| 研究課題/領域番号 |
21H03825
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分90120:生体材料学関連
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| 研究機関 | 北九州市立大学 |
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研究代表者 |
望月 慎一 北九州市立大学, 国際環境工学部, 准教授 (10520702)
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| 研究分担者 |
高原 茉莉 北九州工業高等専門学校, 生産デザイン工学科, 助教 (40804563)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
17,810千円 (直接経費: 13,700千円、間接経費: 4,110千円)
2023年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2022年度: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2021年度: 9,620千円 (直接経費: 7,400千円、間接経費: 2,220千円)
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| キーワード | 薬物送達システム / がんワクチン / 抗原提示 / ヒアルロン酸 / 免疫療法 / ペプチド / 多糖 / 抗原ペプチド |
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| 研究開始時の研究の概要 |
近年、がんワクチン療法では免疫抑制（ブレーキ）を解除するチェックポイント阻害剤が実用化され始めたが、それでも奏効率は3割程度とされる。ブレーキ解除後のCTLの感受性（アクセル）を向上させるための新たな原理に基づく有効な戦略が求められている。本申請では、がん細胞に特異的に認識される多糖を利用し、がん細胞の免疫細胞に対する感受性の向上のために、抗原性の高い外来抗原ペプチドを送達することで、がん細胞の抗原性の改変を試みる。多糖と外来抗原ペプチドから成るコンジュゲート体を作製し、受容体への親和性の評価、がん細胞の外来抗原提示誘導を試みる。
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| 研究実績の概要 |
近年、がんワクチン療法では、免疫抑制を解除するチェックポイント阻害剤が実用化され新しい治療ステージに入りつつあるが、それでも奏効率は3割程度とされる。ブレーキ解除後の細胞傷害性T細胞の感受性を向上させるための新たな原理に基づく有効な戦略が求められている。本研究の目的は「がん組織特異的に抗原性の高いペプチドを細胞表面上に提示させる」ことにある。
ヒアルロン酸（HA）と抗原のオボアルブミンペプチドから成るコンジュゲート体（HA-pep）をがん細胞へ添加し、取り込ませたペプチドが細胞表面上に提示されるか検討した。マウス肺がん細胞（LLC）にHA-pepを添加し、24時間後にMHCクラスⅠ分子に提示されたOVAペプチドを抗マウスOVAペプチド結合H-2Kb抗体で染色し、蛍光顕微鏡観察およびフローサイトメトリー解析を行った。HA-pep処理した細胞からは強い蛍光が観察された。これより、HA-pepは細胞に取り込まれた後ペプチドが遊離し、MHCクラスI分子上に提示されたことが証明された。また、その提示量はOVAペプチド処理と比較しても非常に強いものであった。OVAペプチドは細胞表面上のMHCクラスI分子に直接結合していると考えられるため、抗原提示を誘導させるためには抗原ペプチドを適切に細胞内へ送達させる必要があることも分かった。
HA-pep処理したLLC細胞とOVAとCpGで免疫したマウス脾細胞（OVA特異的CTL含む）を混合させ、24時間後に上清中のインターフェロンガンマ（IFN-g）濃度をELISAで定量した。未処理のLLC細胞と脾細胞を混合させてもIFN-gは検出されなかったが、HA-pep処理したLLCと脾細胞では高濃度でIFN-gが検出された。このことよりHA-pep処理したがん細胞は確かにOVA特異的CTLにより認識されていることが分かった。
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| 現在までの達成度 (段落) |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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