滑膜肉腫幹細胞の同定・解析と新規分子標的治療への応用

• 研究課題/領域番号: 21791383
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 整形外科学
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 木村 太一 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教 (90435959)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2010年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2009年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 滑膜肉腫 / 癌幹細胞 / 腫瘍幹細胞 / Sphere cultur / Side population / Sphere culture

研究概要

無血清・低接着条件によるsphere形成法を用いて滑膜肉腫幹細胞の分離・濃縮を試み、幹細胞性の有無の指標として、Oct3,Nanog,Sox2等の幹細胞性の維持にかかわる遺伝子群の発現量を半定量的RT-PCR法により確認したところ、形成されたsphereにおいて有意に発現量の増加を認めた。次にsphere成分とnon-sphere成分をNOD/SCIDマウスの皮下に移植し腫瘍形成能の検討を行った結果、sphere群で有意に高い腫瘍形成能が見られた。また両者のgene expression profileの比較解析を行い幹細胞マーカー候補となりうる表面抗原を複数同定した。候補分子に対する特異抗体及びセルソーターを用いて陽性群と陰性群を分離したところ陽性群で有意に高い造腫瘍能を認めた。
我々は初めて滑膜肉腫細胞株において腫瘍幹細胞様の性質を有する細胞群を分離・濃縮する事に成功し、滑膜肉腫幹細胞マーカーの同定にも成功した。このことは滑膜肉腫における新規治療標的を探索する上で極めて重要な発見であると考える。

研究成果

• [雑誌論文] DOCK2 regulates cell proliferation through Rac and ERK activation in B cell lymphoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Wang, L., Nishihara, H., Kato, Y., Kimura, T., Tanino, M., Nishio, M., Endo, T., Koike, T., Tanaka, S.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res.Commun. 395 ページ: 111-115
  • NAID: 120002148671
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of an alternative human CD133 promoter reveals the implication of Ras/ERK pathway in tumor stem-like hallmarks. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tabu, K., Kimura, T., Sasai, K., Wang, L., Bizen, N., Nishihara, H., Taga, T., Tanaka, S.
  • 雑誌名: Mol.Cancer. 9 ページ: 39-54
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sudden death of a patient with pandemic influenza (A/H1N1pdm) virus infection by acute respiratory distress syndrome. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takiyama, A., Wang, L., Tanino, M., Kimura, T., Kawagishi, N., Kunieda, Y., Katano, H., Nakajima, N., Hasegawa, H., Takagi, T., Nishihara, H., Sata, T., Tanaka, S.
  • 雑誌名: Jpn.J.Infect.Dis. 63 ページ: 72-74
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sudden Death of a Patient with Pandemic Influenza (A/H1N1pdm) Virus Infection by Acute Respiratory Distress Syndrome. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takiyama, A
  • 雑誌名: Jpn J Infect Dis. 巻: 63 ページ: 72-74
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of an alternative human CD133 promoter reveals the implication of Ras/ERK pathway in tumor stem-like hallmarks. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tabu, K
  • 雑誌名: Mol Cancer. 巻: 19 ページ: 39-54
  • 査読あり
• [雑誌論文] DOCK2 regulates cell proliferation through Rac and ERK activation in B cell lymphoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Wang L
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 395 ページ: 111-115
  • 査読あり
• [雑誌論文] Colonic metastasis from primary carcinoma of the lung : report of a case and review of Japanese literature. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ono, H., Okabe, M., Kimura, T., Kawakami, M., Nakamura, K., Dnajo, Y., Takasugi, H., Nishihara, H.
  • 雑誌名: Clin.J.Gastroenterol. 2 ページ: 89-95
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human synovial sarcoma proto-oncogene Syt is essential for early embyonic development through the regulation of cell migration. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kimura, T., Sakai, M., Tabu, K., Wang, L., Tsunematsu, R., Tsuda, M., Sawa, H., Nagashima, K., Nishihara, H., Hatakeyama, S., Nakayama, K., Ladanyi, M., Tanaka, S., Nakayama, KI.
  • 雑誌名: Lab.Invest. 89 ページ: 645-656
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human synovial sarcoma proto-onocogene Syt is essential for early embrvonic development through the regulation of cell migration (2009)
  • 著者名/発表者名: Kimura, T.
  • 雑誌名: Lab.Invest. 89 ページ: 645-656
  • 査読あり
• [雑誌論文] Colonic metastasis from primary carcinoma of the lung : report of case and review of Japanese literature (2009)
  • 著者名/発表者名: Ono, H.
  • 雑誌名: Clin.J.Gastroenterol 2 ページ: 89-95
  • 査読あり
• [学会発表] 腫瘍形成におけるoncogene-induced Senescence回避の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高阪真路、笹井研、高橋健太、赤城剛、谷野美智枝、木村太一、西原広史、田中伸哉
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場
• [学会発表] CrkL plays a pivotal role in tumoregenesis of the oral squamous cell carcinoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiroko, Nakamura, Hiroshi, Nishihara, Taichi, Kimura, Kei, Wang, Satoshi, Fukuda, Shinya Tanaka.
  • 学会等名: 第69回日本癌化学会学術総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場
• [学会発表] DOCK2 regulates cell proliferation Through Rac and ERKactivation in B cell Lymphoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Wang L,Nishihara H, kimura T, Tanino M,Nishio M, Obara M,Endo T, KoikeT, Tanaka S.
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場
• [学会発表] Analysis of escape from oncogene-induced senescence in tumorigenesis (2010)
  • 著者名/発表者名: Shinji Kohsaka, ken Sasai, Kenta Takahashi, Tsuyoshi Akagi, Mishie Tanino, Taichi Kimura, Hiroshi Nishihara, Shinya Tanaka.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratori Meeting ; Mechanisms and Models of Cancer
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, USA
• [学会発表] Analysis of stem-like cell features of human synovial sarcoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Taichi kimura, Lei Wang, Miho Nodagashira, Hiroko Nakamura, Mishie Tanino, Hiroshi Nishihara, Shinya Tanaka.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratori Meeting ; Mechanisms and Models of Cancer
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, USA
• [学会発表] 捺印標本を用いたグリオーマのMGMT免疫染色の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 青柳瑛子、王磊、笹井研、谷野美智枝、木村太一、西原広史、藤本真、石井伸明、伊東民雄、田中伸哉
  • 学会等名: 第51回日本臨床細胞学会総会(春期大会)
  • 発表場所: パシフィコ横浜
• [学会発表] 新WHO分類に基づmalignant glioma 65症例のreview:組織像と全生存率の関連について (2010)
  • 著者名/発表者名: 菅野宏美、西原広史、谷野美智枝、木村太一、高橋健太、山口秀、成田拓人、小林浩之、寺坂俊介、田中伸哉
  • 学会等名: 第28回日本脳腫瘍病理学会
  • 発表場所: 大阪市中央公会堂
• [学会発表] 神経症状を初発とし診断に苦慮した血管内リンパ腫の一例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 泉真祐子、長谷川祐太、高阪真路、谷野美智枝、木村太一、古山裕康、千葉進、及川光照、西原広史、田中伸哉
  • 学会等名: 第99回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル
• [学会発表] 放射線治療後7年間生存し得た原発性悪性心膜中皮腫の一例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 谷野美智枝、ロシャン・マハビール、菅野宏美、鈴木宏明、山城勝重、木村太一、西原広史、丸川活史、松野吉宏、田中伸哉
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 京王プラザホテル
• [学会発表] 神経膠腫のパラフィン包埋切片を用いたFISH法による1番短腕の欠失の遺伝子解析と予後の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 佐藤真実、谷野美智枝、木村太一、西原広史、伊東民雄、佐和広基、金子貞男、村田純一、加藤正仁、田中伸哉
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 京王プラザホテル
• [学会発表] Gliomaに特徴的な血管構造の臨床病理学的解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 菅野宏美、西原広史、谷野美智枝、木村太一、田中伸哉
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 京王プラザホテル
• [学会発表] 脊髄腫瘍として発見され、ユーイング肉腫との鑑別を要したmyeloid sarcomaの一例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 湯澤明夏、柴田ひな、菅野宏美、谷野美智枝、矢野俊介、木村太一、西原広史、田中伸哉
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 京王プラザホテル
• [学会発表] 新型インフルエンザ(A/H1N1pdm)肺炎によるびまん性肺胞傷害により急死した1剖検例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 瀧山晃弘、王磊、谷野美智枝、木村太一、西原広史、川岸直樹、國枝保幸、片野晴隆、長谷川秀樹、高木知敬、佐多徹太郎、田中伸哉
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 京王プラザホテル
• [学会発表] シグナル伝達分子のImmunoprofiling;胃癌20例における臨床病理学的検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 石川麻倫、大場彩音、西原広史、菅野宏美、木村太一、谷野美智枝、田中伸哉
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 京王プラザホテル
• [学会発表] シグナル伝達分子のImmunoprofiling;胃癌20例における臨床病理学的検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 石川麻倫
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 東京 京王プラザホテル
• [学会発表] 新型インフルエンザ(A/H1N1pdm)肺炎によるびまん性肺胞傷害により急死した1剖検例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 瀧山晃弘
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 東京 京王プラザホテル
• [学会発表] 脊髄腫瘍として発見され、ユーイング肉腫との鑑別を要したmyeloid sarcomaの一例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 湯澤明夏
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 東京 京王プラザホテル
• [学会発表] Gliomaに特徴的な血管構造の臨床病理学的解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 菅野宏美
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 東京 京王プラザホテル
• [学会発表] 神経膠腫のパラフィン包埋切片を用いたFISH法による1番短腕の欠失の遺伝子解析と予後の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 佐藤真実
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 東京 京王プラザホテル
• [学会発表] 放射線治療後7年間生存し得た原発性悪性心膜中皮腫の一例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 谷野美智枝
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 東京 京王プラザホテル
• [学会発表] 神経症状を初発とし診断に苦慮した血管内リンパ腫の一例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 泉真祐子
  • 学会等名: 第99回日本病理学会
  • 発表場所: 東京 京王プラザホテル
• [学会発表] 新WHO分類に基づくmalignant glioma 65症例のreview:組織像と全生存率の関連について (2010)
  • 著者名/発表者名: 菅野宏美
  • 学会等名: 第28回日本脳腫瘍病理学会
  • 発表場所: 大阪 大阪市中央公会堂
• [学会発表] 捺印標本を用いたグリオーマのMGMT免疫染色の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 青柳瑛子
  • 学会等名: 第51回日本臨床細胞学会総会
  • 発表場所: 横浜 パシフィコ横浜
• [学会発表] DOCK2 regulates cell proliferation through Rac and ERK activation in B cell lymphoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Wang L
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪 大阪国際会議場
• [学会発表] CrkL plays a pivotal role in tumoregenesis of the oral squamous cell carcinoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiroko Nakamura
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪 大阪国際会議場
• [学会発表] Analysis of stem-like cell features of human synovial sarcoma (2010)
  • 著者名/発表者名: Taichi Kimura
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratori Meeting ; Mechanisms and Models of Cancer Aug.
  • 発表場所: Cole Spring Harbor Laboratori, USA
• [学会発表] Analysis of escape from oncogene-induced senescence in tumorigenesis (2010)
  • 著者名/発表者名: Shinji Kohsaka
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratori Meeting ; Mechanisms and Models of Cancer Aug.
  • 発表場所: Cole Spring Harbor Laboratori, USA
• [学会発表] 腫瘍形成におけるoncogene-induced senescence回避の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高阪真路
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪 大阪国際会議場
• [学会発表] Quantitative Proteome Analysis in Transformed Astrocyte Cells using Spectral Counting and SILAC Methods (2009)
  • 著者名/発表者名: Kiyonaga Fujii
  • 学会等名: Pennsylvanvia Convention Center
  • 発表場所: フィラデルフィア Philadelphia, Pennsylvania, USA
  • 年月日: 2009-05-31
• [学会発表] グリオーマにおける Olig2 発現制御機構と機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 野田頭未歩
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都 国立京都国際会館
  • 年月日: 2009-05-01
• [学会発表] hCG産生大腸癌の分子病理学的検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉永智彰
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都 国立京都国際会館
  • 年月日: 2009-05-01
• [学会発表] Clostridium 属によるガス壊疽により死亡した2剖検例 (2009)
  • 著者名/発表者名: 石川麻倫
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都 国立京都国際会館
  • 年月日: 2009-05-01
• [学会発表] 間質性肺炎の経過中、急性に呼吸不全が悪化し死亡された11剖検例の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 谷野美智枝
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都 国立京都国際会館
  • 年月日: 2009-05-01
• [学会発表] 滑膜肉腫細胞株におけるCD133の機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 木村太一
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都 国立京都国際会館
  • 年月日: 2009-05-01
• [学会発表] Quantitative Proteome Analysis in Transformed Astrocyte Cell using Spectral Counting and SILAC Methods. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kiyonaga Fujii, Ken Sasai, Taichi Kimura, Shinya Tanaka, Fuyuhiko Inagaki.
  • 学会等名: Pennsylvanvia Convention Center.
  • 発表場所: Philadelphia, Pennsylvania, USA
• [学会発表] 滑膜肉腫細胞株におけるCD133の機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 木村太一、王磊、平賀博明、西原広史、田中伸哉
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
• [学会発表] 間質性肺炎の経過中、急性に呼吸不全が悪化し死亡された11剖検例の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 谷野美智枝、高阪真路、木村太一、西原広史、進藤正信、田中伸哉
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
• [学会発表] Clostridium属によるガス壊疽により死亡した2剖検例 (2009)
  • 著者名/発表者名: 石川麻倫、柴田頌太、谷野美智枝、木村太一、西原広史、篠原敏也、田中伸哉
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
• [学会発表] hCG産生大腸癌の分子病理学的検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉永智彰、西原広史、福島祐介、佐和弘基、村上普美、木村太一、谷野美智枝、田中伸哉
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
• [学会発表] グリオーマにおかえるOlig2発現制御機構と機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 野田頭未歩、笹井研、木村太一、青柳瑛子、田中伸哉
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館