トリインフルエンザ制圧に向けたインフルエンザM2特異的ヒト抗体の単離と機能解析

• 研究課題/領域番号: 21790767
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 呼吸器内科学
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 小澤 龍彦 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 助教 (10432105)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2010年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2009年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
• キーワード: インフルエンザ / M2 / 抗体医薬 / インフルエザ

研究概要

我々はISAAC法を用い、インフルエンザワクチン接種ボランティアよりインフルエンザM2eと結合する抗体のスクリーニングを行った。その結果、M2eと結合するAb1-10を得た。その機能解析を行った結果、季節性ウイルスのみならず、トリ型や2009年のパンデミック型にも結合することが示された。さらにin vitroにおいて抗ウイルス能が示された。これらの結果はAb1-10が有用な抗体医薬候補であることを示唆している。

研究成果

• [雑誌論文] Rapid isolation of antigen-specific antibody-secreting cells using a chip-based immunospot array. (2011)
  • 著者名/発表者名: Jin A, Ozawa T, Tajiri K, Obata T, Kishi H, Muraguchi A.
  • 雑誌名: Nat Protoc 6(5) ページ: 668-676
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of the epitope and neutralizing capacity of human monoclonal antibodies induced by hepatitis B vaccine. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tajiri K, Ozawa T, Jin A, Tokimitsu Y, Minemura M, Kishi H, Sugiyama T, Muraguchi A.
  • 雑誌名: Antiviral Res 87(1) ページ: 40-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Post-translational modification of TRAIL receptor type 1 on various tumor cells and the susceptibility of tumors to TRAIL-induced apoptosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Lin Z, Jin A, Ozawa T, Tajiri K, Obata T, Ishida I, Jin F, Kishi H, Muraguchi A.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 395(2) ページ: 251-257
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of TRAIL-receptor 1-specific human monoclonal Ab by a combination of immunospot array assay on a chip and human Ab-producing mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: Jin A, Ozawa T, Tajiri K, Lin Z, Obata T, Ishida I, Kishi H, Muraguchi A.
  • 雑誌名: Eur J Immunol equal contribution 40(12) ページ: 3591-3593
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of TRAIL-receptor 1-specific human monoclonal Ab by a combination of immunospot array assay on a chip and human Ab-producing mice (2010)
  • 著者名/発表者名: A.Jin, et.al.
  • 雑誌名: Eur J Immunol 巻: 40 ページ: 3591-3593
  • 査読あり
• [雑誌論文] Post-translational modification of TRAIL receptor type 1 on various tumor cells and the susceptibility of tumors to TRAIL-induced apoptosis (2010)
  • 著者名/発表者名: Z.Lin., et.al
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 395 ページ: 251-257
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of the epitope and neutralizing capacity of human monoclonal antibodies induced by hepatitis B vaccine (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Tajiri, et.al
  • 雑誌名: Antiviral Res 巻: 87 ページ: 40-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of antigen-specific B cells by concurrent monitoring of intracellular Ca^2+ mobilization and antigen binding with microwell array chip system equipped with a CCD imager. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita K, Ozawa T, Tajiri K, Kadowaki S, Kishi H, Muraguchi A.
  • 雑誌名: Cytometry A equal contribution 75(8) ページ: 682-687
  • 査読あり
• [雑誌論文] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: A.Jin^*, T.Ozawa^*, K.Tajiri^*, et.al.^* : equal contribution
  • 雑誌名: Nature Medicine 15 ページ: 1088-1092
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of antigen-specific B cells by concurrent monitoring of intracellular Ca^<2+> mobilization and antigen binding with microwell arraychip system equipped with a CCD imager. (2009)
  • 著者名/発表者名: K.Kinoshita^*, T.Ozawa^*, et.al.^* : equal contribution
  • 雑誌名: Cytometry part A 75 ページ: 682-687
  • 査読あり
• [学会発表] Enhancement of TRAIL-induced apoptosis with novel TRAIL-Receptor 1 specific human mAbs generated by Immunospot array assay on a chip. (2011)
  • 著者名/発表者名: Jin A, Kobayashi E, Ozawa T, Tajiri K, Kishi H, Muraguchi A
  • 学会等名: Keystone Symposia
  • 発表場所: Keystone, USA.
• [学会発表] Characterization of human anti-influenza M2 antibody obtained from peripheral blood of vaccinated volunteer. (2011)
  • 著者名/発表者名: Muraguchi A, Ozawa T, Jin A, Tajiri K, Takemoto M, Okuda T, Siraki K, Kishi H.
  • 学会等名: Keystone Symposia
  • 発表場所: Keystone, USA.
• [学会発表] Enhancement of TRAIL-induced apoptosis with novel TRAIL-Receptor 1 specific human mAbs generated by Immunospot array assay on a chip (2011)
  • 著者名/発表者名: A.Jin, et.al
  • 学会等名: Keystone Symposia
  • 発表場所: Keystone (USA)
• [学会発表] Characterization of human anti-influenza M2 antibody obtained from peripheral blood of vaccinated volunteer (2011)
  • 著者名/発表者名: A.Muraguchi, et.al
  • 学会等名: Keystone Symposia
  • 発表場所: Keystone (USA)
• [学会発表] ヒト から単離したインフルエンザM2e特異的抗体の機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小澤龍彦, 金艾順, 田尻和人, 武本眞清, 奥田智子, 白木公康, 岸裕幸, 村口篤
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Helios gene involvement in t(2;14)(q34;32) in an adult T-cell leukemia (ATL) cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujimoto R, Ozawa T, Kuraishi Y, Itoyama T, Sadamori N, Isobe M.
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Isolation and characterization of a fully human monoclonal antibody against extracellular domain of matrix protein 2 of influenza A virus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T, Jin A, Tajiri K, Takemoto M, Okuda T, Siraki K, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Conferences Asia
  • 発表場所: Suzhou, China.
• [学会発表] Enhancement of TRAIL-induced apoptosis with novel TRAIL-receptor 1 specific human mAbs generated by immunospot array assay on a chip. (2010)
  • 著者名/発表者名: Jin A, Ozawa T, Tajiri K, Lin Z, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Conferences Asia
  • 発表場所: Suzhou, China.
• [学会発表] Characterization of human anti-influenza M2 antibody obtained from peripheral blood of vaccinated volunteer. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T, Jin A, Tajiri K, Siraki K, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: Kobe.
• [学会発表] The novel method to detect single cytokine-secreting T-cell using a cell-microarray chip. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tajiri K, Hatakeyama S, Kobayashi E, Ozawa T, Jin A, Kishi H, Sugiyama T, Muraguchi A.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: Kobe.
• [学会発表] Single T cell analysis system for rapid cloning and functional evaluation of antigen-specific T cell receptors. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi E, Hatakeyama S, Horii M, Tajiri K, Ozawa T, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: Kobe.
• [学会発表] Enhancement of TRAIL-induced apoptosis with novel TRAIL-R1-specific human mAbs generated by immunospot array assay on a chip. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kishi H, Jin A, Ozawa T, Tajiri K, Lin Z, Obata T, Ishida I, Muraguchi A.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: Kobe.
• [学会発表] Detection of antigen-specific T-cell response on the single cell-basis with microwell array chip. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kishi H, Tajiri K, Hatakeyama S, Kobayashi E, Horii M, Jin A, Ozawa T, Muraguchi A.
  • 学会等名: 4th Measuring Antigen-Specific Immune Response (MASIR) Conference
  • 発表場所: Mykonos, Greece.
• [学会発表] Rapid and efficient cloning and functional evaluation system for antigen-specific T cell receptor obtained from single T-cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Horii M, Kobayashi E, Hatakeyama S, Ozawa T, Tajiri K, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: 4th Measuring Antigen-Specific Immune Response (MASIR) Conference
  • 発表場所: Mykonos, Greece.
• [学会発表] ヒトから単離したインフルエンザM2e特異的抗体の機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小澤龍彦, 他
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] Characterization of human anti-influenza M2 antibody obtained from peripheral blood of vaccinated volunteer (2010)
  • 著者名/発表者名: T.Ozawa, et.al
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] Isolation and characterization of a fully human monoclonal antibody against extracellular domain of matrix protein 2 of influenza A virus (2010)
  • 著者名/発表者名: T.Ozawa, et.al
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Asia Canference
  • 発表場所: Suzhou(China)
• [学会発表] Enhancement of TRAIL-induced apoptosis with novel TRAIL-receptor 1 specific human mAbs generated by immunospot array assay on a chip (2010)
  • 著者名/発表者名: A.Jin, et.al
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Asia Canference
  • 発表場所: Suzhou(China)
• [学会発表] Helios gene involvement in t(2;14)(q34;32) in an adult T-cell leukemia (ATL) cells (2010)
  • 著者名/発表者名: R.Fujimoto, et.al
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] The novel method to detect single cytokine-secreting T-cell using a cell-microarray chip (2010)
  • 著者名/発表者名: K.Tajiri, et.al
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] Single T cell analysis system for rapid cloning and functional evaluation of antigen-specific T cell receptors (2010)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi, et.al
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] Enhancement of TRAIL-induced apoptosis with novel TRAIL-R1-specific human mAbs generated by immunospot array assay on a chip (2010)
  • 著者名/発表者名: H.Kishi, et.al
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸市)
• [学会発表] Rapid and efficient cloning and functional evaluation system for antigen-specific T cell receptor obtained from single T-cells (2010)
  • 著者名/発表者名: M.Horii, et.al
  • 学会等名: 4th Measuring Antigen-Specific Immune Response (MASIR) Conference
  • 発表場所: Mykonos (Greece)
• [学会発表] Detection of antigen-specific T-cell response on the single cell-basis with microwell array chip (2010)
  • 著者名/発表者名: H.Kishi, et.al
  • 学会等名: 4th Measuring Antigen-Specific Immune Response (MASIR) Conference
  • 発表場所: Mykonos (Greece)
• [学会発表] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T, Jin A, Tajiri K, Obata T, Kondo S, Kinoshita K, Kadowaki S, Takahashi K, Sugiyama T, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] 成人T細胞白血病リンパ腫の発症にはHelios遺伝子の発現異常が関与する (2009)
  • 著者名/発表者名: 藤本理加, 小澤龍彦, 黒澤信幸, 磯部正治
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: Jin A, Ozawa T, Tajiri K, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: IBCOs 20th Annual International Conference Antibody Engineering
  • 発表場所: San Diego, USA.
• [学会発表] Isolation of human anti-influenza M2 antibody from peripheral blood of healthy volunteer. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T, Tajiri K, Jin A, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] HBワクチンにより得られたモノクローナル抗体のHBV中和活性とエピトープ解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 田尻和人, 小澤龍彦, 金艾順, 岸裕幸, 村口篤
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 単一細胞レベルにおけるB細胞受容体シグナル解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 岸裕幸, 小澤龍彦, 田尻和人, 村口篤
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: Jin A, Ozawa T, Tajiri K, Kishi H, Muraguchi A.
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Extracellular loop domain of small (S)-HBsAg play a major role in preventing the infection of HBV : the result from comprehensive analysis of monoclonal antibodies obtained from S-HBsAg-vaccinated healthy individuals. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tajiri K, Ozawa T, Jin A, Tokimitsu Y, Nakayama Y, Minemura M, Kishi H, Sugiyama T, Muraguchi A.
  • 学会等名: The 8th JSH Single Topic Conference
  • 発表場所: Tokyo.
• [学会発表] B-cell receptor signal analysis at single cell levels using a microwell-array chip. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita K, Kishi H, Fukurotani K, Honda R, Ozawa T, Tajiri K, Muraguchi A.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Meeting
  • 発表場所: New York, USA.
• [学会発表] Isolation of human anti-influenza M2 antibody from peripheral blood of healthy volunteer. (2009)
  • 著者名/発表者名: T.Ozawa, et.al.
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会学総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
• [学会発表] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: A.Jin, et.al.
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会学総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
• [学会発表] 単一細胞レベルにおけるB細胞受容体シグナル解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: H.Kishi, et.al.
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会学総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
• [学会発表] HBワクチンにより得られたモノクローナル抗体のHBV中和活性とエピトープ解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: K.Tajiri, et.al.
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会学総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)
• [学会発表] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: T.Ozawa, et.al.
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
• [学会発表] 成人T細胞白血病リンパ腫の発症にはHelios遺伝子の発現異常が関与する (2009)
  • 著者名/発表者名: R.Fujimoto, et.al.
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)