エンドセリン受容体作動性TRPCチャネルの機能制御機構及び病態生理的役割の解明

• 研究課題/領域番号: 21790236
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 薬理学一般
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 堀之内 孝広 北海道大学, 大学院・医学研究科, 講師 (20307771)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2011年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2010年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2009年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: エンドセリン受容体 / TRPCチャネル / 受容体作動性Ca^<2+>流入 / ストア作動性Ca^<2+>流入 / カルモジュリン / プロテインキナーゼA / リン酸化 / エンドセリンA型受容体 / 抑制性制御機構 / Phos-tag / in vitro kinase assay / カルシウムイオン / HEK293細胞 / エンドセリン受容体結合蛋白質 / STIM1 / ORAI1 / 蛋白-蛋白相互作用

研究概要

本研究では,エンドセリンA型受容体(ET_AR)作動性チャネルとして機能するTRPCチャネルの機能制御機構について検討した。その結果,(1) TRPC3及びTRPC6がET_AR作動性Ca^<2+>チャネルとして機能すること,(2) G_<q/11>タンパク質,ホスホリパーゼC, Src, PI3キナーゼ,カルモジュリン(CaM)及びCaM/IP_3受容体結合ドメインがTRPC3/6を介した受容体作動性Ca^<2+>流入に関与すること,(3)プロテインキナーゼAによるTRPC6の28番目のセリン残基のリン酸化によって, TRPC6の機能が抑制されること,を明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Adenylate cyclase/cAMP/protein kinase A signaling pathway inhibits endothelin type A receptor-operated Ca^<2+> entry mediated via transient receptor potential canonical 6 channels (2012)
  • 著者名/発表者名: Horinouchi, T., Higa, T., Aoyagi, H., Nishiya, T., Terada, K., Miwa, S.
  • 雑誌名: J. Pharmacol. Exp. Ther 巻: 340 ページ: 143-151
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nicotine- and tar-free cigarette smoke induces cell damage through reactive oxygen species newly generated by PKC-dependent activation of NADPH oxidase (2012)
  • 著者名/発表者名: Asano H., et al.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 巻: 118 ページ: 275-287
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adenylate cyclase/cAMP/protein kinase A signaling pathway inhibits endothelin type A receptor-operated Ca^<2+> entry mediated via transient receptor potential canonical 6 channels (2012)
  • 著者名/発表者名: Horinouchi T., et al.
  • 雑誌名: The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 巻: 340 ページ: 143-151
  • 査読あり
• [雑誌論文] Function and regulation of endothelin type a receptor-operated transient receptor potential canonical channels (2011)
  • 著者名/発表者名: Horinouchi, T., Terada, K., Higa, T., Aoyagi, H., Nishiya, T., Suzuki, H., Miwa, S.
  • 雑誌名: J. Pharmacol. Sci. 巻: 117 ページ: 295-306
  • NAID: 10030453850
  • 査読あり
• [雑誌論文] Function and regulation of endothelin type A receptor-operated transient recepto potential canonical channels (2011)
  • 著者名/発表者名: Horinouchi T., et al.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 巻: 117 ページ: 295-306
  • 査読あり
• [雑誌論文] The ECS(SPSB) E3 ubiquitin ligase is the master regulator of the lifetime of inducible nitric-oxide synthase (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto K., et al.
  • 雑誌名: Biochemical and biophysical research communications 巻: 409 ページ: 46-51
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of inducible nitric oxide synthase by the SPRY domain- and SOCS box-containing proteins (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishiya T., et al.
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 巻: 286 ページ: 9009-9019
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of cigarette smoke components on vascular smooth muscle cell migration toward platelet-derived growth factor BB (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoshiyama S., et al.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 巻: 115 ページ: 532-535
  • 査読あり
• [雑誌論文] Juvenile stress attenuates the dorsal hippocampal postsynaptic 5-HT1A receptor function in adult rats (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki H., et al.
  • 雑誌名: Psychopharmacology (Berl) 巻: 214 ページ: 329-337
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of inducible nitric oxide synthase by the SPRY domain- and SOCS box-containing proteins. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishiya T, Matsumoto K, Maekawa S, Kajita E, Horinouchi T, Fujimuro M, Ogasawara K, Uehara T, Miwa S.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 巻: 286 ページ: 9009-9019
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endothelin type B receptor-induced sustained Ca^<2+> influx involves G_<q/11>/phospholipase C-independent, p38 mitogen-activated protein kinase-dependent activation of Na^+/H^+exchanger (2010)
  • 著者名/発表者名: Higa, T., Horinouchi, T., Aoyagi, H., Asano, H., Nishiya, T., Nishimoto, A., Muramatsu, I., Miwa, S.
  • 雑誌名: J. Pharmacol. Sci. 巻: 113 ページ: 276-280
  • NAID: 10029889450
  • 査読あり
• [雑誌論文] Jab1 regulates levels of endothelin type A and B receptors by promoting ubiquitination and degradation (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishimoto, A., Lu, L., Hayashi, M., Nishiya, T., Horinouchi, T., Miwa, S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 391 ページ: 1616-1622
  • NAID: 120001909636
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endothelin type B receptor-induced sustained Ca^<2+> influx involves G_<q/11>/phospholipase C-independent, p38 mitogen-activated protein kinase-dependent activation of Na^+/H^+ exchanger. (2010)
  • 著者名/発表者名: Higa T, Horinouchi T, Aoyagi H, Asano H, Nishiya T, Nishimoto A, Muramatsu I, Miwa S.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 巻: 113 ページ: 276-280
  • NAID: 10029889450
  • 査読あり
• [雑誌論文] Jab1 regulates levels of endothelin type A and B receptors by promoting ubiquitination and degradation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishimoto A, Lu L, Hayashi M, Nishiya T, Horinouchi T, Miwa S.
  • 雑誌名: Biochemical and biophysical research communications 巻: 391 ページ: 1616-1622
  • NAID: 120001909636
  • 査読あり
• [雑誌論文] Jab1 regulates levels of endothelin type A and B receptors by promoting ubiquitination and degradation (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishimoto A, Lu L, Hayashi M, Nishiya T, Horinouchi T, Miwa S.
  • 雑誌名: Biochemical and biophysical research communications 391 ページ: 1616-1622
  • NAID: 120001909636
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential coupling of human endothelin type A receptor to G_<q/11> and_G<12> proteins : the functional significance of receptor expression level in generating multiple receptor signaling (2009)
  • 著者名/発表者名: Horinouchi, T., Asano, H., Higa, T., Nishimoto, A., Nishiya, T., Muramatsu, I., Miwa, S.
  • 雑誌名: J. Pharmacol. Sci. 巻: 111 ページ: 338-351
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential coupling of human endothelin type A receptor to G_<q/11> and G_<12> proteins : the functional significance of receptor expression level in generating multiple receptor signaling (2009)
  • 著者名/発表者名: Horinouchi T, Asano H, Higa T, Nishimoto A, Nishiya T, Muramatsu I, Miwa S.
  • 雑誌名: Journal of Pharmacological Sciences 111 ページ: 338-351
  • NAID: 10026154456
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pharmacological evaluation of ocular β-adrenoceptors in rabbit by tissue segment binding method (2009)
  • 著者名/発表者名: Horinouchi T, Morishima S, Tanaka Y, Koike, K, Miwa S, Muramatsu I.
  • 雑誌名: Life Sciences 84 ページ: 181-187
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gタンパク質共役型受容体を介した持続性Ca^<2+>流入の活性化機構:エンドセリンA型受容体を中心に (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広・三輪聡一
  • 雑誌名: 日本薬理学雑誌 134 ページ: 8-12
  • NAID: 10025741036
• [学会発表] ニコチン・タール除去タバコ煙水抽出液によるNADPHオキシダーゼ依存性細胞傷害の分子メカニズム (2012)
  • 著者名/発表者名: 眞井洋輔, 他8名
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 国立京都国際会館(京都)
  • 年月日: 2012-03-16
• [学会発表] PKAリン酸化によるエンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの抑制性制御機構 (2012)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 他5名
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 国立京都国際会館(京都)
  • 年月日: 2012-03-15
• [学会発表] エンドセリンA型受容体刺激によって誘発されるTRPC3及びTRPC6チャネルを介した受容体作動性Ca^<2+>流入の制御機構 (2012)
  • 著者名/発表者名: 比嘉綱己, 他5名
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 国立京都国際会館(京都)
  • 年月日: 2012-03-15
• [学会発表] エンドセリン受容体の動態制御におけるユビキチン修飾の役割 (2012)
  • 著者名/発表者名: 寺田晃士, 他2名
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 国立京都国際会館(京都)
  • 年月日: 2012-03-15
• [学会発表] PKAリン酸化によるエンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの抑制性制御機構 (2012)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,青柳裕之,寺田晃士,西屋禎,三輪聡一
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 国立京都国際会館,京都
  • 年月日: 2012-03-14
• [学会発表] プロテインキナーゼAによるTRPC6チャネルを介したエンドセリンA型受容体作動性Ca^<2+>流入の抑制性制御の分子機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 比嘉綱己, 他5名
  • 学会等名: 第21回日本循環薬理学会
  • 発表場所: 岡山大学創立五十周年記念館(岡山)
  • 年月日: 2011-12-02
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの抑制性機能制御に関与するPKAリン酸化部位の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 他5名
  • 学会等名: 第39回薬物活性シンポジウム
  • 発表場所: 福岡大学福大メディカルホール(福岡)
  • 年月日: 2011-11-21
• [学会発表] Phos-tag^<TM> biotinを用いたエンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルのPKAによるリン酸化部位の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 他5名
  • 学会等名: 第62回日本薬理学会北部会
  • 発表場所: 江陽グランドホテル(仙台)
  • 年月日: 2011-09-29
• [学会発表] 誘導型NO合成酵素のユビキチン・プロテアソーム依存性分解制御機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松本一馬, 他7名
  • 学会等名: 第25回北海道薬物作用談話会
  • 発表場所: 酪農学園大学(北海道)
  • 年月日: 2011-07-23
• [学会発表] アデニル酸シクラーゼ/cAMP/PKA系によるエンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの負の制御機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 比嘉綱己, 西屋禎, 青柳裕之, 鈴木浩之, 西本新, 三輪聡一
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
  • 発表場所: (震災のため,誌上開催)
  • 年月日: 2011-03-24
• [学会発表] SPRY domainとSOCS boxタンパク質による誘導型一酸化窒素合成酵素の分解制御機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 西屋禎, 松本一馬, 前川聡, 堀之内孝広, 藤室雅弘, 小笠原康悦, 上原孝, 三輪聡一
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
  • 発表場所: (震災のため,誌上開催)
  • 年月日: 2011-03-23
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの抑制性機能制御に関与するPKAリン酸化部位の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,寺田晃士,比嘉綱己,青柳裕之,西屋禎,三輪聡一
  • 学会等名: 第39回薬物活性シンポジウム
  • 発表場所: 福岡大学福大メディカルホール,福岡
• [学会発表] Phos-tag^<TM> biotinを用いたエンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルのPKAによるリン酸化部位の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広・比嘉綱己・青柳裕之・西屋禎・寺田晃士・三輪聡一
  • 学会等名: 第62回日本薬理学会北部会
  • 発表場所: 江陽グランドホテル,仙台
• [学会発表] アデニル酸シクラーゼ/cAMP/PKA系によるエンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの負の制御機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,西屋禎,青柳裕之,鈴木浩之,西本新,三輪聡一
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの多様な機能制御機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,西屋禎,青柳裕之,鈴木浩之,西本新,三輪聡一
  • 学会等名: 第40回日本心脈管作動物質学会
  • 発表場所: かがわ国際会議場・サンポートホール高松,香川
• [学会発表] cAMP/PKA系によるエンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの抑制性機能制御 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,青柳裕之,鈴木浩之,西屋禎,西本新,三輪聡一
  • 学会等名: 第61回日本薬理学会北部会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター,札幌
  • 年月日: 2010-09-10
• [学会発表] cAMP/PKA系によるエンドセリンA型受容体作動性TRPC6チャネルの抑制性機能制御 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 比嘉綱己, 青柳裕之, 鈴木浩之, 西屋禎・西本新・三輪聡一
  • 学会等名: 第61回日本薬理学会北部会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(北海道)
  • 年月日: 2010-09-10
• [学会発表] Molecular mechanism of ET_AR-operated Ca^<2+> entry via TRPC channels and visualization of homo- and heteromeric TRPC3/6 interaction in living cells using BiFC. (2010)
  • 著者名/発表者名: Horinouchi, T., Higa, T., Aoyagi, H., Asano, H., Nishiya, T., Nishimoto, A., Miwa, S.
  • 学会等名: 16th World Congress of Basic and Clinical Pharmacology.
  • 発表場所: Bella Center(デンマーク)
  • 年月日: 2010-07-19
• [学会発表] 蛍光タンパク質再構成法によるエンドセリンA型受容体作動性TRPC3/6チャネルの分子間相互作用の可視化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 比嘉綱己, 朝野拓史, 西屋禎, 西本新, 三輪聡一
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
  • 年月日: 2010-03-18
• [学会発表] 受容体結合蛋白質Jab1によるエンドセリン受容体の発現レベル調節 (2010)
  • 著者名/発表者名: 西本新, 西屋禎, 堀之内孝広, 三輪聡一
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
  • 年月日: 2010-03-18
• [学会発表] TRPC3及びTRPC6チャネルを介したエンドセリンA型受容体作動性Ca2+流入の分子機構 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 比嘉綱己, 朝野拓史, 西本新, 西屋禎, 三輪聡一
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
  • 年月日: 2010-03-17
• [学会発表] TRPC3及びTRPC6チャネルを介したエンドセリンA型受容体作動性Ca^<2+>流入の分子機構 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,朝野拓史,西本新,西屋禎,三輪聡一
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪国際会議場,大阪
• [学会発表] 蛍光タンパク質再構成法によるエンドセリンA型受容体作動性TRPC3/6チャネルの分子間相互作用の可視化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,朝野拓史,西屋禎,西本新,三輪聡一
  • 学会等名: 第83回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 大阪国際会議場,大阪
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性Ca^<2+>流入に関与するTRPCチャネルの活性化機 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,朝野拓史,西本新,西屋禎,三輪聡一
  • 学会等名: 第19回日本循環薬理学会
  • 発表場所: 京都大学百周年時計台記念館,京都
  • 年月日: 2009-11-27
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性Ca^<2+>流入に関与するTRPCチャネルの活性化機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 比嘉綱己, 朝野拓史, 西本新, 西屋禎, 三輪聡一
  • 学会等名: 第19回日本循環薬理学会
  • 発表場所: 京都大学百周年時計台記念館(京都府)
  • 年月日: 2009-11-27
• [学会発表] 受容体結合蛋白質Jab1によるエンドセリン受容体の発現レベル調節機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 西本新, 西屋禎, 堀之内孝広, 三輪聡一
  • 学会等名: 第19回日本循環薬理学会
  • 発表場所: 京都大学百周年時計台記念館(京都府)
  • 年月日: 2009-11-27
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性TRPCチャネルの活性制御機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 比嘉綱己, 朝野拓史, 西本新, 西屋禎, 三輪聡一
  • 学会等名: 第37回薬物活性シンポジウム
  • 発表場所: 東北薬科大学(宮城県)
  • 年月日: 2009-10-09
• [学会発表] 受容体結合蛋白質Jab1によるエンドセリンA型受容体の発現レベル調節機構とその病態的意義 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三輪聡一, 西本新, 西屋禎, 堀之内孝広
  • 学会等名: 第37回薬物活性シンポジウム
  • 発表場所: 東北薬科大学(宮城県)
  • 年月日: 2009-10-09
• [学会発表] 蛍光タンパク質再構成法を用いたエンドセリンA型受容体作動性TRPCチャネルの分子間相互作用の可視化 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,朝野拓史,西本新,西屋禎,三輪聡一
  • 学会等名: 第60回日本薬理学会北部会
  • 発表場所: 富山国際会議場,富山
  • 年月日: 2009-09-26
• [学会発表] 蛍光タンパク質再構成法を用いたエンドセリンA型受容体作動性TRPCチャネルの分子間相互作用の可視化 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 比嘉綱己, 朝野拓史, 西本新, 西屋禎, 三輪聡一
  • 学会等名: 第60回日本薬理学会北部会
  • 発表場所: 富山国際会議場(富山県)
  • 年月日: 2009-09-26
• [学会発表] 受容体結合蛋白質Jab1によるエンドセリン受容体の発現レベル調節機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 西本新, 西屋禎, 堀之内孝広, 三輪聡一
  • 学会等名: 第60回日本薬理学会北部会
  • 発表場所: 富山国際会議場(富山県)
  • 年月日: 2009-09-26
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性Ca^<2+>流入に関与するTRPCチャネルの同定と機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,朝野拓史,西本新,西屋禎,三輪聡一
  • 学会等名: 第2回北大若手研究者交流会
  • 発表場所: 北海道大学,札幌
  • 年月日: 2009-07-17
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性Ca^<2+>流入に関与するTRPCチャネルの同定と機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広, 比嘉綱己, 朝野拓史, 西本新, 西屋禎, 三輪聡一
  • 学会等名: 第2回北大若手研究者交流会
  • 発表場所: 北海道大学(北海道)
  • 年月日: 2009-07-17
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性Ca^<2+>流入に関与するTRPCチャネルの同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 比嘉綱己, 堀之内孝広, 朝野拓史, 西本新, 西屋禎, 三輪聡一
  • 学会等名: 第23回北海道薬物作用談話会
  • 発表場所: 北海道大学(北海道)
  • 年月日: 2009-07-11
• [学会発表] エンドセリンA型受容体作動性TRPCチャネルの活性制御機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀之内孝広,比嘉綱己,朝野拓史,西本新,西屋禎,三輪聡一
  • 学会等名: 第37回薬物活性シンポジウム
  • 発表場所: 東北薬科大学,宮城県,仙台
• [備考]
  • URL: http://saibo-yakuri.med.hokudai.ac.jp/
• [備考]
  • URL: http://saibo-yakuri.med.hokudai.ac.jp/
• [備考]
  • URL: http://saibo-yakuri.med.hokudai.ac.jp/
• [備考]
  • URL: http://saibo-yakuri.med.hokudai.ac.jp/index.html