金属トランスポーターを利用した動物細胞工学

• 研究課題/領域番号: 21780309
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用分子細胞生物学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 神戸 大朋 京都大学, 大学院・生命科学研究科, 准教授 (90303875)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2010年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2009年度: 3,120千円 (直接経費: 2,400千円、間接経費: 720千円)
• キーワード: 細胞工学 / 物質生産 / 糖鎖 / マンガン / トランスポーター / 組換え型タンパク質 / 動物細胞 / 微量金属 / 組み換え型タンパク質

研究概要

高度に糖鎖修飾された組換え型タンパク質は動物細胞を用いて生産されるが、生産コストの抑制のため高い生産性を有する株の樹立が求められている。本研究では糖鎖付加効率の改善のため、糖鎖生合成酵素の補因子である亜鉛・マンガンを供給するトランスポーターを同定することを試みた。その結果、カルシウム代謝に重要と目されていたトランスポーターが糖鎖生合成に関与することを示唆する結果が得られ、動物細胞工学の新たな可能性を提示することができた。

研究成果

• [雑誌論文] Tissue non-specific alkaline phosphatase is activated via a two-step mechanism by zinc transport complexes in the early secretory pathway, (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukunaka A, Kurokawa Y, Teranishi F, Sekler I, Oda K, Ackland M. L, Faundez V, Hiromura M, Masuda S, Nagao M, Enomoto S, Kambe T
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 286 ページ: 16363-16373
  • 査読あり
• [雑誌論文] 生体機能における亜鉛トランスポーターの重要性, (2011)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 雑誌名: 亜鉛トランスポーターをめぐる最近の知見-亜鉛栄養治療 1 ページ: 54-64
• [雑誌論文] 分泌経路において機能する亜鉛トランスポーター,-亜鉛酵素の活性化との関わり-」 (2010)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 雑誌名: Biomedical Research on Trace Elements-日本微量元素学会誌 21 ページ: 25-31
  • NAID: 10027734181
  • 査読あり
• [雑誌論文] 亜鉛トランスポーターZnTとZIPの亜鉛輸送機構 (2010)
  • 著者名/発表者名: 福中彩子、神戸大朋
  • 雑誌名: 生化学 82 ページ: 30-34
  • NAID: 10026300213
• [雑誌論文] 分泌経路において機能する亜鉛トランスポーター-亜鉛酵素の活性化との関わり- (2010)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 雑誌名: Biomedical Research on Trace Elements-日本微量元素学会誌 巻: 21 ページ: 25-31
  • NAID: 10027734181
  • 査読あり
• [雑誌論文] 亜鉛トランズポーターZnTとZIPの亜鉛輸送機構 (2010)
  • 著者名/発表者名: 福中彩子、神戸大朋
  • 雑誌名: 生化学 巻: 82 ページ: 30-34
• [雑誌論文] Demonstration and characterization of the hetero-dimerization of ZnT5 and ZnT6 in the early secretory pathway (2009)
  • 著者名/発表者名: Fukunaka A, Suzuki T, Kurokawa Y, Yamazaki T, Fujiwara N, Ishihara K, Migaki H, Okumura K, Masuda S, Yamaguchi-Iwai Y, Nagao M, Kambe T
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 284 ページ: 30798-30806
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fritsche K, and Petris M. J, A roll for the ATP7A copper-transporting ATPase in macrophage bactericidal activity (2009)
  • 著者名/発表者名: White C, Lee J, Kambe T, Fritsche K, Petris M.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 284 ページ: 33949-33956
  • 査読あり
• [雑誌論文] Yifrach O, Hershfinkel M and Sekler I, Identification of the Zn2+ binding site and mode of operation of a mammalian Zn2+ transporter (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohana E, Hoch E, Keisar C, Kambe T
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 284 ページ: 17677-17686
  • 査読あり
• [雑誌論文] SLC39A9 (ZIP9) regulates zinc homeostasis in the secretory pathway : haracterization of the ZIP subfamily I protein in vertebrate cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Matsuura W, Yamazaki T, Yamaguchi-Iwai Y, Masuda S, Nagao M, Andrews G.K, Kambe T
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol. Biochem. 73 ページ: 1142-1148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fulcher Y. G, Sachdev S. W, Bush A. I, Fritsche K, Lee J, Quinn T. P, and Petris M.J, "Copper transport into the secretory pathway is regulated by oxygen in macrophages (2009)
  • 著者名/発表者名: White C, Kambe T
  • 雑誌名: J.Cell.Sci. 122 ページ: 1315-1321
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel proteolytic processing of the ectodomain of the zinc transporter ZIP4 (Slc39a4) during zinc deficiency is inhibited by acrodermatitis enteropathica mutations (2009)
  • 著者名/発表者名: Kambe T, Andrews G.K
  • 雑誌名: Mol Cell Biol. 29 ページ: 129-139
  • 査読あり
• [雑誌論文] 亜鉛トランスポーター研究から見た亜鉛バイオロジー (2009)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 雑誌名: Trace Nutrients Research-微量栄養素研究- 26 ページ: 11-16
  • NAID: 40017002247
• [雑誌論文] 亜鉛の生理機能を司る亜鉛トランスポーター (2009)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 雑誌名: 化学と生物 47 ページ: 545-552
  • NAID: 10026436172
• [雑誌論文] Demonstration and characterization of the hetero-dimerization of ZnT5 and ZnT6 in the early secretory pathway (2009)
  • 著者名/発表者名: Fukunaka A, Suzuki T, Kurokawa Y, Yamazaki T, Fujiwara N, Ishihara K, Migaki H, Okumura K, Masuda S, Yamaguchi-Iwai Y, Nagao M, Kambe T
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 284 ページ: 30798-30806
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of the Zn2+ binding site and mode of operation of a mammalian Zn2+ transporter (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohana E, Hoch E, Keisar C, Kambe T, Yifrach O, Hershfinkel M, Sekler I
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 284 ページ: 17677-17686
  • 査読あり
• [雑誌論文] SLC39A9 (ZIP9) regulates zinc homeostasis in the secretory pathway : Characterization of the ZIP subfamily I protein in vertebrate cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Matsuura W, Yamazaki T, Yamaguchi-Iwai Y, Masuda S, Nagao M, Andrews G.K, Kambe T
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem. 73 ページ: 1142-1148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular and genetic features of zinc transporters in physiology and pathogenesis
  • 著者名/発表者名: Fukada T, Kambe T
  • 雑誌名: Metallomics (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Overview of a Wide Range of Functions of ZnT and Zip Zinc Transporters in the Secretory Pathway
  • 著者名/発表者名: Kambe T
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol. Biochem. (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tissue non-specific alkaline phosphatase is activated via a two-step mechanism by zinc transport complexes in the early secretory pathway
  • 著者名/発表者名: Fukunaka A, Kurokawa Y, Teranishi F, Sekler I, Oda K, Ackland M.L, Faundez V, Hiromura M, Masuda S, Nagao M, Enomoto S, Kambe T
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular and genetic features of zinc transporters in physiology and pathogenesis
  • 著者名/発表者名: Fukada T, Kambe T
  • 雑誌名: Metallomics 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Overview of a Wide Range of Functions of ZnT and Zip Zinc Transporters in the Secretory Pathway
  • 著者名/発表者名: Kambe T
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem. 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] 生体機能における亜鉛トランスポーターの重要性-亜鉛トランスポーターをめぐる最近の知見-
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 雑誌名: 亜鉛栄養治療 巻: (印刷中)
• [学会発表] 生体機能における亜鉛トランスポーターの重要性-亜鉛トランスポーターをめぐる最近の知見- (2011)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambe
  • 学会等名: 第2回近畿亜鉛栄養治療研究会
  • 発表場所: シノテスト大阪支店(大阪府)
  • 年月日: 2011-02-05
• [学会発表] 生体機能における亜鉛トランスポーターの重要性-亜鉛トランスポーターをめぐる最近の知見- (2011)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 第2回近畿亜鉛栄養治療研究会
  • 発表場所: シノテスト大阪支店 (大阪府)
  • 年月日: 2011-02-05
• [学会発表] 分子遺伝学的手法を用いた亜鉛トランスポーターの機能に関する研究 (2011)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 農芸化学会関西支部大会
  • 発表場所: 楽友会館(京都府)
  • 年月日: 2011-02-05
• [学会発表] 分泌経路における亜鉛トランスポーターの役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 北陸合同バイオシンポジウム2010
  • 発表場所: 芦泉荘(福井県)
  • 年月日: 2010-11-13
• [学会発表] Roles of zinc transporters in the early secretory pathway (2010)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambe
  • 学会等名: The 60th Fujihara Seminar : Zinc Signaling and Cellular Functions
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
  • 年月日: 2010-10-29
• [学会発表] Roles of zinc transporters in the early secretory pathway (2010)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambe
  • 学会等名: The 60th Fujihara Seminar : Zinc Signaling and Cellular Functions
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)(招待講演)
  • 年月日: 2010-10-29
• [学会発表] 消化管からの亜鉛吸収に機能するZIPトランスポーターの制御機構 (2010)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 第21回日本微量元素学会学術集会
  • 発表場所: 京都大学百周年時計台記念館(京都府)
  • 年月日: 2010-07-04
• [学会発表] Homeostatic Maintenance of Secretory Pathway Function by Zinc Transport complexes (2010)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambe
  • 学会等名: The 1st PT-ERC(ISPM 2010)
  • 発表場所: Cheongju, Korea
  • 年月日: 2010-06-26
• [学会発表] Homeostatic Maintenance of Secretory Pathway Function by Zinc Transport complexes (2010)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambe
  • 学会等名: The 1st PT-ERC(ISPM 2010)
  • 発表場所: Cheongju, Korea(招待講演)
  • 年月日: 2010-06-26
• [学会発表] 分泌型亜鉛酵素のポロ酵素への変換と亜鉛トランスポーター (2010)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会シンポジウム
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(北海道)
  • 年月日: 2010-06-17
• [学会発表] 分泌型亜鉛酵素のホロ酵素への変換と亜鉛トランスポーター (2010)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会シンポジウム
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(北海道)
  • 年月日: 2010-06-17
• [学会発表] Regulation of mammalian SLC39A transporters-Zinc-regulated processing of mZIP4- (2010)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambe
  • 学会等名: Japan/Korea Joint Symposium on Life Science
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 2010-05-28
• [学会発表] Regulation of mammalian SLC39A transporters-Zinc-regulated processing of mZIP4- (2010)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambe
  • 学会等名: Japan/Korea Joint Symposium on Life Science
  • 発表場所: Seoul, Korea(招待講演)
  • 年月日: 2010-05-28
• [学会発表] 分子遺伝学的手法を用いた亜鉛トランスポーターの機能に関する研究 (2010)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 日本農芸化学会2010年度大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-03-27
• [学会発表] ZIPとZnT-亜鉛の生理機能を統御する亜鉛トランスポーター- (2010)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 北陸大学学術フロンティア講演会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2010-01-29
• [学会発表] Regulation of mammalian SLC39A transporters-Zinc-regulated processing of mZIP4 (2009)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambe, Glen K.Andrews
  • 学会等名: International society for Zinc Biology 2009 meeting
  • 発表場所: イスラエル(エルサレム)
  • 年月日: 2009-12-05
• [学会発表] Regulation of mammalian SLC39A transporters -Zinc-regulated processing of mZIP4 (2009)
  • 著者名/発表者名: Taiho Kambem, Glen K.Andrews
  • 学会等名: International society for Zinc Biology 2009 meeting
  • 発表場所: イスラエル(エルサレム)
  • 年月日: 2009-12-05
• [学会発表] 生体微量金属ホメオスタシスとその輸送システム (2009)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会シンポジウム
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] 亜鉛トランスポーター研究から見た亜鉛バイオロジー (2009)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: メタルチオネインおよびメタルバイオサイエンス研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-10-16
• [学会発表] 分泌経路における亜鉛酵素の活性化機構-亜鉛トランスポーターによる制御- (2009)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 第20回日本微量元素学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-07-03
• [学会発表] 亜鉛トランスポーター研究から始まった亜鉛バイオロジーの新たな展開 (2009)
  • 著者名/発表者名: 神戸大朋
  • 学会等名: 第26回日本微量栄養素学会学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-05-30
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.lif.kyoto-u.ac.jp/labs/seitaijoho/