低侵襲かつ客観的、定量的に測定可能なバイオマーカー探索技術の開発

• 研究課題/領域番号: 21790173
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 医療系薬学
• 研究機関: 独立行政法人医薬基盤研究所
• 研究代表者: 鎌田 春彦 独立行政法人医薬基盤研究所, 創薬基盤研究部, サブプロジェクトリーダー (00324509)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2010年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2009年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: バイオマーカー / プロテオーム解析 / 膜蛋白質 / ビオチンラベル化 / 肝炎

研究概要

疾患発症の分子メカニズムに基づいた画期的治療薬の開発に期待が寄せられている一方、疾患の治療方針を決定するためのバイオマーカーは数少なく、『低侵襲かつ客観的、定量的に計測出来る臨床評価』のための有効なバイオマーカー開発が待ち望まれている。疾患の診断には疾患組織に効率よく集積する抗体等の分子プローブが必要不可欠であるが、分子プローブの標的となる有効なバイオマーカー探索技術基盤が未熟なため、効率よく病巣部位を可視化できる分子プローブは殆どないのが現状である。そこで本課題では、『低侵襲かつ客観的、定量的に計測出来る臨床評価』の確立を目的に、疾患の診断に有効なバイオマーカーを探索するための技術開発を行った。我々独自の方法であるin vivo biotinylation法を用いて、GalN/TNF投与により肝炎を誘導したモデルマウスのプロテオーム解析を行った。その結果、500種類以上もの有用なマーカー候補分子を見出した。今後、これらの結果をもとに、上記バイオマーカーと肝炎との連関ならびに、診断法の確立等に有効活用する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Creation of an improved mutant TNF with TNFR1-selectivity and antagonistic activity by phage display technology. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nomura T., Abe Y., Kamada H., Inoue M., Kawara T., Arita S., Furuya T., Minowa K., Yoshioka Y., Shibata H., Kayamuro H., Yamashita T., Nagano K., Yoshikawa T., Mukai Y., Nakagawa S., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Pharmazie 65(2) ページ: 93-96
• [雑誌論文] Generation of mouse macrophages expressing membrane-bound TNF variants with selectivity for TNFR1- or TNFR2. (2010)
  • 著者名/発表者名: Shibata H., Abe Y., Yoshioka Y., Nomura T., Sato M., Kayamuro H., Kawara T., Arita S., Furuya T., Nagano K., Yoshikawa T., Kamada H., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Cytokine 50(1) ページ: 75-83
• [雑誌論文] An in vitro method for screening anti-platelet agents using a microchannel array flow analyzer. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kamada H., Okamoto T., Hayashi T., Suzuki K.
  • 雑誌名: Biorheology 47(2) ページ: 153-161
• [雑誌論文] Size-dependent cytotoxic effects of amorphous silica nanoparticles on Langerhans cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nabeshi H., Yoshikawa T., Matsuyama K., Nakazato Y., Arimori A., Isobe M., Tochigi S., Kondoh S., Hirai T., Akase T., Yamashita T., Yamashita K., Yoshida T., Nagano K., Abe Y., Yoshioka Y., Kamada H., Imazawa T., Itoh N., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Pharmazie 65(3) ページ: 199-201
• [雑誌論文] Mutant TNF-alpha, mTNF-K90R, is a novel mucosal vaccine adjuvant candidate against HIV. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H., Abe Y., Yoshioka Y., Katayama K., Yoshida T., Yamashita K., Yoshikawa T., Kawai Y., Mayumi T., Hiroi T., Itoh N., Nagano K., Kamada H., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Pharmazie 65(4) ページ: 254-6
• [雑誌論文] Carbon nanotubes elicit DNA damage and inflammatory response relative to their size and shape. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamashita K., Yoshioka Y., Higashisaka K., Morishita Y., Yoshida T., Fujimura M., Kayamuro H., Nabeshi H., Yamashita T., Nagano K., Abe Y., Kamada H., Kawai Y., Mayumi T., Yoshikawa T., Itoh N., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Inflammation 33(4) ページ: 276-80
• [雑誌論文] Urban aerosol induce pro-inflammatory cytokine production in macrophages and cause airway inflammation in vivo. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T., Yoshioka Y., Fujimura M., Kayamuro H., Yamashita K., Higashisaka K., Nakanishi R., Morishita Y., Nabeshi H., Yamashita T., Muroi M., Tanamoto K., Nagano K., Abe Y., Kamada H., Kawai Y., Mayumi T., Itoh N., Yoshikawa T., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biol.Pharm.Bull. 33(5) ページ: 780-3
  • NAID: 130000248036
• [雑誌論文] Arsenic trioxide alters expression and oxidative modification of the proteome in leukemic cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nabeshi H., Yoshikawa T., Kamada H., Shibata H., Sugita T., Abe Y., Nagano K., Nomura T., Minowa K., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Pharmazie 65 ページ: 702-707
• [雑誌論文] The IL-1 family cytokines as mucosal vaccine adjuvant for the induction of protective immunity against influenza virus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H., Yoshioka Y., Abe Y., Arita S., Katayama K., Nomura T., Yoshikawa T., Kubota-Koketsu R., Ikuta K., Okamoto S., Mori Y., Kunisawa J., Kiyono H., Itoh N., Nagano K., Kamada H., Tsutsumi Y., Tsunoda S.
  • 雑誌名: J.Virol. 84(24) ページ: 12703-12712
• [雑誌論文] Potential adjuvant effect of intranasal urban aerosols in mice through induction of dendritic cell maturation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T., Yoshioka Y., Fujimura M., Yamashita K., Higashisaka K., Nakanishi R., Morishita Y., Kayamuro H., Nabeshi H., Nagano K., Abe Y., Kamada H., Tsunoda S., Yoshikawa T., Itoh N., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Toxicol.Lett. 199(3) ページ: 383-388
• [雑誌論文] In vivo biotinylation of the vasculature in B cell lymphoma identifies BST-2 as a target for antibody-based therapy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Schliemann C., Roesli C., Kamada H., Borgia B., Fugmann T., Klapper W., Neri D.
  • 雑誌名: Blood 115(3) ページ: 736-744
• [雑誌論文] An in vitro method for screening anti-platelet agents using a microchannel array flow analyzer. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Biorheology 巻: 47 ページ: 156-161
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo biotinylation of the vasculature in B cell lymphoma identifies BST-2 as a target for antibody-based therapy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Schliemann C., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Blood 巻: 115 ページ: 736-744
  • 査読あり
• [雑誌論文] Arsenic trioxide induces down-regulation of gp46 via protein oxidation : proteomics analysis of oxidative modified proteins in As2O3-treated HTLV-1-infected cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nabeshi H., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Pharmazie 巻: 65 ページ: 702-707
  • 査読あり
• [雑誌論文] Creation of an improved mutant TNF with TNFR1-selectivity and antagonistic activity by phage display technology. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nomura T., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Pharmazie 巻: 65 ページ: 93-96
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of mouse macrophages expressing membrane-bound TNF variants with selectivity for TNFR1- or TNFR2 (2010)
  • 著者名/発表者名: Shibata H., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Cytokine 巻: 50 ページ: 75-83
  • 査読あり
• [雑誌論文] Size-dependent cytotoxic effects of amorphous silica nanoparticles on Langerhans cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nabeshi H., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Pharmazie 巻: 65 ページ: 199-201
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutant TNF-alpha, mTNF-K90R, is a novel mucosal vaccine adjuvant candidate against HIV. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Pharmazie 巻: 65 ページ: 254-256
  • 査読あり
• [雑誌論文] Carbon nanotubes elicit DNA damage and inflammatory response relative to their size and shape. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamashita K., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Inflammation 巻: 33 ページ: 276-280
  • 査読あり
• [雑誌論文] Urban aerosol induce pro-inflammatory cytokine production in macrophages and cause airway inflammation in vivo. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Biol.Pharm.Bull. 巻: 33 ページ: 780-783
  • NAID: 130000248036
  • 査読あり
• [雑誌論文] The IL-1 family cytokines as mucosal vaccine adjuvant for the induction of protective immunity against influenza virus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H, Kamada H., et al.
  • 雑誌名: J.Virol 巻: 84 ページ: 12703-12712
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potential adjuvant effect of intranasal urban aerosols in mice through induction of dendritic cell maturation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T., Kamada H., et al.
  • 雑誌名: Toxicol.Lett. 巻: 199 ページ: 383-388
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure-function relationship of tumor necrosis factor (TNF) and its receptor interaction based on 3D structural analysis of a fully active TNFR1-selective TNF mutant. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y., Shibata H., Nakamura T., Yoshioka Y., Abe Y., Nomura T., Taniai M., Ohta T., Ikemizu S., Nakagawa S., Tsunoda S., Kamada H., Yamagata Y., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: J.Mol.Biol. 385 ページ: 1221-1229
• [雑誌論文] The specific effect of 2-Methoxyestradiol on lymphatic vascular endothelial cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Imai S., Yoshida Y., Okamura T., Nagano K., Abe Y., Yoshikawa T., Kamada H., Nakagawa S., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Pharmazie 64(3) ページ: 214-6
• [雑誌論文] Rapid isolation of intrabody candidates by using an optimized non-immune phage antibody library. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nagano K., Imai S., Mukai Y., Nakagawa S., Abe Y., Kamada H., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Pharmazie 64(4) ページ: 238-41
• [雑誌論文] Crystallization and preliminary X-ray analysis of TNF-TNFR2 complex, Acta. Crystallogr. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y., Nakamura T., Yoshioka Y., Tsunoda S., Kamada H., Nakagawa S., Yamagata Y., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Sect.F. 65(Pt3) ページ: 295-8
• [雑誌論文] The augmentation of intracellular delivery of peptide therapeutics by artificial protein transduction domains. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshikawa T., Sugita T., Mukai Y., Yamanada N., Nagano K., Nabeshi H., Shibata H., Yoshioka Y., Nakagawa S., Kamada H., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biomaterials. 30(19) ページ: 3318-23
• [雑誌論文] Fast binding kinetics and conserved 3D structure underlie the antagonistic activity of mutant TNF : useful information for designing artificial proteo-antagonists. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y., Nakamura T., Yoshioka Y., Shibata H., Abe Y., Nomura T., Taniai M., Ohta T., Nakagawa S., Tsunoda S., Kamada H., Yamagata Y., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: J.Biochem. 146(2) ページ: 167-72
  • NAID: 10026302534
• [雑誌論文] TNF superfamily member, TL1A, is a potential mucosal vaccine adjuvant. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H., Yoshioka Y., Abe Y., Katayama K., Yoshida T., Yamashita K., Yoshikawa T., Hiroi T., Itoh N., Kawai Y., Mayumi T., Kamada H., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 384(3) ページ: 296-300
• [雑誌論文] Arsenic trioxide has the inhibitory effect on transmission of human T-cell leukemia virus type 1. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nabeshi H., Yoshikawa T., Kamada H., Shibata H., Sugita T., Abe Y., Nagano K., Nomura T., Minowa K., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biol.Pharm.Bull. 32(7) ページ: 1286-8
• [雑誌論文] The use of a mutant TNF-alpha as a vaccine adjuvant for the induction of mucosal immune responses. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H., Abe Y., Yoshioka Y., Katayama K., Yoshida T., Yamashita K., Yoshikawa T., Hiroi T., Itoh N., Kawai Y., Kamada H., Nagano K., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biomaterials 30(29) ページ: 5869-5876
• [雑誌論文] Novel protein engineering strategy for creating highly receptor-selective mutant TNFs. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nomura T., Abe Y., Kamada H., Inoue M., Kawara T., Arita S., Furuya T., Yoshioka Y., Shibata H., Kayamuro H., Yamashita T., Nagano K., Yoshikawa T., Mukai Y., Nakagawa S., Taniai M., Ohta T., Tsunoda S., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 30;388(4) ページ: 667-71
• [雑誌論文] The treatment of established murine collagen-induced arthritis with a TNFR1-selective antagonistic mutant TNF. (2009)
  • 著者名/発表者名: Shibata H., Yoshioka Y., Abe Y., Ohkawa A., Nomura T., Minowa K., Mukai Y., Nakagawa S., Taniai M., Ohta T., Tsunoda S., Kamada H., Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biomaterials. 30(34) ページ: 6638-6647
• [雑誌論文] Improved protein sequence coverage by on resin deglycosylation and cysteine modification for biomarker discovery. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kamada H., Fugmann T., Neri D., Roesli C.
  • 雑誌名: Proteomics 9(3) ページ: 783-787
• [雑誌論文] Improved protein sequence coverage by on resin deglycosylation and cysteine modification for biomarker discovery. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kamada H., Fugmann T., et. al
  • 雑誌名: Proteomics 9 ページ: 783-787
  • 査読あり
• [雑誌論文] The treatment of established murine collagen-induced arthritis with a TNFR1-selective antagonistic mutant TNF. (2009)
  • 著者名/発表者名: Shibata H., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: Biomaterials 30 ページ: 6638-6647
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure-function relationship of tumor necrosis factor (TNF) and its receptor interaction based on 3D structural analysis of a fully active TNFR 1-selective TNF mutant. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: J.Mol.Biol. 385 ページ: 1221-1229
  • 査読あり
• [雑誌論文] The specific effect of 2-Methoxyestradiol on lymphatic vascular endothelial cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Imai S., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: Pharmazie 64 ページ: 214-216
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapid isolation of intrabody candidates by using an optimized non-immune phage antibody library. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nagano K., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: Pharmazie 64 ページ: 238-241
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystallization and preliminary X-ray analysis of TNF-TNFR2 complex. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: Acta.Crystallogr.Sect.F. 65(Pt.3) ページ: 295-298
  • 査読あり
• [雑誌論文] The augmentation of intracellular delivery of peptide therapeutics by artificial protein transduction domains. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshikawa T., Kamada H., et.al
  • 雑誌名: Biomaterials 30 ページ: 3318-3323
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fast binding kinetics and conserved 3D structure underlie the antagonistic activity of mutant TNF : useful information for designing artificial proteo-antagonists. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: J.Biochem 146 ページ: 167-172
  • NAID: 10026302534
  • 査読あり
• [雑誌論文] TNF superfamily member, TLIA, is a potential mucosal vaccine adjuvant. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H., Kamada H., et.al
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 384 ページ: 296-300
  • 査読あり
• [雑誌論文] Arsenic trioxide has the inhibitory effect on transmission of human T-cell leukemia virus type 1 (2009)
  • 著者名/発表者名: Nabeshi H., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: Biol.Pharm.Bull. 32 ページ: 1286-1288
  • 査読あり
• [雑誌論文] The use of a mutant TNF-alpha as a vaccine adjuvant for the induction of mucosal immune responses. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: Biomaterials 29 ページ: 5869-5873
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel protein engineering strategy for creating highly receptor-selective mutant TNFs. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nomura T., Kamada H., et. al
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 388 ページ: 667-671
  • 査読あり
• [学会発表] 抗体工学を駆使した創薬ターゲットの探索技術 (2011)
  • 著者名/発表者名: 鎌田春彦
  • 学会等名: 日本薬学会第131年会
  • 発表場所: 静岡
• [学会発表] 抗体工学を駆使した創薬ターゲットの探索技術 (2011)
  • 著者名/発表者名: 鎌田春彦
  • 学会等名: 日本薬学会 第131年会
  • 発表場所: 静岡
• [学会発表] イオンモビリティー質量分析法を用いた抗体医薬品の構造とその生物活性の変化に関する基礎検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鎌田春彦, 廣瀬賢治, 押方基二, 佐藤太, 長野一也, 阿部康弘, 堤康央, 角田慎一
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 北海道
• [学会発表] イオンモビリティー質量分析法を用いた抗体医薬品の構造とその生物活性の変化に関する基礎検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鎌田春彦, など
  • 学会等名: 第10回 日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 北海道
• [学会発表] イオンモビリティー質量分析法を用いた蛋白質医薬品の品質管理に向けた基礎検討. (2009)
  • 著者名/発表者名: 鎌田春彦, ら
  • 学会等名: 第9回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2009-05-22
• [学会発表] イオンモビリティー質量分析法による蛋白質医薬品の構造と活性の連関解析. (2009)
  • 著者名/発表者名: 鎌田春彦, ら
  • 学会等名: 第57回日本質量分析総合討論会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-05-13
• [学会発表] イオンモビリティー質量分析法による蛋白質医薬品の構造と活性の連関解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 鎌田春彦, 廣瀬賢治, 阿部康弘, 角田慎一, 堤康央
  • 学会等名: 第57回日本質量分析総合討論会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] イオンモビリティー質量分析法を用いた蛋白質医薬品の品質管理に向けた基礎検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 鎌田春彦, 廣瀬賢治, 阿部康弘, 角田慎一, 堤康央
  • 学会等名: 第9回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 熊本
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.nibio.go.jp/bio-r/index.htm
• [備考]
  • URL: http://www.nibio.go.jp/LPP_HP/index.htm
• [備考]
  • URL: http://www.nibio.go.jp/LPP_HP/index.htm