C型とD型ボツリヌス菌ホスホリパーゼCの三次元構造と機能解析

• 研究課題/領域番号: 21790421
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 細菌学(含真菌学)
• 研究機関: 宮崎大学 (2010); 岡山大学 (2009)
• 研究代表者: 阪口 義彦 宮崎大学, IR推進機構, 助教 (70403491)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2010年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2009年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: ボツリヌス菌 / ホスホリパーゼC / ウエルシュ菌α毒素 / 卵黄活性 / 溶血活性 / ホスファチジルコリン / スフィンゴミエリン / リポソーム

研究概要

ボツリヌス菌は、産生する神経毒素の抗原性の違いによりA～G型に分類される。このうち、C型とD型菌はウエルシュ菌の重要な病原因子であるα毒素と類似の活性を示すホスホリパーゼC(PLC)を産生する。今回、C型とD型菌のそれぞれのPLC遺伝子の全塩基配列を決定した。得られた配列情報を基に、組換えC型とD型PLCを発現・精製し、酵素活性(卵黄活性, 溶血活性など),生物活性(マウス致死活性)を測定した。

研究成果

• [雑誌論文] A new cytosolicpathway from a Parkinsondisease-associated kinase, BRPK/PINK1:activation of AKT via MTORC2. (2011)
  • 著者名/発表者名: Murata, H., Sakaguchi, M., Jin, Y., Sakaguchi, Y., Futami, J., Yamada, H., Kataoka, K., Huh, NH.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 286(9) ページ: 7182-7189
  • 査読あり
• [雑誌論文] A new cytosolic pathway from a Parkinson disease-associated kinase, BRPK/PINK1 : activation of AKT via mTORC2 (2011)
  • 著者名/発表者名: Murata, H., Sakaguchi, M., Jin, Y., Sakaguchi, Y., Futami, J.I., Yamada, H., Kataoka, K., Huh, N.H.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 巻: 286 ページ: 7182-7189
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transcriptionalregulation of a brown adipocyte-specificgene, UCP1, by KLF11 and KLF15. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto, K., Sakaguchi, M., Medina, RJ., Niida A., Sakaguchi, Y., Miyazaki, M., Kataoka, K., Huh, NH.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 400(1) ページ: 175-180
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transcriptional regulation of a brown adipocyte-specificgene, UCP1, by KLF11 and KLF15 (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto, K., Sakaguchi, M., Medina, R.J., Niida, A., Sakaguchi, Y., Miyazaki, M., Kataoka, K., Huh, N.H.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 巻: 400 ページ: 175-180
  • 査読あり
• [雑誌論文] Binding and internalization of Clostridium botulinuR C2 toxin (2009)
  • 著者名/発表者名: Nagahama.M., Hagiyama.T., Kojima.T., Aoyanagi, K., Takahashi, C., Oda, M., Sakaguchi.Y., Oguma.K., Sakurai, J.
  • 雑誌名: Infection and Immunity 77(11) ページ: 51395148-51395148
  • 査読あり
• [学会発表] ボツリヌス菌ホスホリパーゼCの酵素活性と生物活性, BMB2010 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 小田真隆, Ni Nengah DwiFatmawati, 山本由弥子, 唐澤忠宏, 小林敬子, 永浜政博, 櫻井純, 小熊惠二
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [学会発表] 多機能受容体RAGEの下流信号伝達機構の解明, BMB2010 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口政清, 村田等, 山本健一, 小野智之, 阪口義彦, 本山晃, 日比野利彦, 片岡健, 許南浩
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [学会発表] A型ボツリヌス神経毒素の三叉神経節培養細胞への結合と取り込み (2010)
  • 著者名/発表者名: 山本由弥子, 張凱, Ni Nengah DwiFatmawati, 申蓮花, 馬少博, 阪口義彦, 鈴木智典, 小熊惠二
  • 学会等名: 第63回日本細菌学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 松山大学(松山市)
• [学会発表] ボツリヌス菌ホスホリパーゼCの酵素活性と生物活性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 小田真隆, Ni Nengah DwiFatmawati, 山本由弥子, 難波ひかる, 唐澤忠宏, 小林敬子, 永浜政博, 櫻井純, 小熊惠二
  • 学会等名: 第57回トキシンシンポジウム
  • 発表場所: 長浜ロイヤルホテル(滋賀)<招待講演>
• [学会発表] C型とD型ボツリヌス毒素を支配するバクテリオファージのゲノム解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦
  • 学会等名: 第3回ファージ研究会
  • 発表場所: 大阪大学蛋白質研究所(大阪)
• [学会発表] ボツリヌス菌ホスホリパーゼCの酵素活性と生物活性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 小田真隆, Ni Nengah Dwi Fatmawati, 山本由弥子, 難波ひかる, 唐澤忠宏, 小林敬子, 永浜政博, 櫻井純, 小熊恵二
  • 学会等名: 第57回トキシンシンポジウム
  • 発表場所: 長浜ロイヤルホテル(滋賀)
• [学会発表] ボツリヌス菌ホスホリパーゼCの酵素活性と生物活性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 小田真隆, Ni Nengah Dwi Fatmawati, 山本由弥子, 唐澤忠宏, 小林敬子, 永浜政博, 櫻井純, 小熊恵二
  • 学会等名: BMB2010,第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [学会発表] 多機能受容体RAGEの下流信号伝達機構の解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口政清, 村田等, 山本健一, 小野智之, 阪口義彦, 本山晃, 日比野利彦, 片岡健, 許南浩
  • 学会等名: BMB2010,第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
• [学会発表] G型ボツリヌス毒素遺伝子をコードするプラスミドの解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 林哲也, 中山恵介, 山本由弥子, 難波ひかる, 細見晃司, 幸田知子, 向本雅郁, 小崎俊司, 小熊恵二
  • 学会等名: 第4回 日本ゲノム微生物学会年会
  • 発表場所: 九州大学医学部キャンパス百年講堂(福岡)
• [学会発表] G型ボツリヌス毒素遺伝子をコードするプラスミドの解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 林哲也, 山本由弥子, 難波ひかる, 中山恵介, 馬少博, 張凱, 幸田知子, 小崎俊司, 小熊恵二
  • 学会等名: 第83回 日本細菌学会総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
• [学会発表] ボツリヌス菌C2毒素によるPI3K/Aktシグナル伝達系の活性化とエンドサイトーシスにおける役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小林敬子, 高橋千尋, 永浜政博, 青柳晃平, 小田真隆, 小熊恵二, 阪口義彦, 櫻井純
  • 学会等名: 第83回 日本細菌学会総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
• [学会発表] C型とD型ポツリヌスC2毒素遺伝子をコードするプラスミドの解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 林哲也, 山本由弥子, 中山恵介, 馬少博, 張凱, 田村臣哉, 小熊恵二
  • 学会等名: 第56回 トキシン(毒素)シンポジウム
  • 発表場所: アルモニーテラッセ(岐阜)
• [学会発表] ボツリヌス菌C2毒素のエンドサイトーシスにおけるPI3K/Aktシグナル伝達系の役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高橘千尋, 永浜政博, 青柳晃平, 小林敬子, 小田真隆, 小熊恵二, 阪口義彦, 櫻井純
  • 学会等名: 第56回 トキシン(毒素)シンポジウム
  • 発表場所: アルモニーテラッセ(岐阜)
• [学会発表] G型ボツリヌス毒素遺伝子をコードするプラスミドの解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 林哲也, 山本由弥子, 難波ひかる, 中山恵介, 馬少博, 張凱, 田村臣哉, 小熊恵二
  • 学会等名: 第62回 日本細菌学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 広島大学霞キャンパス広仁会館(広島)
• [学会発表] コレラに対するニワトリ抗体(IgY)の有用性(第2報) (2009)
  • 著者名/発表者名: 平井一行, 衛藤友美, 長町榮子, 綾田潔, 山本由弥子, 阪口義彦, 横田憲治, 小熊恵二
  • 学会等名: 第62回 日本細菌学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 広島大学霞キャンパス広仁会館(広島)
• [学会発表] MOLECULAR ANALYSIS OF AN EXTRACHROMOSOMAL ELEMENT CONTAINING THE C2 TOXIN GENE DICOVERED IN CLOSTRIDIUM BOTULINUN TYPE C (2009)
  • 著者名/発表者名: Y.Sakaguchi, T.Hayashi, Y.Yamamoto, H.Namba, K.Nakayama, K.Zhang, S.Ma E.Nagamachi, K.Oguma
  • 学会等名: 6th ClostPath International Conference
  • 発表場所: Istituto Superiore diSanita. Rome (Italy)
• [学会発表] C型とD型ボッリヌス菌ボスホリパーゼCの酵素活性と生物活性 (2009)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦, 小田真隆, 山本由弥子, 難波ひかる, 馬少博, 張凱, 田村臣哉, 唐澤忠宏, 小林敬子, 永浜政博, 櫻井純, 小熊恵二
  • 学会等名: 第32回 日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
• [備考] ホームページ等