| 研究課題/領域番号 |
21H03804
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分90110:生体医工学関連
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| 研究機関 | 茨城大学 |
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研究代表者 |
長山 和亮 茨城大学, 理工学研究科(工学野), 教授 (10359763)
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| 研究分担者 |
上杉 薫 茨城大学, 理工学研究科(工学野), 助教 (20737027)
山城 義人 国立研究開発法人国立循環器病研究センター, 研究所, 室長 (70751923)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
17,550千円 (直接経費: 13,500千円、間接経費: 4,050千円)
2023年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2022年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2021年度: 8,840千円 (直接経費: 6,800千円、間接経費: 2,040千円)
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| キーワード | 細胞バイオメカニクス / メカノバイオロジー / 細胞核 / 細胞骨格 / DNA / ＤＮＡ |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究は，研究代表者らが世界に先駆けて見出した「細胞骨格と核の力学的な繋がり」のメカニズムとその生理学的な意義を明らかにしていく．すなわち，細胞骨格と核の「繋がり」は，細胞の様々な力学応答の感度を決めるキーファクターであり，ある時は積極的に核の中に力を伝えて遺伝子発現を促進させ，またある時は核を力学的に保持して不要な遺伝子を眠らせるといった，生体恒常性の“切り換えスイッチ” を担う可能性が高い．この考えを立証するために，独自の細胞マニピュレーション技術と遺伝子レベルの生化学分析技術を融合した実験系を構築し，細胞骨格と核の「繋がり」に基づく細胞の恒常性の維持・破綻のメカニズムの解明に挑む．
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| 研究実績の概要 |
血管の恒常性の維持と破綻のメカニズムを明らかにすべく，独自の細胞マニピュレーション実験系を構築しながら，血管平滑筋細胞における「細胞骨格と核の力 学的な繋がり」のメカニズムとその生理学的な意義を明らかにしていくことを目的としている．従来では，高血圧に起因する様々な血管疾患の発生機序を明らかにするという観点から，血管組織から細胞を摘出し，培養皿などで平面培養して用いるin vitro研究が数多く進められてきている．しかし，一般的な平面培養系では細胞の脱分化が促進され，細胞の形や向きがバラバラで細胞の移動性も高まり，生体内の力学的な構造を考慮した培養環境とはほど遠いと言わざるを得ない．そこで本研究の2年目では，実際の動脈壁内の力学的環境（エラスチンを主体とする弾性板に平滑筋細胞が挟まれながら円周方向に配列している）を考慮して，細胞の配列組織化を誘導するためのマイクロ溝基板を作製した．この基板の溝凹部のみに細胞接着タンパク質をコートして血管平滑筋細胞を培養すると，溝の凹部に細胞が拘束され，著しく伸長した細胞配列組織が形成された．このとき，細胞核も実際の動脈壁内で観察される血管平滑筋細胞と同様に極めて細長い形態となり，核の体積も平面培養時の１／４程度まで減少した．最終的には過剰な細胞運動および細胞増殖が有意に抑制され，血管平滑筋分化が効率良く促進された．本研究のマイクロ溝基板および細胞接着領域の制御手法を使った培養法は，実際の動脈壁内の組織構造を考慮しつつ，平滑筋分化のメカノトランスダクション機構を調べるための有効なモデル培養系となり得る．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の予定どおり，次年度では実際の動脈壁内の環境（エラスチンを主体とする弾性板に平滑筋細胞が挟まれながら円周方向に配列している）を模擬した独自の細胞培養系を構築することができた．さらに，この培養系を使って培養血管平滑筋細胞内の核を細長く形態変化させることで，実際の動脈壁内の細胞形態と極めて近い状態にしながら，その収縮特性を向上できることを見出した．以上から，研究が順調に進展していると判断できる．
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| 今後の研究の推進方策 |
今後はさらに，初年度構築した顕微鏡化ストレッチシステムと融合させて，動脈壁内での繰返伸展状態を模擬した実験を展開し，力学刺激による平滑筋脱分化の機序を明らかにする知見を得る．特に血清濃度や増殖因子の濃度も調整しながら，力刺激に対する細胞感度がどのように変化するか確認しつつ，その感度を担う細胞内要素を特定していく．
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