation of Amyloid Fibrils of β2-Microglobulin with Tryptophan Mutagenesis (2010)
  • 著者名/発表者名: Chatani, E., Ohnishi, R., Konuma, T., Sakurai, K., Naiki, H., Goto, Y.
  • 雑誌名: Journal of Molecular Biology 巻: 400 ページ: 1057-1066
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct Observation of Minimum-Sized Amyloid Fibrils Using Solution NMR Spectroscopy (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshimura, Y., Sakurai, K., Lee, YH, Ikegami, T, Chatani, E., Naiki, H, Goto, Y.
  • 雑誌名: Protein Science 巻: 12 ページ: 2347-2355
  • 査読あり
• [雑誌論文] NMR-based characterization of a refolding intermediate of beta2-microglobulin labeled using a wheat germ cell-free system. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kameda A, Morita EH, Sakurai K, Naiki H, Goto Y.
  • 雑誌名: Protein Science 18 ページ: 1592-1601
  • 査読あり
• [学会発表] 溶液NMRを用いたss2ミクログロブリンのアミロイド線維形成における過渡的中間体のキャラクタリゼーション (2010)
  • 著者名/発表者名: 櫻井一正、柳浩太郎、吉村優一、小沼剛、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 日本生物物理学会第48回年会
  • 発表場所: 東北大川内キャンパス・仙台市
  • 年月日: 2010-09-21
• [学会発表] 超音波による高速アミロイド線維形成反応 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宗正智、八木寿梓、櫻井一正、荻博次、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 日本生物物理学会第48回年会
  • 発表場所: 東北大川内キャンパス・仙台市
  • 年月日: 2010-09-21
• [学会発表] 超音波による高速アミロイド線維形成反応 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宗正智、八木寿梓、櫻井一正、荻博次、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 日本生物物理学会第48回年会
  • 発表場所: 東北大学・川内北キャンパス
  • 年月日: 2010-09-21
• [学会発表] 溶液NMRを用いたβ2ミクログロブリンのアミロイド線維形成における過渡的中間体のキャラクタリゼーション (2010)
  • 著者名/発表者名: 櫻井一正、柳浩太郎、吉村優一、小沼剛、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 日本生物物理学会第48回年会
  • 発表場所: 東北大学・川内北キャンパス(招待講演)
  • 年月日: 2010-09-20
• [学会発表] パルスラベルH/D交換法とNMRを用いたss2ミクログロブリンの線維伸長中間体の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小沼剛、茶谷絵理、八木正典、櫻井一正、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2010-06-18
• [学会発表] ss2-ミクログロブリンが形成するアミロイド線維の溶液NMR による直接観察 (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、李映昊、池上貴久、茶谷絵理、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2010-06-18
• [学会発表] 超音波による超高速アミロイド線維形成反応 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宗正智、八木寿梓、櫻井一正、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2010-06-18
• [学会発表] パルスラベルH/D交換法とNMRを用いたβ2ミクログロブリンの線維伸長中間体の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小沼剛、茶谷絵理、八木正典、櫻井一正、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2010-06-18
• [学会発表] β2-ミクログロブリンが形成するアミロイド線維の溶液NMRによる直接観察 (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、李映昊、池上黄久、茶谷絵理、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2010-06-16
• [学会発表] Identification of transient intermediates of the formation of the ss2-microglobulin amyloid fibril by cross saturation transfer experiment. (2010)
  • 著者名/発表者名: 櫻井一正、柳浩太郎、吉村優一、小沼剛、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: XXIVth International Conference on Magnetic Resonance in Biological Systems.
  • 発表場所: ケアンズコンベンションセンター・オーストラリア
• [学会発表] Analysis of the mechanism of the amyloid fibril extension through H/D exchange experiment. (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、李映昊、池上貴久、茶谷絵理、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: XXIVth International Conference on Magnetic Resonance in Biological Systems.
  • 発表場所: ケアンズコンベンションセンター・オーストラリア
• [学会発表] Identification of transient intermediates of the formation of the β2-microglobulin amyloid fibril by cross saturation transfer experiment (2010)
  • 著者名/発表者名: 櫻井一正、柳浩太郎、吉村優一、小沼剛、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: XXIVth International Conference on Magnetic Resonance in Biological Systems
  • 発表場所: ケアンズコンベンションセンター、オーストラリア
• [学会発表] Direct observation of minimum-sized amyloid fibrils using solution NMR spectroscopy (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、李映昊、池上貴久、茶谷絵理、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: XXIVth International Conference on Magnetic Resonance in Biological Systems
  • 発表場所: ケアンズコンベンションセンター、オーストラリア
• [学会発表] Analysis of the mechanism of the amyloid fibril extension through H/D exchange experiment (2010)
  • 著者名/発表者名: 柳浩太郎、櫻井一正、李映昊、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: XXIVth International Conference on Magnetic Resonance in Biological Systems
  • 発表場所: ケアンズコンベンションセンター、オーストラリア
• [学会発表] ss2-ミクログロブリンが形成するアミロイド線維の溶液NMRによる運動性の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、茶谷絵理、亀田篤司、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第9回蛋白質科学会
  • 発表場所: 熊本全日空ホテルニュースカイ
  • 年月日: 2009-05-20
• [学会発表] β2-ミクログロブリンが形成するアミロイド線維の溶液NMRによる運動性の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、茶谷絵理、亀田篤司、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第9回蛋白質科学会
  • 発表場所: 熊本全日空ホテルニュースカイ
  • 年月日: 2009-05-20
• [学会発表] SDSL-ESRを用いたアミロイド線維構造に関する研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宗正智、八木寿梓、櫻井一正、内木宏延、荒田敏昭、後藤祐児
  • 学会等名: 日本生物物理学会第47回年会
  • 発表場所: アスティ徳島
• [学会発表] ss2ミクログロブリンが形成するアミロイド線維の溶液NMRによる直接観察 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、茶谷絵理、李映昊、池上貴久、亀田篤司、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 日本生物物理学会第47回年会
  • 発表場所: アスティ徳島
• [学会発表] 重水素交換法を用いたアミロイド線維伸長機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 柳浩太郎、櫻井一正、李映昊、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 日本生物物理学会第47回年会
  • 発表場所: アスティ徳島
• [学会発表] β2ミクログロブリンが形成するアミロイド線維の溶液NMRによる直接観察 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉村優一、櫻井一正、茶谷絵理、李映昊、池上貴久、亀田篤司、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第47回日本生物物理学会年会
  • 発表場所: アスティ徳島
• [学会発表] 重水素交換法を用いたアミロイド線維伸長機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 柳 浩太郎、櫻井一正、李 映昊、池上貴久、内木宏延、後藤祐児
  • 学会等名: 第47回日本生物物理学会年会
  • 発表場所: アスティ徳島
• [学会発表] SDSL-ESRを用いたアミロイド線維構造に関する研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宗正智、八木寿梓、櫻井一正、内木宏延、荒田 敏昭、後藤祐児
  • 学会等名: 第47回日本生物物理学会年会
  • 発表場所: アスティ徳島
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.protein.osaka-u.ac.jp/physical/yoeki.html
• [備考]
  • URL: http://www.protein.osaka-u.ac.jp/physical/yoeki.html