RPA法による迅速な男性成分スクリーニング法の確立

研究課題

研究課題/領域番号	21H04294
研究種目	奨励研究
配分区分	補助金
審査区分	3240:社会医学、看護学およびその関連分野
研究機関	石川県警察科学捜査研究所
研究代表者	久保誠司石川県警察科学捜査研究所, 公務員
研究期間 (年度)	2021-04-01 – 2022-03-31
研究課題ステータス	完了 (2021年度)
配分額 *注記	340千円 (直接経費: 340千円) 2021年度: 340千円 (直接経費: 340千円)
キーワード	RPA法 / ダイレクト法 / 男性DNA
研究開始時の研究の概要	法科学鑑定では、犯罪現場で採取された試料に対してスクリーニング検査を行う。特に、性犯罪においては男性成分の確認が重要な工程となる。一方、効率的な鑑定を行うためには、スクリーニング検査に迅速性・簡便性が求められる。本研究では、迅速・簡便な核酸検出法であるRPA法を利用し、男性特異的な核酸マーカーの検出法を確立する。
研究成果の概要	本研究では、等温増幅（39℃）かつ短時間（20分）の反応系であるRPA法を利用し、男性特異的なDNAを迅速・簡便に検出する方法を開発した。本法により、10 pgまでの男性DNAを検出することができた。また、簡易的なDNA抽出法を組み合わせたダイレクトRPA法により、試料の処理から男性DNAの検出まで30分程度で行うことができた。これらの結果は、RPA法が男性特異的なDNAのスクリーニング検査として有効であることを示唆する。
研究成果の学術的意義や社会的意義	男性DNAのスクリーニングは、性犯罪等の法科学鑑定において重要である。しかし、従来のqPCR法による工程は時間と手間がかかる。本研究で開発したRPA法は、qPCR法に比べて迅速・簡便な方法であり、30分程度で男性DNAの有無を確認できる。よって、法科学鑑定の効率化に貢献できると考えられる。また、反応温度（39℃）が低いことや作業工程が少ないことから、実験室だけではなく現場での即時検出が期待できる。